低氧和糖皮质激素上调巨噬细胞小G蛋白RhoB表达及其生物学意义的研究

发布时间：2017-09-26 16:36

  本文关键词：低氧和糖皮质激素上调巨噬细胞小G蛋白RhoB表达及其生物学意义的研究

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【摘要】：缺氧是临床最常见的病理生理过程，全身性缺氧与高原性疾病、呼吸系统和心血管疾病等的发生发展密切相关。而局部性缺氧常见于心脑血管的梗塞、炎症和过度的组织增生（如肿瘤）等。低氧和炎症常同时发生，低氧可以激活免疫细胞（巨噬细胞、树突状细胞和淋巴细胞），导致这些细胞基因表达和炎症因子分泌的改变，从而参与炎症反应。这是低氧导致炎症反应和组织损伤的原因之一，也是导致肿瘤炎症微环境的重要因素。糖皮质激素（Glucocorticoid, GC）是体内最重要的应激激素，已证实在低氧条件下GC分泌增多。糖皮质激素受体（Glucocorticoid receptor,GR）是配体依赖性的转录因子，，GC能在GR介导下，通过调节基因表达，在低氧适应及维持内环境稳态中发挥作用。但是目前已知的能介导低氧适应和GC作用的靶基因还不多，进一步寻找这些靶基因对于阐明低氧的适应机制和GC的作用机制有重要意义。 RhoB是小G蛋白家族一个成员，主要存在于细胞的内体（endosome），RhoB在GTP结合（活性态）和GDP结合（非活性态）之间转换，与GTP结合的RhoB能激活下游的信号转导通路，参与不同的细胞过程，如调节细胞的骨架重组和囊泡运输，并作为肿瘤抑制蛋白，调节肿瘤细胞的增殖、凋亡等过程。已知生长因子、细胞因子和基因毒应激等可以快速上调RhoB的表达。国外有研究显示，与野生型小鼠骨髓巨噬细胞相比，从RhoB基因敲除小鼠骨髓中分离的巨噬细胞（RhoB-/-）与玻璃板的粘附作用减弱，但迁移加快，提示RhoB参与调节巨噬细胞与基质的粘附和迁移。我们前期的工作也发现GC能在包括巨噬细胞在内的多种细胞中上调RhoB的表达，近期又发现低氧可以上调肺组织和A549细胞中RhoB的表达。但是低氧能否上调巨噬细胞的RhoB，RhoB是否参与了GC对巨噬细胞的作用还不清楚。本课题首先观察了低氧单独以及低氧和Dex联合作用对RhoB表达的影响，在此基础上进一步观察了RhoB对巨噬细胞粘附和迁移行为的影响以及与Dex对巨噬细胞作用的关系，以进一步阐明RhoB在低氧适应、巨噬细胞功能调节和GC效应中可能的作用。 我们的工作发现，低氧可以上调大鼠脾脏组织以及小鼠腹腔巨噬细胞系RAW264.7细胞中RhoB mRNA和蛋白的表达。人工合成的糖皮质激素-地塞米松（Dex）也能明显诱导RAW264.7细胞RhoB表达，与低氧联合处理细胞可使RhoB的表达进一步增加。采用siRNA干扰技术抑制RhoB表达可使巨噬细胞与培养板的粘附作用明显减弱，而迁移增强，表明RhoB具有促进巨噬细胞粘附和抑制其迁移的作用。我们还发现，Dex具有促进巨噬细胞粘附和抑制其迁移的作用。抑制RhoB的表达可使Dex的上述作用减弱，表明Dex诱导RhoB表达介导了Dex促进巨噬细胞粘附和抑制其迁移的作用。另外，我们研究了常氧和低氧的条件下，RhoB的表达受到抑制后对巨噬细胞炎症因子表达的影响，我们发现低氧可以上调巨噬细胞炎症因子表达，同时无论在常氧还是低氧的条件下，RhoB的表达受到抑制后，IL-1β,IL-6,TNF-α的mRNA水平都是下降的，其中IL-1β,IL-6的mRNA表达明显的降低，上述结果表明，RhoB参与到低氧促进巨噬细胞炎症因子表达的过程中。
【关键词】：低氧 糖皮质激素 RhoB 巨噬细胞功能
【学位授予单位】：第二军医大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R363
【目录】：

• 摘要5-7
• Abstract7-9
• 缩略语9-10
• 前言10-13
• 材料与试剂13-15
• 实验方法15-22
• 实验结果22-32
• 讨论32-34
• 参考文献34-37
• 小结和展望37-38
• 综述38-44
• 参考文献42-44
• 致谢44-46

【共引文献】

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1 侯艳鹏;王铁;;RhoC mRNA在喉癌中的表达及临床意义[J];蚌埠医学院学报;2009年05期

2 胡礼仪;周业庭;臧家兰;吴柏华;杨继武;;肝细胞癌患者RhoC蛋白、CD44v6与微血管密度的关系[J];重庆医学;2011年04期

3 石铮,王家兴,何庆良,曾金华,陈有挺;RhoC反义基因转染对人胆管癌QBC939细胞生长的抑制作用[J];福建医科大学学报;2005年01期

4 侯艳鹏;王铁;;RhoA蛋白在喉癌组织中的表达及意义[J];临床肿瘤学杂志;2010年07期

5 谭晓东;左保燕;高妍;艾笑羽;王永军;何仲贵;;水溶性聚合物对2-羟丙基-β-环糊精与尼群地平包合作用的影响[J];中国药剂学杂志(网络版);2011年02期

6 罗先道;郭淑丽;杨磊;曾妍;赵瑾;;新疆卡波西肉瘤组织中MT1-MMP和ARHGDIB蛋白的表达[J];现代生物医学进展;2009年12期

7 贾雅丽;姚海雷;岳文;裴雪涛;;小G蛋白RhoA与细胞发育[J];中国生物化学与分子生物学报;2009年03期

8 侯艳鹏;王铁;;RhoC蛋白在喉癌中的表达及意义[J];现代肿瘤医学;2010年03期

9 董玉金;吴纪霞;王兴丹;曹丽丽;韩琴芳;周新文;;LyGDI真核表达载体构建及稳定转染A549细胞株的建立[J];苏州大学学报(医学版);2009年01期

10 贺晓琪;熊宇芳;钱颖;蔡惠兰;王泽华;;RhoC GTP酶的表达与宫颈癌侵袭和转移的关系[J];华中科技大学学报(医学版);2010年04期

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1 朱金明;Tiam 1对胃癌侵袭转移的影响及机制[D];第三军医大学;2005年

2 郑文建;RhoC-siRNA表达载体的构建及其对肝癌细胞侵袭、转移能力的影响作用[D];第三军医大学;2007年

3 贺晓琪;RhoCGTP酶对宫颈癌侵袭转移的影响以及与上皮间质转化的相互调控机制[D];华中科技大学;2008年

4 俞丽丽;印迹基因H19对滋养细胞功能的影响及相关信号传导分子的研究[D];第三军医大学;2009年

5 姜梅;前列腺癌基因组学研究及雄激素信号通路在前列腺癌中作用的初探[D];复旦大学;2009年

6 解英俊;Cdc42-shRNA表达载体的构建及其对肝癌细胞生物学行为的影响[D];吉林大学;2010年

7 周新华;CD99+/mCD99L2-调控H/RS细胞与B淋巴瘤细胞转化蛋白质组学研究及相关通路分析[D];南方医科大学;2012年

8 王东娟;胰高血糖素样肽-1介导cAMP/PKA/Rho信号通路在糖尿病心肌微血管损伤中的保护作用[D];第四军医大学;2013年

9 金重赢;MicroRNA在雷帕霉素诱导的内皮细胞增殖和迁移抑制中的作用及机制[D];浙江大学;2013年

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1 韩新美;妊娠期大鼠胎盘组织中Rho/ROCK蛋白变化特点的研究[D];第三军医大学;2011年

2 王家兴;RhoC基因对胆管癌CyclinD1和Cathepsin B基因的影响[D];福建医科大学;2005年

3 侯艳鹏;Rho蛋白（RhoA、RhoB、RhoC）及mRNA在喉癌中的表达及意义[D];中国医科大学;2007年

4 吴燕妮;肺鳞癌、腺癌中RhoC及其调节因子RhoGDIα的表达研究[D];中国医科大学;2007年

5 肖建军;RhoGDI蛋白在肺癌组织中的表达和意义[D];苏州大学;2008年

6 赵增强;RhoC蛋白与胃癌侵袭转移相关性的初步研究[D];第三军医大学;2006年

7 张晓梅;应用RhoA shRNA对原发性肝癌生物学行为的调控研究[D];华中科技大学;2007年

8 邵静;肝癌细胞粘附和收缩调节对Rho蛋白表达影响的实验研究[D];重庆大学;2008年

9 董玉金;LyGDI在肿瘤细胞辐射凋亡敏感性中的作用与P53调控研究[D];苏州大学;2009年

10 金贻铎;低氧和糖皮质激素对小G蛋白RhoB表达的上调作用及其机制[D];第二军医大学;2010年

本文编号：924629