FGF-2单独以及与TGF-beta联合对人间充质干细胞向髓核样细胞分化的影响

发布时间：2017-10-27 06:05

  本文关键词：FGF-2单独以及与TGF-beta联合对人间充质干细胞向髓核样细胞分化的影响

  更多相关文章： 间充质干细胞 转化生长因子-beta 成纤维细胞生长因子-2 分化 髓核样表型

【摘要】：目的：据报道人间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs)在特定条件下有向髓核样细胞定向分化的能力。转化生长因子(transforming growth factor, TGF)-beta是目前使用最广泛的促进MSCs向髓核样表型分化的生长因子,其他如成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor, FGF)-2使用也较为广泛。然而到目前为止,FGF-2单独以及与TGF-beta联合对MSCs的影响尚不明确,因此,本课题旨在探究与明确这些影响。方法：以包含FGF-2或TGF-beta/FGF-2的培养基对MSCs进行培养,并与基础培养组或只含有TGF-beta的培养组进行比较。在第7天,14天和21天对细胞样本进行收集,并进行CCK-8,二甲基亚甲基蓝(dimethyl methylene blue, DMMB),聚合酶链式反应(polymerase chain reaction, PCR)和免疫印迹等检测以分析各组间的区别。结果：添加FGF-2的实验组数据显示细胞增值率上升。功能基因标志物以及髓核细胞标志物在含有FGF-2的实验组表达下调,功能蛋白的表达与基因一致。我们还发现GAG的合成在添加FGF-2的组中明显下降。磷酸化细胞外信号调节激酶(pho-extracellular signal-regulated kinase, pho-ERK) 1/2和磷酸化Smad3 (pho-smad3)表达在目标实验组差异明显。结论：所有实验结果显示FGF-2单独或与TGF-beta协同均可促进MSCs的增殖。然而FGF-2在软骨内稳态中呈负性调节作用,我们也认为FGF-2不仅在MSCs定向分化为髓核样细胞过程中无促进作用,且抑制了TGF-beta的正向调节作用。
【关键词】：间充质干细胞 转化生长因子-beta 成纤维细胞生长因子-2 分化 髓核样表型
【学位授予单位】：浙江大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R681.5
【目录】：

• 致谢4-5
• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-10
• 1 引言10-12
• 2 材料与方法12-18
• 2.1 主要实验试剂12-13
• 2.2 主要实验仪器13-14
• 2.3 试验方法14-17
• 2.4 统计学分析17-18
• 3 结果18-26
• 3.1 细胞增殖18
• 3.2 GAG含量测定18-19
• 3.3 基因表达分析19-22
• 3.4 免疫印迹结果分析22-26
• 4 讨论26-29
• 5 结论29-30
• 参考文献30-36
• 综述36-53
• 参考文献44-53
• 作者简历及在学期间所取得的科研成果53-55

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本文编号：1102205