慢病毒GV115-caspase-3 siRNA重组表达系统的构建及鉴定
本文关键词：慢病毒GV115-caspase-3 siRNA重组表达系统的构建及鉴定
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【摘要】：目的构建高效的慢病毒GV115-caspase-3 siRNA重组表达系统。方法根据RNA干扰序列设计原则,设计4个可能的caspase-3 siRNA序列。应用全基因合成技术和亚克隆技术构建GV115-caspase-3 siRNA并采用PCR和测序对其鉴定。病毒包装后转染人胚肾293T细胞,通过应用RT-PCR技术检测转染后caspase-3基因敲减效率,筛选高效的GV115-caspase-3 siRNA。结果 GV115-caspase-3 siRNA质粒PCR鉴定显示位于341bp附近的条带,测序结果与设计的基因序列完全吻合,4个可能的caspase-3 siRNA序列中基因敲减效率最高的可达到84.2%。结论成功构建高效的慢病毒GV115-caspase-3 siRNA重组表达系统。
【作者单位】： 青岛大学附属医院脊柱外科;
【关键词】： 慢病毒 caspase- RNA干扰 基因治疗
【基金】：国家自然科学基金资助项目(81171758)
【分类号】：R373
【正文快照】： 细胞凋亡是细胞在生理或病理条件下,受到刺激信号的作用以及后续基因调控的一种自主的程序性死亡过程。在哺乳动物中,细胞凋亡通路主要有以下几种通路:死亡受体介导、线粒体介导和内质网介导的细胞凋亡信号转导通路[1]。尽管以上细胞凋亡信号转导通路中细胞凋亡信号以及随后的
【参考文献】
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【共引文献】
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