Smad7在肌腱粘连组织中的表达及对肌腱成纤维细胞纤维化的作用

发布时间：2017-11-08 10:06

  本文关键词：Smad7在肌腱粘连组织中的表达及对肌腱成纤维细胞纤维化的作用

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【摘要】：[目的]通过观察人肌腱粘连组织中Smad7的表达情况,并在TGF-β1诱导的肌腱成纤维细胞(TDFs))中沉默或过表达Smad7,观察细胞纤维化相关指标的变化,讨论Smad7在肌腱粘连中的作用及调控机制。[方法]收集肌腱粘连组织及正常肌腱腱周组织,Western blotting检测Smad7蛋白含量。设计并合成针对Smad7基因编码区的siRNA,同时构建Smad7基因表达载体,经脂质体转染至TDFs细胞,Real Time-PCR检测胞内Smad7基因含量,Western-blot检测细胞中Smad7蛋白表达;使用TGF-β1诱导转染后TDFs细胞,CCK-8检测细胞增殖活性变化,Western blotting检测纤维化相关的蛋白指标。[结果]与正常腱周组织比较,肌腱粘连组织中Smad7蛋白减少。siRNA及Smad7基因过表达载体转染TDFs,可以明显抑制或者上调细胞内Smad7基因含量及蛋白表达,与未转染组比较,差异均有统计学意义(P0.05);TGF-β1诱导的TDFs细胞,可以明显增强细胞增殖活性(P0.01,vs未诱导组),siRNA转染后,TGF-β1诱导TDFs增殖活性和纤维化蛋白指标上升的趋势进一步增强,Smad7基因表达载体转染则使得TGF-β1诱导TDFs增殖活性和纤维化蛋白指标增强的趋势得到明显抑制,基因干预且诱导组与只诱导组细胞活性和蛋白含量相比较,差异均有统计学意义(P0.05)。[结论]肌腱粘连组织中Smad7蛋白减少,提示肌腱粘连发生过程中Smad7表达受抑制;Smad7基因过表达可以抑制TGF-β1诱导TDFs细胞纤维化。
【作者单位】： 上海交通大学附属第六人民医院骨科;济南市第三人民医院骨科;
【基金】：上海市自然科学基金项目(编号:13ZR1431000)
【分类号】：R686.1
【正文快照】： 肌腱粘连严重影响手部功能,是手外科领域亟待解决的一个难题,临床疗效的提高有赖于对其发生机制的不断深入研究。现有研究表明,在众多可能参与粘连形成的细胞因子中,转化生长因子-β(transfor-ming growth factor-β,TGF-β)被公认为与组织器官纤维化关系最为密切[1],而TGF-β

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本文编号：1156679