不育相关泛素特异性蛋白酶USP26的分子克隆及活性分析

发布时间：2017-09-19 13:21

  本文关键词：不育相关泛素特异性蛋白酶USP26的分子克隆及活性分析

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【摘要】：目的对克隆泛素特异性蛋白酶26(ubiquitin-specific protease 26,usp26)基因进行表达和活性测定。方法采用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR),从小鼠全血中扩增获得usp26基因并测定序列。将基因片段与p GEX-6p-1拼接,应用异丙基-β-d-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-d-thiogalactoside,IPTG)使蛋白表达并利用Ub-Met-β-gal鉴定活性。用多重比对方法分析人类、小鼠及褐家鼠usp26基因编码氨基酸序列的差异。结果本实验克隆出usp26基因。构建出p GEX-usp26质粒,该质粒表达出GST-USP26结合蛋白并测得其活性。三个种属含有相同的赖氨酸结构域(Cys box)与组氨酸结构域(His box)特征部位氨基酸。结论 usp26基因克隆并表达成功,完成活性测定,为进一步探索usp26在男性不育机制方面的作用提供了一种活性研究方法。
【作者单位】： 河北医科大学公共卫生学院流行病与卫生统计学教研室;河北医科大学电子显微镜研究中心;
【关键词】： 泛素化 克隆 分子 不孕 男(雄)性
【基金】：2012年国家级大学生创新训练计划项目(201210089008)
【分类号】：R3411
【正文快照】： (Chin J Dis Control Prev 2015,19(6):547-550)近年来由于生活节奏加快、环境污染、食品安全隐患等原因,人类的生殖水平呈下滑趋势。目前,不育症和低生育能力正困扰着约10%~15%的夫妻,据估计其中半数以上是由于男性不育导致的[1]。2005年Stouffs等[2]首次运用流行病学方法,在

【共引文献】

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1 曹云霞;高明;;精子发生障碍的遗传学研究进展[J];国际生殖健康/计划生育杂志;2014年03期

2 Gulay Gulec Ceylan;Cavit Ceylan;;Genetics and male infertility[J];World Journal of Clinical Urology;2015年01期

3 李倩倩;李莲;刘光磊;陆汉希;王振云;黄文佳;王根林;;BMP7和USP26基因单核苷酸多态性和牛精液品质的相关分析[J];中国兽医学报;2014年05期

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1 张玮;泛素特异性蛋白酶Usp46和Usp26基因错义突变对去泛素化酶活性的影响及其流行病学意义[D];河北医科大学;2013年

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1 张玮;泛素特异性蛋白酶Usp46和Usp26基因错义突变对去泛素化酶活性的影响及其流行病学意义[D];河北医科大学;2013年

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1 岳立达;泛素特异性蛋白酶USP26分子克隆及活性检测[D];河北医科大学;2013年

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本文编号：881883