Caco-2细胞TLR2和TLR4对微小隐孢子虫刺激信号的识别

发布时间：2017-09-25 03:03

  本文关键词：Caco-2细胞TLR2和TLR4对微小隐孢子虫刺激信号的识别

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【摘要】：目的研究Caco-2细胞在微小隐孢子虫感染后TLRs的激活情况。方法微小隐孢子虫子孢子刺激Caco-2细胞后,通过qRT-PCR检测TLRs mRNA的表达水平,采用Western blot检测NF-κB激活情况,采用ELISA检测IL-8的分泌量。同时,在微小隐孢子虫子孢子感染Caco-2细胞前加入TLR2或TLR4的抑制剂,检测NF-κB激活情况以及IL-8的分泌情况。结果将Caco-2细胞感染微小隐孢子虫子孢子2h后,提取的RNA反转成cDNA,采用普通PCR进行检测,结果表明Caco-2能够表达所有10种人TLRs;qRT-PCR检测刺激组与对照组TLRs表达量,经spss分析,p0.01,刺激组TLR2和TLR4的表达量较对照组显著上调。对Caco-2细胞感染微小隐孢子虫子孢子1h后提取的细胞全蛋白进行Western blot,显示NF-κB激活水平较对照组显著上调;Caco-2细胞感染微小隐孢子虫子孢子12h后收集的细胞培养上清经ELISA检测,IL-8分泌量由刺激前的65.23pg/ml显著上调至488.23pg/ml。而在微小隐孢子虫子孢子感染Caco-2细胞前加入TLR2或TLR4的抑制剂,NF-κB激活水平和IL-8的分泌量较未加抑制剂感染组均显著下调,IL-8的分泌量分别降至204.02pg/ml(抑制TLR2活性后)和142.79pg/ml(抑制TLR4活性后)。结论 Caco-2细胞的TLR2和TLR4参与对微小隐孢子虫子孢子的识别。
【作者单位】： 吉林大学动物医学学院;广东省农业科学院动物卫生研究所;
【关键词】： 微小隐孢子虫 Caco- TLR NF-Κb
【基金】：国家科技支撑计划项目(No.2007BAD40B05) 广州市科技计划(No.2013J4100124)
【分类号】：R382.3
【正文快照】： ***微小隐孢子虫是一种寄生在肠道上皮细胞中的顶复门原虫,常常可通过污染水源而造成所致疾病隐孢子虫病的暴发。同时,隐孢子虫病也是艾滋病患者、器官移植等处于免疫抑制状态的患者的致死因素之一[1,2]。1993在美国密尔沃基市暴发隐孢子虫病,居民感染率达26%,造成了巨大的损

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本文编号：914979