七氟醚预处理抑制TNF-α诱导的血管内皮细胞ICAM-1表达与JNK及p38MAPK的相关

发布时间：2021-03-07 20:42

目的:探讨七氟醚预处理(Sevoflurane preconditioning,SPC)抑制TNF-α诱导的血管内皮细胞ICAM-1表达与MAPK家族之间的关系。方法:实验分为三部分:(1)采用随机数字表法,将体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)分成4组,每组设6个平行孔:对照组(C组)、SPC组(S组)、TNF-α处理组(T组)、SPC+TNF-α处理组(S+T组),应用Western blot方法观察七氟醚预处理对TNF-α诱导血管内皮细胞ICAM-1表达的影响以及MAPK家族磷酸化水平的变化;(2)结合第一部分实验结果,采用随机数字表法,将HUVEC随机分为3组,每组设4个平行孔:TNF-α处理组(T组)、七氟醚预处理+TNF-α处理组(S+T组)、JNK抑制剂SP600125+TNF-α处理组(SP+T组),应用Western blot技术测定各组细胞JNK磷酸化水平及ICAM-1的表达水平,观察SPC对TNF-α诱导ICAM-1表达的影响与JNK激活的关系;(3)类似于第二部分实验,采用随机数字表法,将体外培养的HUVEC随机分为3组,每组设4个平行孔:TNF-α处理组(T组)、SPC+TNF-α处理组(S+T组)、p38 MAPK抑制剂SB203580+TNF-α处理组(SB+T组),应用Western blot技术测定各组细胞p38磷酸化水平及ICAM-1的表达量,观察七氟醚预处理对TNF-α诱导ICAM-1表达的影响与p38MAPK激活的关系。结果:1.七氟醚预处理抑制TNF-α诱导的脐静脉内皮细胞ICAM-1表达与C组相比,S组脐静脉内皮细胞ICAM-1的表达无明显变化(P0.05),T组ICAM-1表达则明显增高(P0.01);与T组相比,S+T组ICAM-1表达明显下降(P0.05)。2.七氟醚预处理抑制TNF-α诱导的脐静脉内皮细胞JNK、p38磷酸化程度的增高与C组相比,S组脐静脉内皮细胞JNK、p38、ERK1/2磷酸化水平无明显差异(P0.05),T组JNK、p38、ERK1/2磷酸化水平明显增高(P0.01);与T组比较,S+T组p-JNK、p-p38表达明显降低(P0.05),ERK1/2磷酸化水平无明显变化(P0.05)。3.七氟醚预处理抑制TNF-α诱导的HUVEC中ICAM-1表达与JNK的关系与T组相比,S+T组p-JNK、ICAM-1表达明显减少(P0.05),SP+T组p-JNK、ICAM-1表达也明显降低(P0.05)。4.七氟醚预处理抑制TNF-α诱导的HUVEC中ICAM-1表达与p38的关系与T组相比,S+T组p-p38、ICAM-1表达明显减少(P0.05),SB+T组p-p38、ICAM-1表达也明显降低(P0.05)。结论:1.七氟醚预处理后,抑制TNF-α导致的血管内皮细胞ICAM-1表达的增高,提示SPC能够降低内皮细胞粘附因子的生成,表明七氟醚在减轻血管炎症方面有着一定的作用。2.七氟醚预处理可以抑制TNF-α诱导的血管内皮细胞JNK、p38MAPK磷酸化水平的增高,但是对ERK1/2的磷酸化程度没有显著影响,提示七氟醚预处理在血管内皮水平的抗炎作用可能与减少JNK及p38MAPK的磷酸化激活有关。3.加入JNK及p38MAPK的特异性抑制剂后证明,TNF-α诱导血管内皮细胞ICAM-1表达可能与JNK及p38MAPK的磷酸化激活有关,而SPC通过减少JNK、p38MAPK的磷酸化激活,最终使ICAM-1的表达降低,从而减轻了血管内皮细胞的炎症反应。
【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R614

文章目录

摘要

Abstract

常用缩写词中英文对照表

前言

1 材料与方法

1.1 实验材料、试剂及实验仪器

1.2 实验方法

1.3 统计学方法

2 结果

2.1 原代HUVEC形态观察（见图 1）

2.2 七氟醚预处理抑制TNF-α 诱导的脐静脉内皮细胞ICAM-1 的表达

2.3 七氟醚预处理抑制TNF-α 诱导的脐静脉内皮细胞JNK、p38MAPK磷酸化水平的增高

2.4 七氟醚预处理抑制TNF-α 诱导的脐静脉内皮细胞ICAM-1 的表达与JNK的关系

2.5 七氟醚预处理抑制TNF-α 诱导的脐静脉内皮细胞ICAM-1 的表达与p38MAPK的关系

3 讨论

4 结论

参考文献

综述

参考文献

致谢

在学期间承担/参与的科研课题与研究成果

个人简历

【参考文献】