光响应型纳米复合物抑制乳腺癌血管生成和肿瘤生长的作用机制研究

发布时间：2024-07-10 21:23

　　乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤,占女性肿瘤发病率的第1位。目前乳腺癌临床治疗中主要采用的手术、化疗、放疗等传统方法,虽然在一定程度上能解除患者的病痛,但任何一种治疗方法的单独施用都存在其局限性,例如手术并发症、药物耐药和毒副作用等。因此探索乳腺癌治疗的新方法,开发具有理论意义和临床应用价值的联合治疗手段,是维护女性生命健康亟待解决的重大课题。乳腺癌细胞的恶性增殖、侵袭及转移往往伴随着肿瘤组织内血管的异常生长。部分研究表明,抑制乳腺肿瘤内部血管生长,阻断肿瘤细胞赖以生存的代谢路径,可以有效抑制肿瘤组织的生长。目前应用于临床的抗肿瘤药物苹果酸舒尼替尼(Sunitinib Malete,SUN)就是一种新型小分子抗血管药。随着纳米技术研究的不断深入,靶向药物递送系统尤为广大学者所关注。应用纳米载体可以有效地提高药物在肿瘤组织的富集时间和生物利用度,并且能够降低药物的毒性。卟啉脂质体是一种新型的可实现光控释药的纳米载体,在卟啉脂质体的磷脂膜层中嵌入不同比例的卟啉类分子,当有特定波长光源对其进行照射时,具有光敏特性的卟啉分子被激发,产生有细胞毒性的活性氧簇(Reactive Oxygen Spec...

【文章页数】：70 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
英文缩略词表
第1章 绪论
    1.1 乳腺癌临床治疗现状
        1.1.1 乳腺癌现状概述
        1.1.2 乳腺癌的几种主要临床治疗手段
    1.2 肿瘤血管组织特征
    1.3 智能脂质体研究现状
        1.3.1 纳米载体研究现状
        1.3.2 脂质体发展现状
        1.3.3 环境敏感型脂质体
        1.3.4 光敏感型脂质体
    1.4 卟啉脂质体研究现状
    1.5 研究论文的立题依据、内容和目的意义
第2章 iRGD-Plipo-SUN的制备、表征及脂质体载药条件优化
    2.1 实验材料与试剂
        2.1.1 主要试剂
        2.1.2 实验仪器
    2.2 实验方法
        2.2.1 脂质体制备
        2.2.2 卟啉脂质体载药性能的初步优化
        2.2.3 iRGD-Plipo-SUN表征
        2.2.4 脂质体体外释药规律
    2.3 实验结果与讨论
        2.3.1 iRGD-Plipo-SUN的紫外光谱特性
        2.3.2 HPLC药物浓度标准曲线
        2.3.3 卟啉脂质体载药性能的初步优化
        2.3.4 卟啉脂质体载药与药物-光敏剂共载脂质体载药性能对比
        2.3.5 透射电镜(TEM)观察iRGD-Plipo-SUN
        2.3.6 iRGD-Plipo-SUN粒径分布、Zeta电位、分散系数(PDI)及载药
        2.3.7 脂质体体外稳定性
        2.3.8 非光照条件下脂质体体外释药规律
        2.3.9 体外光控释药规律
    2.10 小结
第3章 光照联合iRGD-Plipo-SUN的体外抗肿瘤效应研究
    3.1 实验材料与试剂
        3.1.1 主要试剂
        3.1.2 实验仪器
    3.2 实验方法
        3.2.1 乳腺癌4T1细胞对脂质体的摄取
        3.2.2 MTT法检测4T1细胞不同处理条件下的细胞毒性
        3.2.3 Calcein-AM/PI双染试剂盒检测脂质体介导的细胞凋亡
    3.3 实验结果与讨论
        3.3.1 乳腺癌细胞对脂质体的摄取
        3.3.2 MTT法检测不同处理模式下脂质体对乳腺癌细胞存活的影响
        3.3.3 Calcein-AM/PI双染试剂盒检测脂质体介导的细胞凋亡
    3.4 小结
第4章 iRGD-Plipo-SUN的抗血管效应研究
    4.1 实验仪器与试剂
        4.1.1 主要试剂
        4.1.2 实验仪器
    4.2 实验方法
        4.2.1 HUVEC小管新生实验
        4.2.2 鸡胚尿囊膜(CAM)探究脂质体抗血管效应
        4.2.3 免疫组织化学分析iRGD-Plipo-SUN对肿瘤组织VEGFR2表达的影响
    4.3 实验结果与讨论
        4.3.1 HUVEC小管新生实验
        4.3.2 光照联合iRGD-Plipo-SUN对CAM的血管损伤效应
        4.3.3 光照联合iRGD-Plipo-SUN分析磷酸化VEGFR2蛋白表达
    4.4 小结
第5章 IRGD-PLIPO-SUN体内抗肿瘤效应研究
    5.1 实验仪器与试剂
        5.1.1 主要试剂
        5.1.2 实验仪器
        5.1.3 实验动物及细胞株
    5.2 实验方法
        5.2.1 动物模型的建立
        5.2.2 小动物活体成像检测脂质体体内富集
        5.2.3 iRGD-Plipo-SUN对鼠乳腺癌4T1移植瘤的生长抑制效应研究
        5.2.4 iRGD-Plipo-SUN对肿瘤组织的影响
        5.2.5 安全性评价
    5.3 实验结果与讨论
        5.3.1 小动物活体成像仪研究药物在肿瘤以及各脏器中富集情况
        5.3.2 iRGD-Plipo-SUN小鼠乳腺癌4T1移植瘤的抗肿瘤效应研究
        5.3.3 iRGD-Plipo-SUN+L对肿瘤组织的影响
        5.3.4 安全性评价
    5.4 小结
第6章 总结与展望
参考文献
致谢
攻读硕士学位期间研究成果



本文编号：4004752