抗氧化剂2-吲哚啉酮衍生物对NF-κB信号通路的抑制作用

发布时间：2017-09-18 16:20

  本文关键词：抗氧化剂2-吲哚啉酮衍生物对NF-κB信号通路的抑制作用

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【摘要】：目的探讨2-吲哚啉酮衍生物(PMID)对NF-κB信号通路的调控作用。方法用PMID 2,5和10μmol·L-1预处理HEK293T细胞2 h,加入肿瘤坏死因子α(TNF-α)10μg·L-1刺激8 h。用双荧光素酶报告基因系统检测PMID对TNF-α诱导的NF-κB报告基因和ICAM启动子报告基因的影响;对照组HEK293T细胞单用TNF-α10μg·L-1处理,实验组用PMID 10μmol·L-1预处理细胞2 h,加入TNF-α10μg·L-1,分别在0,10,30,60 min后收取细胞,Western蛋白印迹法检测PMID对TNF-α诱导的IκBα降解和P65入核的影响;对照组用PMID 10μmol·L-1处理HEK293T细胞12 h,实验组用10μmol·L-1PMID处理4 h,后用TNF-α10μg·L-1刺激8 h。采用实时荧光定量PCR检测PMID对NF-κB信号通路下游靶基因白细胞介素6(IL-6)、单核细胞趋化因子(MCP)和干扰素γ(IFN-γ)表达的影响。结果 TNF-α单用组与正常对照组比较,NF-κB和IFN-β报告基因活性明显增加(P0.01),ICAM报告基因活性增加(P0.05)。PMID预处理细胞后再采用TNF-α刺激,与TNF-α单用组比较,PMID 2μmol·L-1时,NF-κB和IFN-β报告基因活性降低(P0.05),ICAM报告基因活性无明显变化;PMID 5μmol·L-1时,NF-κB和IFN-β报告基因活性明显降低(P0.01),ICAM报告基因活性降低(P0.05);PMID 10μmol·L-1时,NF-κB,ICAM和IFN-β报告基因活性明显降低(P0.01)。与TNF-α单用组比较,PMID预处理后再用TNF-α处理,在10,30和60 min 3个时间点,IκBα表达增高(P0.05),细胞核中P65表达减弱(P0.05),胞浆中的P65表达增加(P0.05)。加入PMID后,与正常对照组相比,对NF-κB下游靶基因IL-6和MCP的表达明显抑制(P0.01),对IFN-γ有一定的抑制作用(P0.05);加入TNF-α刺激后,与正常对照组相比,IL-6,MCP和IFN-γ表达均显著增高(P0.01);加入PMID处理后,与TNF-α单用组比较,IL-6,MCP和IFN-γ表达均明显下降(P0.05)。结论 PMID作为抗氧化剂,可负调控NF-κB信号通路。
【作者单位】： 安徽医科大学研究生学院;军事医学科学院放射与辐射医学研究所;
【关键词】： -吲哚啉酮衍生物 NF-κB 抗氧化剂 信号转导
【基金】：国家重点基础研究发展计划(973计划)(2011CB915501) 国家高技术研究发展计划(863计划)(2012AA020206)~~
【分类号】：R329.2
【正文快照】： NF-E2相关因子2(NF-E2-ratated 2,Nrf2)-抗氧化反应元件(antioxidant response elements,ARE)信号通路是机体内最重要的抗氧化信号通路,可被外界各种氧化应激条件所诱导,该通路活化后转录因子Nrf2与其DNA结合序列ARE结合并诱导下游靶基因的表达。对Keap1-Nrf2通路活化模式的研

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