慢病毒载体介导CGRP基因体外转染及对MSC生物学特性的影响

发布时间：2017-10-02 13:22

  本文关键词：慢病毒载体介导CGRP基因体外转染及对MSC生物学特性的影响

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【摘要】：目的探讨慢病毒载体介导降钙素基因相关肽(CGRP)基因体外转染间充质干细胞(MSC)及其对MSC生物学特性的影响。方法大鼠MSC进行分离、培养及鉴定。CGRP重组慢病毒转染MSC后,采用荧光显微镜和流式细胞技术测定其转染率。实时定量PCR、免疫荧光细胞化学及ELISA法检测MSC中CGRP的表达。慢病毒转染后通过MTT、β-半乳糖苷酶染色和诱导分化评价MSC的增殖、衰老及分化能力。结果慢病毒载体介导CGRP基因转染MSC后48h可稳定表达,MOI=30时,转染率达80%以上。与MSC组和空载病毒转染(MSC-EGFP组)比较,CGRP修饰的MSC(MSC-CGRP组)中CGRP的mRNA和蛋白表达水平增高(均P0.01)。MTT、β-半乳糖苷酶染色和诱导分化结果显示,病毒转染后对MSC增殖、衰老及向内皮分化基本没有影响。结论 MSC是一种理想的基因载体细胞,可作为CGRP基因转染的靶细胞用于基因治疗,为后续体内、体外实验奠定基础。
【作者单位】： 遵义医学院附属医院心血管内科;
【关键词】： 降钙素基因相关肽 转染 间充质干细胞 生物学特性
【基金】：国家自然科学基金资助项目(81060014)
【分类号】：R373
【正文快照】： 本研究小组前期的研究显示,骨髓间充质干细胞(MSC)移植能在一定程度上促进损伤动脉内皮的修复,但其对血管平滑肌细胞(VSMC)的影响较小[1-2]。降钙素基因相关肽(CGRP)具有抑制VSMC增殖的作用,但CGRP在外周血的半衰期很短,需要通过合适的载体和靶细胞将其带入体内来持续发挥作用

【共引文献】

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本文编号：959850