牙体修复性纳米羟基磷灰石的生物相容性的评价

发布时间：2018-06-02 03:21

  本文选题：纳米羟基磷灰石 + 复合材料　； 参考：《滨州医学院》2012年硕士论文

【摘要】：目的： 牙体充填材料与人体尤其是口腔黏膜组织长期接触,理想的修复材料应具有良好的生物相容性以及生物学活性。纳米羟基磷灰石作为一种生物活性材料,以其优异的性能在牙科和骨科领域展现出诱人的应用前景,将其赋予更强的机械性能后即可应用于牙体缺损的修复。本实验依据医用生物材料(植入体)安全性评价的有关标准,初步评价该牙体修复性纳米羟基磷灰石复合材料的生物相容性,为该材料的最终临床应用的安全性提供理论基础和实验依据。 方法： 实验1牙体修复性纳米羟基磷灰石复合材料的制备：将经过硅烷偶联剂KH-570进行表面处理后的纳米羟基磷灰石(Nano-hydroxyapatite, NHA)与光固化有机基质共混,制备成复合材料(由质量份数55：45的纳米羟基磷灰石与树脂基体所构成),遮光密封于玻璃容器中备用,将实验材料在模具中制备成直径15.Omm±0.1mm,高3.0±0.1mm的圆柱形试件,光照固化,备用。 实验2材料浸提液的提取：取实验试件20个,经测量计算后其平均表面积为4.95cm2,试件经过超声清洗、干燥、高压灭菌处理后放入2个无菌广口瓶中,每瓶10个试件,按照材料表面积与浸提介质之比为1cm2/ml分别加入生理盐水49.50m1,置于37℃培养箱中浸提72h,过滤,分装,放入37℃恒温箱保存备用。 实验3急性全身毒性实验：将浸提液通过尾静脉注射给予大鼠,在注射后即刻、24、48、72小时观察实验组和对照组大鼠的一般状态、毒性表现和死亡动物数,以及72小时后的动物体重。 实验4热原实验：自大鼠尾静脉按1ml剂量注入浸提液,注射后测量体温,每隔30min测量一次,连续6次,6次体温中最高的一次减去正常体温为为试验大鼠体温升高值,测试环境22℃。 实验5过敏实验：受试动物平均分为两组,实验组注射浸提液,对照组经相同时间点注射同等质量的生理盐水,经过供试品的两步诱导和激发后,观察激发部位皮肤情况。 实验6口腔黏膜刺激实验：将实验材料(牙体修复性纳米羟基磷灰石复合材料)和对照材料(卡瑞斯玛复合树脂)经过高压灭菌处理后缝合至大鼠口腔两侧颊黏膜表面,术后14d观察粘膜有无充血糜烂及溃疡、水肿反应。 实验7皮肤刺激试验：在受试大鼠椎旁两侧对称位置处选3个注射点,间距1cm,分别注射浸提液以及生理盐水,注射剂量均为1m1,分别于注射后24、48、72h观察实验组和对照组动物的皮肤刺激情况并且分级。 实验8骨埋植实验：将消毒后的受试材料(牙体修复性纳米羟基磷灰石复合材料)和对照材料(卡瑞斯玛复合树脂)分别埋植在大鼠股骨内,在规定时间点(1w,2w,4w)取材行大体标本观察和病理组织切片,以评价材料植入后的局部反应与动物机体的组织相容性。 实验9肌肉埋植实验：将测试样品和对照样品分别无菌植入受试动物的左右两侧腿部肌肉中,在植入后1、2、4周时进行植入部位组织实验室观察和病理解剖,并对观察结果进行分析； 实验10体外细胞毒性实验(MTT)：根据ISO标准采用体外细胞毒实验(MTT法),测试人牙龈成纤维细胞在牙体修复性纳米羟基磷灰石复合材料浸提液中培养1、3、5d的吸光度值(OD值),观察细胞形态变化,计算细胞相对增殖率并进行细胞毒性分级。 结果： 1、在急性全身毒性实验中,注射后所有动物于各观察时间点(24h,48h,72h)一般状况良好,实验组动物症状和体重的变化都在可接受的范围之内,均没有出现毒性反应,无动物死亡,可以认为新型牙体修复性纳米羟基磷灰石复合材料无急性全身毒性作用。 2、热原实验中6只大鼠中无1只在注射后体温升高超过0.4℃,而且每3只大鼠的体温升高总和均小于1.4℃,可以认为新型牙体修复性纳米羟基磷灰石复合材料没有致热性。 3、过敏实验中末次注射后所有实验组和对照组动物一般情况良好,均未出现竖毛、抽搐、喷嚏、呼吸困难、用爪搔鼻、休克、大小便失禁、死亡等反应,可认为该新型牙体修复性纳米羟基磷灰石复合材料对机体无致敏性。 4、口腔黏膜刺激实验中所有受试动物均未出现全身不良反应,实验试样均无松动,无脱落,与实验试样相接触的颊黏膜未见粗糙、红肿、糜烂及溃疡反应,可认为该新型牙体修复性纳米羟基磷灰石复合材料对口腔黏膜无刺激性。 5、皮肤刺激实验局部注射24、48、72h后,材料浸提液组及生理盐水组的每个注射点均没有红斑、水肿、渗液及溃烂等情况出现,都未发现明显皮肤刺激症状,表明该新型牙体修复性纳米羟基磷灰石复合材料对皮肤无刺激作用。 6、骨埋植和肌肉埋植实验中,材料被植入后未见周围组织明显坏死,1周时有轻度炎症反应,随时间推移,炎症反应逐渐消退。结果表明,新型牙体修复性纳米羟基磷灰石复合材料在局部植入后有良好的组织相容性。 7、体外细胞毒性实验中,实验组与阴性对照组相比均未发现明显形态差异。定量测试结果表明,实验品毒性为0-1级,定量测试和定性测试的结果均表明该新型牙体修复性纳米羟基磷灰石复合材料对生物机体无明显细胞毒性。 结论： 本实验初步证明该新型牙体修复性纳米羟基磷灰石复合材料在本研究的实验条件下,对生物机体无致热性、无致敏性、无刺激性,无明显急性毒性,局部植入后有良好的组织相容性,无明显细胞毒性。上述各实验结果均表明该新型的牙体修复性纳米羟基磷灰石复合材料对机体组织无明显毒害作用,具有较高的生物安全性和良好的组织相容性,为进一步临床实验提供了可靠的安全性数据。
[Abstract]:Objective:
Dental filling materials are in long term contact with the human body, especially the oral mucosa. The ideal restorative material should have good biocompatibility and biological activity. As a biological active material, nano hydroxyapatite is used as a bioactive material, and its excellent performance is shown in the field of Dentistry and Department of orthopedics. The experiment can be applied to the repair of dental defect. This experiment is based on the standards of medical biomaterial (implant) safety evaluation, and evaluates the biocompatibility of the restorative nano hydroxyapatite composite material, which provides the theoretical basis and experimental basis for the safety of the final clinical application of the material.
Method锛，

本文编号：1967136