丙泊酚对脂多糖诱导的小鼠肾小球系膜细胞的影响

发布时间：2017-10-26 18:34

  本文关键词：丙泊酚对脂多糖诱导的小鼠肾小球系膜细胞的影响

  更多相关文章： 丙泊酚 肾小球系膜细胞 脂多糖 一氧化氮 细胞增殖 细胞凋亡

【摘要】：目的本文旨在通过用脂多糖刺激小鼠肾小球系膜细胞来研究丙泊酚对脂多糖刺激的肾小球系膜细胞的增殖、凋亡及分泌NO的影响。方法实验采用的是小鼠肾小球系膜细胞(SV40MES13),当细胞培养至3-5代时,常规消化收集细胞,调整细胞浓度,均匀种植在两块48孔板和一块96孔板上。将细胞分为8组,即空白对照组、丙泊酚组(5,10,20μg/ml)、脂多糖组(10μg/ml)和脂多糖(10μg/ml)+丙泊酚(5,10,20μg/ml)组,每组各设6个复孔。按照以上分组向各个孔内添加不同药物刺激,脂多糖(10μg/ml)+丙泊酚(5,10,20μg/ml)组需在添加脂多糖1小时后再加入不同剂量的丙泊酚。最后将细胞放入CO2培养箱继续培养48小时。在倒置显微镜下观察细胞生长情况并照相,并通过MTT法检测细胞的增殖程度;收集各孔细胞培养基用于ELISA法检测细胞分泌NO的情况,并消化收集各孔细胞,采用流式细胞仪进行检测分析细胞的凋亡情况。结果1倒置显微镜下观察,脂多糖组细胞数量明显多于空白对照组与单纯丙泊酚组,且细胞均由不规则形变成圆形;脂多糖+丙泊酚(10,20μg/ml)组细胞数量较脂多糖组明显减少,并有部分细胞出现空泡或悬浮,而脂多糖+丙泊酚5μg/ml组细胞较脂多糖组变化不明显。2与空白对照组相比,单纯丙泊酚(5,10,20μg/ml)组细胞的增殖程度、凋亡率和NO分泌情况均没有明显变化(P0.05),脂多糖组细胞的增殖程度及NO的分泌均显著升高,而凋亡率降低(P0.05);在脂多糖处理后再加入中、高浓度丙泊酚(10,20μg/ml)均可导致细胞的增殖程度减弱,NO的分泌减少,细胞凋亡率有所增加,差异有统计学意义(P0.05),并且差异在脂多糖+丙泊酚20μg/ml组中更明显,而在脂多糖处理后再加入低浓度(5μg/ml)的丙泊酚则没有明显变化(P0.05)。结论1低、中、高浓度的丙泊酚(5,10,20μg/ml)对正常小鼠肾小球系膜细胞的增殖、凋亡及NO的分泌均没有明显影响。2中、高浓度的丙泊酚(10,20μg/ml)能够抑制脂多糖刺激的小鼠肾小球系膜细胞发生大量增殖及NO过度分泌,并能促进过量增殖的细胞发生凋亡,对肾脏起到保护作用,并且高浓度的丙泊酚(20μg/ml)作用更明显,而低浓度的丙泊酚(5μg/ml)并没有这一作用。
【关键词】：丙泊酚 肾小球系膜细胞 脂多糖 一氧化氮 细胞增殖 细胞凋亡
【学位授予单位】：华北理工大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R614
【目录】：

• 摘要4-6
• abstract6-10
• 英文缩略表10-11
• 引言11-13
• 第1章 实验研究13-29
• 1.1 实验材料13-14
• 1.1.1 实验细胞13
• 1.1.2 实验药品和试剂13-14
• 1.1.3 主要仪器设备14
• 1.2 实验方法14-17
• 1.2.1 培养小鼠肾小球系膜细胞14-15
• 1.2.2 实验分组15
• 1.2.3 倒置显微镜下观察肾小球系膜细胞的生长情况15
• 1.2.4 MTT法检测肾小球系膜细胞的增殖情况15-16
• 1.2.5 流式细胞术检测肾小球系膜细胞的凋亡情况16
• 1.2.6 ELISA法检测肾小球系膜细胞的培养基中NO含量16-17
• 1.2.7 统计学方法17
• 1.3 实验结果17-22
• 1.3.1 倒置相差显微镜下肾小球系膜细胞的生长情况17-18
• 1.3.2 各处理组肾小球系膜细胞的增殖情况比较18
• 1.3.3 各处理组肾小球系膜细胞的凋亡率的比较18-21
• 1.3.4 各处理组肾小球系膜细胞的NO分泌情况比较21-22
• 1.4 讨论22-26
• 1.5 小结26
• 参考文献26-29
• 第2章 综述 脓毒症及丙泊酚生物学作用的研究进展29-44
• 2.1 脓毒症29-32
• 2.1.1 脓毒症的发病机制29-31
• 2.1.2 重要器官功能损伤31-32
• 2.1.3 脓毒症的防治药物32
• 2.2 丙泊酚32-39
• 2.2.1 丙泊酚的麻醉作用32-33
• 2.2.2 丙泊酚的免疫调节作用33-34
• 2.2.3 丙泊酚的抗氧化作用34-35
• 2.2.4 丙泊酚的器官保护作用35-37
• 2.2.5 丙泊酚输注综合征（propofol infusion syndrome, PRIS）37-39
• 参考文献39-44
• 结论44-45
• 致谢45-46
• 导师简介46-47
• 作者简介47-48
• 学位论文数据集48

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 章道恒,肖克峰,江洪涛,房杰群;人系膜细胞中组织金属蛋白酶抑制剂1基因的稳定表达[J];中国现代医学杂志;2004年06期

2 王远程,叶志斌,周钦,张宗梁,吴兆龙;丙丁酚抑制氧化型低密度脂蛋白诱导系膜细胞转化生长因子-β_1表达[J];复旦学报(医学版);2005年02期

3 朱晓雷;;中药及有效成分对系膜细胞作用的研究进展[J];江西中医药;2006年10期

4 段惠军;李英;张涛;刘茂东;史永红;;高糖对系膜细胞胞外调节蛋白激酶表达及细胞外基质合成的影响[J];中国中西医结合肾病杂志;2008年01期

5 夏志银,宫崎正信,阿部,河野茂,吉雄扬子,西野友战,范亚平,蒋季杰;系膜细胞α-平滑肌肌动蛋白表达与细胞表型的关系[J];南通医学院学报;2002年02期

6 陈玲;贾汝汉;邱昌建;丁国华;;脱氢抗坏血酸对高糖诱导系膜细胞产生氧自由基的影响[J];中华肾脏病杂志;2006年09期

7 许钟镐;孙晶;贾冶;苗里宁;;12-脂氧化酶对系膜细胞血管紧张素Ⅱ1型受体表达的影响[J];中华肾脏病杂志;2006年10期

8 胡伟新;黎磊石;庄一义;;大黄及低密度脂蛋白对系膜细胞生长的影响[J];金陵医院学报;1993年01期

9 朱晓玲,王永钧,程晓霞,童孟立,陈洪宇,张满生;尿毒净Ⅱ号对人肾系膜细胞Cyclin D_1及CDK_4表达的影响[J];中国中西医结合肾病杂志;2004年06期

10 姚兰;陈海平;张丽;唐淑珍;;肝细胞生长因子对高糖条件下系膜细胞基质降解酶系统及转化生长因子β1的影响[J];首都医科大学学报;2008年03期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 刘海英;关广聚;柳刚;文蓉珠;张艳;陈兵;李学刚;;高糖对系膜细胞过氧化物酶体增殖物激活受体家族表达的影响[A];中华医学会肾脏病学分会2006年学术年会论文集[C];2006年

2 袁军;贾汝汉;包艳;;螺内酯对系膜细胞合成纤溶酶原激活剂抑制物-1的影响[A];中华医学会肾脏病学分会2006年学术年会论文集[C];2006年

3 张怡;黄国良;;高糖诱导系膜细胞表达TNF-a的机制探讨[A];中华医学会第十次全国内分泌学学术会议论文汇编[C];2011年

4 张怡;黄国良;;高糖对系膜细胞表达IL-6的影响及其机制探讨[A];中华医学会第十次全国内分泌学学术会议论文汇编[C];2011年

5 吴兆龙;王远程;叶志斌;;丙丁酚抑制氧化型低密度脂蛋白诱导系膜细胞转化生长因子β_1表达[A];“中华医学会肾脏病学分会2004年年会”暨“第二届全国中青年肾脏病学术会议”论文汇编[C];2004年

6 姜宗培;徐知延;张海燕;余学清;;H_2O_2介导高糖诱导的系膜细胞纤维蛋白溶酶系统变化[A];“中华医学会肾脏病学分会2004年年会”暨“第二届全国中青年肾脏病学术会议”论文汇编[C];2004年

7 吴慧娟;王小刚;刘晔;赵仲华;冯秀艳;王慧君;张志刚;;系膜细胞的饰胶蛋白聚糖泛素化调节的研究[A];中华医学会病理学分会2006年学术年会论文汇编[C];2006年

8 张庆红;丁国华;张建鄂;白寿军;罗昌霞;肖厚勤;;COX-2抑制剂对高糖诱导系膜细胞CT-GF表达的影响[A];中华医学会肾脏病学分会2006年学术年会论文集[C];2006年

9 毛山山;张农;;IL-1b诱导人系膜细胞表达NGALR[A];中华医学会病理学分会2010年学术年会日程及论文汇编[C];2010年

10 刘铜华;吕仁和;黄启福;高彦彬;;止消通脉宁对高糖培养的系膜细胞合成胶原的影响[A];糖尿病（消渴病）中医诊治荟萃——全国第五次中医糖尿病学术大会论文集[C];1999年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 江颖娟;Exendin-4对高糖条件下大鼠系膜细胞的保护作用及其机制初探[D];南方医科大学;2013年

2 李静;脂蛋白脂酶在人系膜细胞摄取极低密度脂蛋白中作用的探讨[D];中国协和医科大学;2008年

3 吴元俊;白细胞介素-10在人类肾小球疾病肾组织中的表达及其对系膜细胞的作用和机制探讨[D];南京医科大学;2002年

4 周素娴;高糖高脂环境下PAF在内皮细胞与系膜细胞相互关系中作用的研究[D];中南大学;2009年

5 兰洋;NF-κB调控氧化LDL激活系膜细胞TGF-β1转录的研究[D];复旦大学;2004年

6 张爱华;白细胞介素-13拮抗肾小球系膜细胞炎症效应及其信号转导机制的研究[D];南京医科大学;2001年

7 刘洁;Megsin及p38MAPK信号通路在糖尿病肾病发病机制中的作用[D];河北医科大学;2010年

8 孙敏;高血糖—糖化氧化—系膜细胞肥大和基质积聚与糖尿病肾病及其高血糖记忆的细胞病理学关系的研究[D];南京中医药大学;2004年

9 李学刚;高糖对人系膜细胞CTGF及其受体LRP表达的影响[D];山东大学;2011年

10 毛华雄;siRNA沉默TGF-β1对大鼠肾系膜细胞纤维连接蛋白和Ⅳ型胶原的影响[D];中南大学;2006年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 赵芳;丙泊酚对脂多糖诱导的小鼠肾小球系膜细胞的影响[D];华北理工大学;2016年

2 周书琴;重组人红细胞生成素影响系膜细胞生长与纤维连接蛋白表达的实验研究[D];南京医科大学;2008年

3 刘友霞;大黄素对高糖环境下系膜细胞收缩功能的影响[D];山东大学;2011年

4 陈建平;活性维生素D_3及其受体对人系膜细胞中mTOR蛋白表达的影响[D];石河子大学;2014年

5 封晓娟;HMGB1对小鼠系膜细胞细胞周期及细胞周期相关蛋白表达的影响[D];河北医科大学;2011年

6 张月娟;醛糖还原酶（AR）对TGF-β1诱导人系膜细胞（HMC）表达Fibronectin和CollagenIV的影响及机制研究[D];复旦大学;2009年

7 杜娟;JNK信号通路在转化生长因子-β诱导系膜细胞外纤维连接蛋白合成中的作用[D];中国医科大学;2006年

8 贾丽艳;megsin对糖尿病小鼠肾组织P27表达的影响[D];河北医科大学;2009年

9 瞿麟平;ATP在高糖引起肾脏系膜细胞TGF-β1增加中的作用[D];复旦大学;2008年

10 郑晓枫;愈肾水煎剂对系膜细胞FN、Ⅳ型胶原表达的影响[D];辽宁中医药大学;2012年

，

本文编号：1099950