紫檀芪通过促进Nrf2核转移在调节髓核细胞炎症反应中的作用

发布时间：2017-12-27 14:08

  本文关键词：紫檀芪通过促进Nrf2核转移在调节髓核细胞炎症反应中的作用　出处：《中国细胞生物学学报》2016年10期 　论文类型：期刊论文

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【摘要】：紫檀芪(pterostilbene,PTE)是一种有效的抗炎抗氧化应激的天然药物,但是其对椎间盘髓核细胞(nucleus pulposus cells,NPCs)的作用以及机制未知。该文培养SD大鼠原代NPCs,采用CCK-8分析PTE的细胞毒性,ELISA、Real-time PCR和Griess方法分析PTE对IL-1β诱导的髓核细胞炎症反应的影响,Western blot、免疫荧光、NF-E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)si RNA转染等方法分析Nrf2在PTE抗炎中的作用。结果显示,20μmol/L PTE作用24 h对NPCs活力没有影响,PTE可以明显抑制IL-1β诱导产生的炎症介质一氧化氮(nitric oxide,NO)和前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)的含量,并抑制环氧酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)和诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,i NOS)m RNA的水平(P0.05)。Western blot结果显示,PTE促进细胞核中Nrf2的升高,却导致胞质中Nrf2的降低(P0.05)。免疫荧光亦显示,Nrf2从细胞质转移到细胞核。转染Nrf2 si RNA后,Western blot证实细胞核中Nrf2的下调。Nrf2下调后的NPCs中,PTE作用下分泌的NO和PGE2的含量以及COX-2和i NOS m RNA的水平相对正常细胞明显升高(P0.05)。该研究结果提示,PTE可能通过促进NPCs中的Nrf2发生核转移导致下游一系列抗氧化应激基因的转录,进而抑制IL-1β诱导的炎症反应。
[Abstract]:Pterostilbene (PTE) is an effective natural antioxidant for anti-inflammatory and anti oxidative stress, but its effect on the nucleus pulposus cells (NPCs) is unknown. The culture of SD rat NPCs, the cytotoxicity of CCK-8 analysis of PTE, ELISA, Real-time, PCR and Griess influence analysis of nucleus pulposus cells PTE on inflammatory reaction induced by beta IL-1, Western blot, immunofluorescence and NF-E2 related factor 2 (nuclear factor erythroid 2-related factor 2, Nrf2) Nrf2 in PTE inflammation analysis on the effect of Si RNA transfection method. The results showed that 20 mol/L PTE 24 h had no effect on the activity of NPCs, inflammatory mediators nitric oxide PTE can significantly inhibit IL-1 induced by beta (nitric oxide NO) and E2 (prostaglandin E2, prostaglandin PGE2) content, and inhibit cyclooxygenase -2 (cyclooxygenase-2, COX-2) and inducible nitric oxide synthase (inducible nitric oxide synthase, I NOS) m RNA level (P0.05). The results of Western blot showed that PTE promoted the increase of Nrf2 in the nucleus, but resulted in the decrease of Nrf2 in the cytoplasm (P0.05). Immunofluorescence also showed that Nrf2 was transferred from cytoplasm to nucleus. After transfection of Nrf2 Si RNA, Western blot confirmed the downregulation of Nrf2 in the nucleus. The levels of NO and PGE2 secreted by PTE and the level of COX-2 and I NOS m RNA increased significantly (P0.05) in NPCs after the downregulation of Nrf2. The results suggest that PTE may promote the transcription of downstream antioxidative stress genes by promoting the nuclear transfer of Nrf2 in NPCs, thereby inhibiting IL-1 beta induced inflammatory response.
【作者单位】： 宁波大学医学院宁波市第二医院骨二科;
【基金】：宁波市科技惠民项目(批准号:2016C51003)资助的课题~~
【分类号】：R681.53
【正文快照】： 宁波市科技惠民项目(批准号:2016C51003)资助的课题网络出版时间:2016-10-27 16:42:36 URL:http://www.cnki.net/kcms/detail/31.2035.Q.20161027.1642.004.html椎间盘退变(intervertebral disc degeneration,IDD)是腰椎间盘(intervertebral disc,IVD)突出症、椎管狭窄、腰椎

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本文编号：1342009