环介导恒温扩增技术快速检测鼠疫耶尔森菌

发布时间：2017-09-20 20:30

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【摘要】：目的建立简单、快速环介导恒温扩增技术(LAMP)检测鼠疫耶尔森菌的方法。方法基于鼠疫菌染色体上特异的核酸序列3a设计引物;应用浊度仪和目视法对反应结果进行检测;通过对鼠疫菌和其他近源菌同时进行检测评价方法的特异性;通过对不同稀释浓度的鼠疫菌DNA模板进行LAMP和PCR检测以确定方法的灵敏度。结果用建立的LAMP法对与鼠疫菌近源30种其他菌株进行扩增,结果均为阴性,该方法具有很高的特异性。LAMP法检测鼠疫菌DNA的灵敏度可达到20 pg,比常规PCR法高10倍。检测反应在25 min以内完成。结论该方法具有快速、灵敏、特异、操作简单的特点,有望发展成为现场快速检测鼠疫菌的有效手段。
【作者单位】： 安徽医科大学;军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室;
【关键词】： 鼠疫耶尔森菌 环介导恒温扩增技术 检测
【基金】：国家自然科学基金资助项目(31430006,81171529) 国家重点基础研究发展计划课题(2014CB744405)
【分类号】：R378.61
【正文快照】： 鼠疫是由鼠疫耶尔森菌(Yersinia pestis)引起的一种传染性强、死亡率高的烈性传染病,同时鼠疫菌又是一种标准的生物战剂和生物恐怖剂,也是生物战和生物恐怖最有可能使用的生物剂之一。鼠疫菌是在6000~10 000年前从假结核耶尔森菌(Y.pseudotuberculosis)进化来的[1]。鼠疫在历

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 于学东,裴德翠,宋亚军,郭兆彪,王津,李永勤,杨瑞馥;多重PCR快速鉴定鼠疫耶尔森氏菌[J];中国人兽共患病杂志;2003年03期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 黄德蕙,林新勤,秦石英,梁江明,鲁翠芳,韦锦平,周树武,陈达宗;应用RIHA,Kado,PCR法检测鼠疫菌Fra1抗原的对比研究[J];地方病通报;2004年01期

2 郭丽民;梁效成;张宏;;鼠疫分子生物学检测技术的研究进展[J];地方病通报;2008年04期

3 赵斌;刘振才;王忠惠;;应用内部对照PCR技术检测鼠疫菌DNA[J];中国地方病防治杂志;2007年04期

4 宝建喜;高伟;刘秀芬;张春华;;鼠疫耶尔森氏菌快速检测研究进展[J];中国地方病防治杂志;2007年05期

5 李禾;吴忠华;郑伟;吕沁风;;复合探针荧光定量PCR法检测鼠疫耶尔森氏菌的实验研究[J];中国国境卫生检疫杂志;2011年06期

6 陈劲华;石国祥;翁正军;朱志宏;傅涛;骆淑英;;2006-2011年浙江省义乌市鼠疫血清学和病原学动态监测[J];疾病监测;2012年10期

7 程晓兰;崔丽伟;叶向光;;虫媒传染病分子生物学技术研究[J];口岸卫生控制;2014年02期

8 郑爱新;于国林;;鼠疫耶尔森菌检测技术研究进展[J];现代预防医学;2009年02期

9 张玲,翟俊辉,周冬生,郭兆彪,毕玉晶,王津,杨瑞馥;荧光定量PCR快速检测鼠疫耶尔森氏菌的实验研究[J];中国人兽共患病杂志;2005年03期

10 边归国;生物恐怖因子检测技术的进展[J];中国卫生检验杂志;2004年05期

中国博士学位论文全文数据库 前1条

1 庞昕;鼠疫耶尔森氏菌基因表达谱技术平台的建立与应用[D];中国人民解放军军事医学科学院;2004年

中国硕士学位论文全文数据库 前7条

1 张玲;实时定量PCR快速检测鼠疫耶尔森氏菌和炭疽芽孢杆菌的研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2005年

2 谭亚芳;肽核酸（PNA）探针检测鼠疫耶尔森氏菌的研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2006年

3 赵红庆;五种致腹泻大肠埃希菌的多重PCR检测研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2007年

4 胡瑞华;鼠疫F1抗原胶体金试纸条的研制及初步应用[D];重庆医科大学;2007年

5 曲识;室温稳定PCR试剂及其在鼠疫菌检测中的应用的研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2010年

6 魏嘉良;蜱传媒病中鼠疫、野兔热病原检测方法的建立及疫病情况调查[D];吉林农业大学;2013年

7 卢琴;云南撒坝猪大肠杆菌HPI主要结构基因及其致病性研究[D];云南农业大学;2014年

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前4条

1 郭兆彪,张敏丽,汪晓辉,王津,杨瑞馥,张春华,丛显斌,张景林;用UDPE技术检测和鉴定鼠疫耶尔森氏菌[J];中国地方病防治杂志;1999年05期

2 李书宝,戴绘;世界鼠疫疫情态势及研究进展[J];中国地方病防治杂志;2000年01期

3 宝建喜,张爱君,唐玉红;四种方法检测鼠疫菌的实验研究[J];中国地方病防治杂志;2000年02期

4 张敏丽,郭兆彪,宋亚军,汪晓辉,王津,杨瑞馥,丛显斌;从动物和土壤中直接检测鼠疫耶尔森氏菌[J];中国地方病学杂志;2000年01期

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 李毅;王良怀;李小春;张孝和;洪程基;章乐怡;陈慧燕;吴跃进;;温州地区鼠类携带耶尔森菌检测研究[J];中国卫生检验杂志;2009年01期

2 古文鹏;景怀琦;;耶尔森菌致病机理研究[J];中国人兽共患病学报;2010年09期

3 李可维;景怀琦;;致病性耶尔森菌感染与细胞因子相关性的研究进展[J];中国人兽共患病学报;2013年01期

4 郑薛斌;;小肠结肠类耶尔森菌依温毒性的研究[J];广西医学院学报;1992年02期

5 郑浩轩;张明军;孙勇;姜泊;;实时定量聚合酶链反应检测腹泻粪便中小肠结肠炎耶尔森菌的研究与评价[J];中华医学杂志;2006年32期

6 郭惠;杨晋川;张雷;陈勇;刘金芳;许静静;丁韧;王璐梅;;徐州地区小肠结肠耶尔森菌的分布特征[J];中国人兽共患病学报;2008年10期

7 黄瑛;景怀琦;;耶尔森菌侵袭性研究进展[J];中国人兽共患病学报;2009年07期

8 王红娅;刘月淑;王玲;王翠兰;徐锡;张桂芳;;耶尔森菌选择培养基在鼠疫耶尔森菌分离培养中的应用[J];宁夏医学杂志;2011年03期

9 梁俊容;景怀琦;;耶尔森菌抵抗宿主免疫并诱导吞噬细胞凋亡机制研究[J];中国人兽共患病学报;2011年08期

10 钱月贞;耶尔森菌病1例报告[J];临床荟萃;1999年16期

中国重要会议论文全文数据库 前3条

1 江凌晓;;鼠疫耶尔森菌外膜蛋白研究进展[A];新世纪预防医学面临的挑战——中华预防医学会首届学术年会论文摘要集[C];2002年

2 江凌晓;;鼠疫耶尔森菌外膜蛋白研究进展[A];新世纪预防医学面临的挑战——中华预防医学会首届学术年会论文摘要集[C];2002年

3 徐兴强;陈学军;程永樟;曾永胜;;三种方法分离培养粪便中小肠结肠炎耶尔森菌的比较[A];2004年浙江省检验医学学术会议论文汇编[C];2004年

中国博士学位论文全文数据库 前3条

1 刘颖;人类粪便中小肠结肠炎耶尔森菌检测方法的研究[D];南方医科大学;2011年

2 江凌晓;应用蛋白质芯片技术分析鼠疫耶尔森菌致病相关蛋白抗体表达谱的实验研究[D];第一军医大学;2004年

3 胡静;EAggEC携带的耶尔森菌HPI毒力的功能研究[D];第一军医大学;2002年

中国硕士学位论文全文数据库 前7条

1 王鑫;中国小肠结肠炎耶尔森菌分子流行病学研究[D];中国疾病预防控制中心;2009年

2 孙文魁;小肠结肠炎耶尔森菌生物学特性和分子分型研究[D];山东大学;2013年

3 李可维;致病性耶尔森菌外膜蛋白A基因多态性研究[D];中国疾病预防控制中心;2013年

4 罗敏红;建立环介导等温扩增方法检测腹泻患者中的小肠结肠炎耶尔森菌[D];南方医科大学;2013年

5 王增国;我国部分地区携带ystB基因小肠结肠炎耶尔森菌的分子流行病学研究[D];江苏大学;2008年

6 梁俊容;中国小肠结肠炎耶尔森菌在生猪中的分布及传播方式的研究[D];中国疾病预防控制中心;2012年

7 古文鹏;致病性小肠结肠炎耶尔森菌生物血清型1B/O:8和2/O:9不同温度培养条件下相关抗原和蛋白质组学比较研究[D];中国疾病预防控制中心;2011年

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本文编号：890221