小泛素相关修饰蛋白特异性蛋白酶1对脐静脉内皮细胞增殖、迁移和凋亡的影响

发布时间：2017-10-04 13:12

  本文关键词：小泛素相关修饰蛋白特异性蛋白酶1对脐静脉内皮细胞增殖、迁移和凋亡的影响

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【摘要】：目的探讨小泛素相关修饰蛋白特异性蛋白酶1(SENP1)对脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖、迁移及凋亡的影响。方法用20个感染复数的p LKO.1-SENP1-小发夹RNA(shRNA)-绿色荧光蛋白(GFP)干涉慢病毒(SENP1干涉组)和p PIG-U6-随机序列(scramble)-GFP对照慢病毒(GFP-SC对照组)感染HUVEC。病毒感染HUVEC 48 h后,用流式细胞仪检测慢病毒的感染效率,实时荧光定量PCR(RT-PCR)和Western蛋白质印迹法检测HUVEC内SENP1基因和蛋白表达水平。用CCK8试剂盒检测细胞增殖能力,Transwell小室法检测细胞的迁移能力,流式细胞仪分析细胞凋亡率。结果 GFP-SC对照组和SENP1干涉组感染效率均97%。与GFP-SC对照组比较,SENP1干涉组HUVEC SENP1基因和蛋白表达水平显著降低(P0.01)。CCK8法测定结果表明,SENP1干涉组HUVEC增殖能力较GFP-SC对照组明显降低(P0.01)。SENP1干涉组细胞迁移过Transwell小室的细胞数量明显低于GFP-SC对照组(P0.01)。用低浓度血清(含2%胎牛血清)培养基诱导细胞凋亡24 h,SENP1干涉组细胞凋亡率即已升高到GFP-SC对照组的2倍左右(P0.05);诱导凋亡至48 h,SENP1干涉组细胞凋亡率升高到对照组的3.2倍左右(P0.05)。结论 HUVEC内SENP1表达水平的降低不仅可以显著抑制细胞增殖和迁移能力,亦可促进细胞凋亡。
【作者单位】： 兰州大学第二医院;军事医学科学院放射与辐射医学研究所实验血液学研究室;中国人民解放军兰州军区兰州总医院;
【关键词】： 脐静脉内皮细胞 小泛素相关修饰蛋白特异性蛋白酶 细胞增殖 细胞迁移 细胞凋亡
【基金】：国家自然科学基金(81273568);国家自然科学基金(81372924);国家自然科学基金(81402558)~~
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 血管内皮细胞位于血细胞和血管壁的分界面,它不仅具有屏障作用,还可分泌多种因子以介导凝血和止血等生物学过程。内皮细胞的损伤常常引发血管内皮细胞功能的失调,从而导致如血栓、炎症和病理性免疫反应等病理过程的发生。除此之外,内皮细胞在肿瘤和血管新生性疾病的发生和发展

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9 陈，

本文编号：970856