不同预处理对机械通气大鼠肺PAI-1表达的影响

发布时间：2017-12-06 03:25

  本文关键词：不同预处理对机械通气大鼠肺PAI-1表达的影响

  更多相关文章： 机械通气 大潮气量 大鼠 肺泡灌洗液 PAI-1 小潮气量机械通气 七氟醚 预处理 大鼠 PAI-1

【摘要】：第一部分不同机械通气条件下大鼠肺PAI-1表达的变化目的:观察不同机械通气条件下大鼠肺PAI-1表达的变化情况。方法:清洁级成年雄性SD大鼠72只,重量250?300克,按照随机数字表分为C、S、R、L四组(n=18):对照组(C组,自主呼吸组),小潮气量组(S组,VT=6ml/kg),常规潮气量组(R组,VT=10ml/kg),大潮气量组(L组,VT=40ml/kg),各组按机械通气时间(2h、4h、6h)再随机分为3个亚组(n=6)。C、S、R、L组作气管切开插管处理后,C组保留自主呼吸,S、R、L组接小动物呼吸机给予机械通气,呼吸机参数均设置为RR 70次/分,Fi O2 21%、PEEP 0 cm H2O。实验结束后处死大鼠,快速剖开胸腔取右肺组织称重后测定湿重/干重比值(W/D),测定肺组织细胞凋亡率(TUNEL法),肺组织经HE染色后光镜下进行肺损伤评分。比较不同潮气量、不同机械通气时间下大鼠肺PAI-1表达情况。同时收集大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF),测定PAI-1和IL-8的表达情况。应用Real-time PCR技术检测大鼠肺组织中PAI-1m RNA的表达。结果:与C组比较,L组机械通气2h光镜下可见肺组织内弥散存在出血点,机械通气4h肺组织内可见大量散在出血点,肺泡间隔增宽,肺泡腔渗液较多,机械通气6h肺组织结构破坏严重,光镜下可见极少量完整肺泡组织,肺组织功能基本丧失。肺组织损伤评分、肺湿重/干重比值(W/D)及肺组织细胞凋亡率随着通气时间的延长均显著性升高,差异有统计学意义(P0.05),C组与S组比较肺组织形态结构无区别,S组机械通气6h未出现明显的肺损伤表现。与C组比较R组机械通气2h、4h时间点肺组织形态结构无明显的肺损伤表现,通气6h光镜下可见肺泡腔内轻度渗液,但肺组织结构正常。与C组比较L组肺PAI-1、IL-8和PAI-1m RNA随着通气时间的延长表达逐渐上调(P0.05),与S、R组中2h、4h、6h三个时间点比较,L组机械通气2h时间点测出PAI-1、IL-8和PAI-1 m RNA表达,4h时间点表达上调明显,6h时间点表达达到顶点,差异具有统计学意义(P0.05)。C组与S组比较各指标之间无差异。与C组比较R组2h、4h时间点未见PAI-1、IL-8和PAI-1 m RNA表达,6h时间点时PAI-1可见少量表达。C组与S组内2h、4h、6h三个时间点比较PAI-1、IL-8和PAI-1 m RNA表达没有上调,差异无统计学意义(P0.05)。R组内通气6h PAI-1、IL-8和PAI-1 m RNA少量表达。L组内2h、4h、6h三个时间点肺PAI-1、IL-8、PAI-1 m RNA随通气时间的延长表达明显上调,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:大潮气量机械通气可诱发大鼠肺组织及肺泡灌洗液中PAI-1表达上调,机械通气2h即可测出肺PAI-1表达,机械通气4h时PAI-1显著上调,6h时PAI-1表达达到高峰。第二部分不同预处理对机械通气大鼠肺PAI-1表达的影响目的:探讨小潮气量机械预处理和七氟醚预处理对机械通气大鼠肺PAI-1、LI-8和PAI-1m RNA表达的影响及与肺损伤之间的关系。方法:清洁级成年雄性SD大鼠18只,重量250?300克,按照随机数字表分三组(n=6):L组(大潮气量通气组,VT=40ml/kg)、P1组(七氟醚预处理组,2%七氟醚)、P2组(机械通气预处理组,VT=6ml/kg)。P1组大潮气量通气前30分钟吸入2%七氟醚预处理,P2组给予VT=6ml/kg机械通气预处理30分钟,P1组和P2组预处理结束后给予VT=40ml/kg机械通气。L、P1、P2组均行气管切开插管后接小动物呼吸机给予机械通气4h,呼吸机参数均设置为RR 70次/分,Fi O2 21%、PEEP 0 cm H2O。机械通气结束即刻静脉注射戊巴比妥(100mg/kg)处死大鼠,留取右肺组织测定湿重/干重比值(W/D),测定肺组织细胞凋亡率,肺组织经HE染色后光镜下进行肺损伤评分。采集大鼠支气管肺泡灌洗液,测定PAI-1和IL-8的表达情况。应用Real-time PCR技术检测大鼠肺组织中PAI-1m RNA的表达。结果:L组光镜下肺形态学改变可见肺泡膜明显增厚,肺内散在大量出血点,肺泡发生融合,P1组肺组织结构基本完整,肺泡内渗出液明显。P2组肺泡壁增厚,但未见透明膜形成,肺组织结构完整。与L组比较P1组、P2组机械通气4h肺损伤评分、肺湿重/干重比值(W/D)及肺组织细胞凋亡指数均降低,差异有统计学意义(P0.05)。P1组与P2组比较肺损伤评分、肺湿重/干重比值(W/D)及肺组织细胞凋亡指数差异无统计学意义(P0.05)。与L组比较P1组、P2组肺泡灌洗液(BALF)中PAI-1、IL-8及肺组织中PAI-1m RNA的表达明显下调,差异具有统计学意义(P0.05)。P2组与P1组比较肺泡灌洗液(BALF)中PAI-1、IL-8及肺组织中PAI-1m RNA的表达差异无统计学意义(P0.05)。结论:大潮气量、长时间机械通气诱发大鼠肺PAI-1高表达,小潮气量机械通气和七氟醚预处理使机械通气大鼠肺PAI-1、LI-8、PAI-1m RNA的表达下调。提示PAI-1可能与机械通气诱发肺损伤相关,小潮气量及七氟醚可能对肺损伤有保护作用,其机制有待进一步研究。
【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R614

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本文编号：1257209