动态力学刺激对构建取向性丝素蛋白组织工程纤维环的影响

发布时间：2017-11-08 20:01

  本文关键词：动态力学刺激对构建取向性丝素蛋白组织工程纤维环的影响

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【摘要】：目的:1.以丝素蛋白溶液为原料,采用湿仿法技术,制备环形取向性丝素蛋白(SF)组织工程纤维环支架,并评估其理化性能。2.分离培养兔纤维环细胞,接种到该丝素蛋白纤维环支架,体外构建组织工程纤维环并评估其理化性能。3.利用自行研制的生物反应器研究力学刺激对体外构建组织工程纤维环的影响。方法:1.以丝素蛋白溶液为原料,采用湿仿法制备环形取向性SF组织工程纤维环支架。采用体视显微镜、扫描电镜(SEM)观察支架观察支架表面形态、纤维直径。测定支架的孔径、孔隙率、吸水率。微材料力学性能测试机测定支架压缩弹性模量。2.分离培养兔纤维环(AF)细胞并接种至SF支架上,体外培养一段时间。通过体视显微镜观察细胞-支架复合物的大体形态,SEM、Live/dead染色观察细胞在支架上的黏附、活性和增殖情况。组织工程纤维环分别于体外培养3、7、14天行组织学染色观察,并行总DNA定量分析及蛋白多糖、胶原生化定量分析,同时检测其力学性能的变化。3.利用自行研制的循环灌流力学加载仪对培养的组织工程纤维环进行压缩力学刺激。频率1Hz,压缩幅度分别为组织工程纤维环高度的5%、10%、15%、20%。刺激时间分别为3、7、14天,2小时/天。固定后行组织学切片染色观察,并对总DNA、蛋白多糖和Ⅰ、Ⅱ行胶原进行定量分析,检测不同组之间压缩弹性模量及组织工程椎间盘高度的变化。结果:1.体式显微镜和扫描电镜示支架呈乳白色,中空环形,内径43，

本文编号：1158592