直流电场对鸡胚尿囊膜载羟基磷灰石模型血管化的实验研究

发布时间：2019-03-25 15:28

【摘要】：背景:实验一:利用第8天至第12天鸡胚尿囊膜(Chicken embryo allantoic membrane,CAM)血管的快速生长期,可研究羟基磷灰石(Hydroxyapatite,HA)对CAM血管生长的影响情况。实验二:将外源性直流电场(Direct Current Electric Field,DCEF)加入鸡胚尿囊膜载羟基磷灰石模型后,观察CAM血管化变化,可观察DCEF对区域血管生长的影响。目的:实验一:HA加载于鸡胚CAM模型,建立研究血管化的模型。实验二:于建立好的鸡胚尿囊膜载羟基磷灰石模型上,加载稳恒DCEF,观察其对CAM血管化的影响,探讨稳恒DCEF在促进组织工程骨的快速预血管化及成骨方面可能具有的重大作用。方法:实验一:将12枚罗曼品系鸡蛋于相同适宜条件下孵化至第8天,开窗后随机分为2组,实验组植入羟基磷灰石材料,建立鸡胚尿囊膜载羟基磷灰石模型;对照组放入滤纸材料,密封后移入恒温恒湿箱内继续孵化。待孵化至第12天后,通过CSW-X视频显微镜采集图像,Image J收集CAM血管长度及单位面积血管长度数据资料,以及切片观察羟基磷灰石及滤纸材料上的血管新生状况。实验二:将12枚孵化至第8天的罗曼品系鸡蛋开窗后,植入羟基磷灰石材料,建立鸡胚尿囊膜载羟基磷灰石模型后,于羟基磷灰石表面滴加融化琼脂覆盖,随机均分为2组;密封后移入恒温恒湿箱内,使用银针插入琼脂内导电,实验组加载-1.5v外源性稳恒dcef后继续孵化,对照组不加载dcef继续孵化。待加电24、48小时后,通过csw-x视频显微镜采集图像,imagej和angiotool软件收集血管长度及血管生长方向数据资料,以及切片观察羟基磷灰石材料内血管新生状况。结果:实验一:(1)待孵化至12天后,实验组标本平均cam血管新生成长度为24.031±2.735mm,平均单位面积血管新生成长度为0.242±0.046mm/mm2;对照组标本平均cam血管新生成长度为23.561±1.661mm,平均单位面积血管新生成长度为0.212±0.052mm/mm2,组间血管新生成长度及平均cam血管新生成长度比较差异无显著性意义(p0.05);(2)实验组羟基磷灰石材料切片标本有明显类血管组织生成。实验二:(1)加电孵化24小时后,实验组标本平均cam血管生成长度为11.93±0.89mm,对照组标本平均cam血管生成长度为8.69±0.71mm。待孵化48小时后,实验组标本平均cam血管生成长度为12.66±0.65mm,对照组标本平均cam血管生成长度为9.65±0.57mm,差值有统计学意义(p0.05);(2)加电孵化48小时后,实验组平均血管角度87.16°±54.76°变为23.36°±21.63°,血管向心性生长趋势明显。对照组平均血管角度81.07°±47.23°变为83.17°±51.64°,血管生成方向无明显改变。(3)加电孵化48小时后,实验组血管生成速率为0.101mm/h,对照组血管生成速率为0.047mm/h。结论:实验一:结果表明,鸡胚尿囊膜载羟基磷灰石模型可以作为研究理想植骨材料及影响血管生成药物的体外动物模型,且外载HA对CAM上血管生成无影响。实验二:结果表明,加载外源性稳恒DCEF能够促进鸡胚尿囊膜载羟基磷灰石模型血管向电场负极生长。
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【学位授予单位】：西南医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R318.08

【参考文献】