CXCR4基因过表达HUCB-late EPCs移植对大鼠后肢缺血组织血管新生的影响

发布时间：2018-02-16 16:07

  本文关键词： 趋化因子受体 后肢缺血模型 血管新生　出处：《中国动脉硬化杂志》2017年03期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：目的观察转染rAAV_6-CXCR4和rAAV_6-GFP后,初步探索其是否对HUCB-late内皮组细胞(EPCs)的体外成血管能力及体内缺血组织血管新生有影响。方法用rAAV_6-CXCR4、rAAV_6-GFP感染HUCB-late EPCs,Western Blot检测CXCR4蛋白表达水平;应用基质胶成血管实验检测转染后细胞的体外成血管能力。构建SD大鼠后肢缺血模型,以一侧股动脉及分支结扎、离断的方法构建后肢缺血模型;18只大鼠建模成功后随机摸球法分为3组。空白组:损伤后6 h于局部注射500μL EGM-2;对照组:损伤后6 h于局部注射500μL含1×10~6个HUCB-late EPCs的EGM-2;实验组:损伤后6 h于局部注射500μL含1×10~6个CXCR4过表达HUCB-late EPCs的EGM-2。28天后,HE染色检测缺血后肢肌肉间、肌肉旁微小血管情况;免疫组织化学染色检测肌肉间、肌肉旁新生血管CD31阳性内皮细胞的表达情况,并计算CD31阳性新生微血管数量。结果 rAAV_6-CXCR4感染组HUCB-late EPCs中CXCR4蛋白的表达高于rAAV_6-GFP感染组和对照组。3组体外成血管能力差异无统计学意义(P0.05)。体内实验,与空白组、对照组比较,实验组新生微血管表达的CD31~+内皮细胞明显增多(P0.05)。结论 CXCR4过表达的HUCB-late EPCs可以促进SD大鼠后肢缺血组织新生微血管的形成。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of rAAV_6-CXCR4 and rAAV_6-GFP transfection on the in vitro vascularization of HUCB-late endothelial cells and angiogenesis of ischemic tissues in vivo. Methods the expression of CXCR4 protein in HUCB-late EPCs was detected by rAAV6-CXCR4 and rAAV6-GFP infected with HUCB-late EPCsT Western Blot. The vascular formation ability of transfected cells in vitro was detected by matrix gelatinization experiment. The model of hindlimb ischemia was established in SD rats and was ligated by unilateral femoral artery and branches. 18 rats were randomly divided into three groups: the blank group received local injection of 500 渭 L EGM-2 at 6 h after injury, the control group received local injection of 1 脳 106 HUCB-late EPCs at 6 h after injury, and the control group was divided into 3 groups. Experimental group: after 6 hours of injury, 500 渭 L EGM-2.28 containing 1 脳 10 ~ 6 CXCR4 overexpression of HUCB-late EPCs was injected locally to detect the muscle muscle after ischemia. The expression of CD31 positive endothelial cells in neovascularization was detected by immunohistochemical staining. Results the expression of CXCR4 protein in HUCB-late EPCs of rAAV_6-CXCR4 infected group was higher than that of rAAV_6-GFP infection group and control group (P 0.05). The expression of CD31 ~ endothelial cells increased significantly in experimental group. Conclusion HUCB-late EPCs overexpression of CXCR4 can promote the formation of neovascularization in ischemic tissue of hind limb of SD rats.
【作者单位】： 湖南省人民医院心内科;长沙市第一人民医院心内科;
【基金】：湖南省卫生厅科研基金课题(C2012-011) 湖南省教育厅科研项目(15C0828)
【分类号】：R654.3

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本文编号：1515905