体外诱导人羊膜上皮细胞分化为结膜上皮样细胞的实验研究

发布时间：2017-09-22 04:21

  本文关键词：体外诱导人羊膜上皮细胞分化为结膜上皮样细胞的实验研究

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【摘要】：目的：建立体外培养人羊膜上皮细胞（HAECs）和兔结膜上皮细胞的方法，通过将两种细胞共培养，观察并检测是否能将人羊膜上皮细胞诱导分化为结膜上皮样细胞。 方法：①分别采用酶消化法和组织块法获得HAECs和兔结膜上皮细胞，并对培养的细胞进行形态学观察；②将HAECs和兔结膜上皮细胞在Transwell非接触共培养系统中共培养10天，，以诱导HAECs分化；③通过倒置显微镜和原子力显微镜对诱导前后的HAECs进行形态学及超微结构比较，对诱导前后的HAECs进行PAS染色、HE染色，免疫荧光法检测诱导前后HAECs中CK4、MUC4、MUC5AC的表达，实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测分化细胞MUC4、MUC5AC mRNA的表达。 结果：共培养后的人羊膜上皮细胞和兔结膜上皮细胞形态较为相似，诱导后的HAECs中可见少量PAS阳性细胞，细胞免疫荧光法检测到诱导后HAECs中CK4、MUC4、MUC5AC呈阳性表达，qRT-PCR检测到分化后细胞MUC4、MUC5AC mRNA表达水平较诱导前上调。 结论：HAECs在与兔结膜上皮细胞共培养诱导条件下，可以向结膜上皮样细胞和杯状细胞转分化。
【关键词】：人羊膜上皮细胞 共培养 转分化 兔结膜上皮细胞 组织工程结膜
【学位授予单位】：暨南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R329.2
【目录】：

• 中文摘要3-4
• Abstract4-5
• 目录5-6
• 前言6-9
• 1．结膜的组织结构和功能6
• 2. 结膜重建的主要治疗方法6
• 3. 组织工程结膜的研究进展6-8
• 4. 人羊膜上皮细胞的干细胞特性及其在结膜重建的应用前景8-9
• 第一部分 人羊膜上皮细胞和兔结膜上皮细胞的体外培养及鉴定9-17
• 材料与方法10-15
• 结果15-16
• 讨论16-17
• 第二部分 诱导人羊膜上皮细胞向结膜上皮样细胞转分化及鉴定17-27
• 材料与方法18-24
• 结果24-25
• 讨论25-27
• 全文结论27-28
• 参考文献28-34
• 附图34-47
• 在学期间发表论文47-48
• 致谢48

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

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本文编号：898755