滑膜间充质干细胞向透明软骨分化条件的体外研究

发布时间：2017-11-19 02:25

  本文关键词：滑膜间充质干细胞向透明软骨分化条件的体外研究

  更多相关文章： 间充质干细胞 透明软骨 正交实验 体外研究 细胞因子 分化

【摘要】：目的：研究TGF β1、BMP-2、bFGF、IGF、BMP-7、ASA、Dex七种因素在滑膜间充质干细胞向透明软骨分化中起的作用。方法：严格按照无菌性操作从兔膝关节内提取滑膜组织,刮除脂肪、肌肉组织后依靠酶消化法、有限稀释法获得滑膜间充质干细胞。等到干细胞传至第三代的时候,诱导其向脂肪细胞、软骨细胞和骨细胞分化。网上搜索有关的文献,了解在滑膜间充质干细胞向透明软骨分化中占据重要作用的因素。正交实验中纳入TGF β1、BMP-2、bFGF, IGF、BMP-7、AsA、Dex七种因素。通过SPSS22.0统计软件设计L8(27)正交实验及表头,定义2水平条件。采用流式细胞仪检测CD151+/CD44+细胞数,免疫组织化学染色检测高表达Col Ⅱ的II型胶原细胞与软骨细胞总数的比值,该比值视为透明软骨转化率(N),设定rate为检验指标,rate为CD151+/CD44+细胞数乘以N所得结果。对实验结果进行验证采用甲苯胺蓝染色法和免疫组化染色法,实验结果分析采用直观观察法和主体间方差分析法。结果：提纯后的滑膜间充质干细胞是一种形态较为一致的细胞,有的呈星型,有的呈梭型,与成纤维细胞的形态较为相似。在诱导其向脂肪细胞、骨细胞、软骨细胞分化后分别进行油红染色、碱性磷酸酶染色、甲苯胺蓝染色,染色结果均呈现为阳性。正交实验中直观观察可见TGF-β1、作用最强,其次为BMP-7,主体间方差分析显示TGFβ1、bFGF、IGF、BMP-7、AsA可以显著影响SMSCs向透明软骨分化,两种结果一致。结论：滑膜间充质干细胞能够成功诱导向各种组织细胞分化,可以作为种子细胞应用于透明软骨的修复。TGF β1、bFGF、IGF、BMP-7、AsA七种因素在滑膜间充质干细胞向透明软骨分化中发挥显著的作用,TGF β1是七种因素中作用最明显的一种。继续对更多诱导滑膜间充质干细胞向透明软骨因素及水平的探索,有助于寻找更为合理、精确的组合用于组织工程修复软骨损伤。
【学位授予单位】：南京大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R684

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前5条

1 王震;梁大川;白洁玉;康宁;冯军宇;杨自权;;慢病毒介导的Sox9基因在兔骨髓间充质干细胞的过表达促进软骨损伤修复[J];中国骨伤;2015年05期

2 张复文;刘德宝;王刚;任振华;;微骨折技术联合IGF-1修复兔关节软骨缺损的实验研究[J];中国修复重建外科杂志;2014年05期

3 陈松;符培亮;丛锐军;吴海山;许震宇;;TGF-β_3、BMP-2及地塞米松诱导兔滑膜MSCs成软骨分化的研究[J];中国修复重建外科杂志;2014年01期

4 符培亮;张雷;吴海山;丛锐军;陈松;丁U喨，

本文编号：1202019