miR146通过靶向Notch 1促进骨髓间充质干细胞向髓核样细胞分化

发布时间：2017-10-15 19:36

  本文关键词：miR146通过靶向Notch 1促进骨髓间充质干细胞向髓核样细胞分化

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【摘要】：目的探讨miR146在骨髓间充质干细胞(BMSC)向髓核样细胞分化中的作用及其机制。方法从SD大鼠中分离培养BMSC,传至第3代用于本实验。以TGFβ1(转化生长因子-β1)诱导BMSC向髓核样细胞分化为模型。检测TGFβ1诱导BMSC后蛋白多糖(ACAN)、Ⅱ型胶原蛋白(COLⅡ)和SOX 9的蛋白及mRNA表达水平;RT-PCR检测miR146的表达水平。随后通过上调或下调miR146水平,检测ACAN、COLⅡ和SOX 9的蛋白及mRNA表达水平;双荧光素酶报告系统验证miR146的靶基因,并上调或下调miR146水平后检测靶基因的蛋白表达水平;过表达靶基因并检测其与miR146 mimic共转染对ACAN、COLⅡ和SOX 9表达的影响。最后,上调或下调靶基因后,检测miR146表达水平的变化。结果 TGFβ1诱导BMSC向髓核样细胞分化后ACAN、COLⅡ、SOX 9和miR146高表达。上调miR146后,ACAN、COLⅡ和SOX 9的表达升高;下调miR146后ACAN、COLⅡ和SOX 9的表达降低。双荧光素酶报告系统证实,Notch1是miR146的靶基因,miR146通过抑制Notch1的表达上调ACAN、COLⅡ和SOX 9的表达水平。上调Notch1后miR146表达下调,下调Notch1后miR146表达上调。结论 miR146通过靶向Notch1促进骨髓间充质干细胞向髓核样细胞分化,Notch1对miR146亦具有负向调控作用。
【作者单位】： 河南中医药大学第二附属医院;
【关键词】： 骨髓间充质干细胞 髓核样细胞 miR Notch
【基金】：河南省科技攻关计划项目(No.102102310277)~~
【分类号】：R681.5
【正文快照】： 椎间盘退变(intervertebral disc degeneration,IDD)是中老年人的常见病及多发病,其病因主要是因为纤维环和髓核的含水量、蛋白多糖和胶原等逐渐减少、弹性和韧性降低、张力下降、椎间隙变窄等[1]。常见的治疗方法是手术治疗和非手术治疗,然而都不能从根本上修复椎间盘退变的，

本文编号：1038239