SRC-3抑制小鼠术后肠梗阻肠壁肌层炎症机制研究

发布时间：2018-03-10 08:49

  本文选题：SRC-3　切入点：术后肠梗阻　出处：《福建医科大学》2015年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：研究背景术后肠梗阻是腹部外科手术术后不可避免的并发症,也可见于非腹部手术中,临床表现为腹胀、腹痛、恶心、呕吐,肛门排气排便延迟和不能耐受进食,肠鸣音消失等,推迟进食时间,延长住院天数,增加医疗花费。研究发现术后肠梗阻与炎症反应密切相关。有研究利用术后肠梗阻动物疾病模型和某一基因敲除动物相结合来研究该动物该基因的缺失对术后肠梗阻的影响,这极大地增强了人们对于术后肠梗阻相关机制研究兴趣,也为进一步探索机体对保护肠道功能的分子机理研究提供了一条新思路。类固醇受体辅助激活因子-3(Steroid receptor coactivator 3,SRC-3)最早是在寻找与乳腺癌有关的扩增基因时被发现,近年利用SRC-3基因敲除小鼠研究发现,细菌脂多糖LPS能够诱导SRC-3基因敲除型小鼠产生更高表达水平的炎症因子,并已经通过分子生物学实验证明SRC-3可以抑制TNF-a、IL-1b等促炎因子的翻译。前期实验我们已经成功构建了小鼠术后肠梗阻模型和应用WesternBlotting技术检测到手术处理过的野生型小鼠肠肌层中SRC-3的表达上调,提示SRC-3在术后肠梗阻中起保护作用。在本研究中,我们利用SRC-3敲除小鼠与术后肠梗阻模型结合来进一步探索SRC-3是在小鼠术后肠梗阻中是如何起保护作用的。目的探讨SRC-3抑制小鼠术后肠梗阻肠壁肌层炎症反应的作用。研究方法1.按实验动物饲养要求获得SPF级BALB/c雌性敲除基因型和野生型(SRC-3-/-、SRC-3+/+)(KO、WT)小鼠至10-12周龄,体重为18-23克,通过基因鉴定选择符合实验条件的小鼠。2.在无菌条件下通过规范的腹部外科手术方式切开腹腔,实验组用湿棉签从十二指肠末端涂擦小肠至回盲部,动作轻柔,3次共8-10分钟,建立术后肠梗阻模型,通过酚红验证SRC-3-/-小鼠POI的建立。3.通过ELISA、Real Time-PCR实验方法检检测SRC-3干扰术后肠梗阻肠壁肌层各种细胞因子的变化。结果1.术后24h,实验组SRC-3-/-、SRC-3+/+小鼠的酚红主要分布在sto-s5段,对照组SRC-3-/-、SRC-3+/+小鼠的酚红主要分布在s7-cm段,通过计算酚红分布的几何中心分析得出:对照组中两者无明显差别(P=0.84);而实验组SRC-3-/-小鼠酚红分布几何中值心明显低于SRC-3+/+小鼠酚红分布几何中心值(P=0.017),外科操纵后SRC-3-/-小鼠比SRC-3+/+小鼠产生更严重的胃肠动力障碍,提示SRC-3在术后肠梗阻中起到保护作用。2.Real Time-PCR方法检测发现细胞因子CCL2(P=0.039)、COX-2(P=0.023)、IL-1β(P=0.046)、HO-1(P=0.043)、IFN-γ(P=0.034)在基因敲除小鼠肠壁肌层中的表达明显比在野生型小鼠肠壁肌层中的表达更高,有统计学差异;而CXCL9(P=0.21)、IL-17A(P=0.80)分别在敲除基因型小鼠、野生型小鼠实验组和对照组中比较无统计学差异;无论是对照组还是实验组中的术后24小时SRC-3敲除小鼠IFN-γ表达水平均较野生型表达高,提示SRC-3与IFN-γ可能存在某种联系,并且SRC-3可以抑制肠壁肌层中IFN-γ的表达。3.ELISA方法检测发现促炎因子IL-6(P=0.031)、TNF-α(P=0.036)、IL-1β(P=0.028)和趋化因子CCL2(P=0.025)在KO小鼠肠壁肌层中的表达明显比在WT小鼠肠壁肌层中的表达增高。结论1.鉴定和筛选出符合实验的小鼠,成功构建术后肠梗阻动物模型。2.小鼠经腹部外科手术处理24小时后的SRC-3敲除基因型小鼠肠肌层的细胞因子在m RNA和蛋白水平表达均明显较野生型小鼠高,提示SRC-3在术后肠梗阻中可以抑制肠壁肌层炎症因子的表达,其在术后肠梗阻的炎症反应中起到了保护机体的作用。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：福建医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R656

【共引文献】

相关期刊论文 前10条

1 万荣祖;何明坤;;腹茧症再手术1例探讨[J];安徽卫生职业技术学院学报;2009年06期

2 赵俊淮;;术后早期炎性肠梗阻的诊治[J];安徽卫生职业技术学院学报;2010年04期

3 袁笑;徐阿曼;陈开伟;徐春晖;陆震;;术后早期肠梗阻9例临床分析[J];安徽医学;2012年01期

4 陈玲;;术后早期炎性肠梗阻的观察与护理[J];安徽医药;2006年12期

5 陶应田;王成宏;;阑尾切除术后早期炎性肠梗阻的治疗体会[J];安徽医药;2009年11期

6 谭社荣;李印明;;术后早期炎性肠梗阻36例临床分析[J];北京医学;2007年11期

7 孙国栋;;术后早期炎性肠梗阻33例诊治体会[J];包头医学院学报;2009年02期

8 罗亮;;术后早期炎性肠梗阻67例诊治体会[J];重庆医学;2010年06期

9 徐全宏;;营养支持治疗在术后早期炎性肠梗阻中的应用[J];肠外与肠内营养;2008年06期

10 唐毓林;叶海洪;李振洪;张涌泉;甘雨;;生长抑素(施他宁)在结直肠术后早期炎性肠梗阻治疗中的应用[J];结直肠肛门外科;2007年05期

相关会议论文 前5条

1 赵三鹏;刘德;;中西医结合治疗急性腹部创伤的体会[A];第十届全国中西医结合普通外科学术会议暨胆道胰腺疾病新进展学习班论文汇编[C];2006年

2 陈凯霓;;1例乳房再造术后并发肠梗阻的护理体会[A];第十一届全国中医及中西医结合乳腺病学术会议论文集[C];2009年

3 张敏;;健胃清肠合剂保留灌肠治疗术后早期炎性肠梗阻30例[A];2011年甘肃省中医药学会学术年会论文集[C];2011年

4 杨维建;张超;钟海文;;肠梗阻的中西医结合诊治策略[A];中医药继续教育新论2013[C];2013年

5 张敏;;健胃清肠合剂保留灌肠治疗术后早期炎性肠梗阻30例[A];甘肃省中医药学会2012年学术年会论文汇编[C];2012年

相关博士学位论文 前1条

1 张群;大鼠腹部手术后胃肠动力功能障碍机制及ω-3脂肪乳剂干预的随机、对照研究[D];中国协和医科大学;2008年

相关硕士学位论文 前10条

1 邢承刚;通腑汤治疗术后早期炎性肠梗阻60例临床观察[D];北京中医药大学;2011年

2 黄斌;中西医结合治疗术后早期炎性肠梗阻30例临床观察[D];北京中医药大学;2008年

3 韩建伟;泛影葡胺对术后早期炎性肠梗阻治疗价值的研究[D];中南大学;2009年

4 李刚;通腑泻热合剂辅助治疗术后早期炎性肠梗阻的临床研究[D];广州中医药大学;2010年

5 武海明;肠梗阻导管联合早期肠内营养及大承气汤治疗术后早期炎性肠梗阻[D];天津医科大学;2010年

6 冯强;生长抑素治疗术后早期炎性肠梗阻的临床研究[D];泸州医学院;2010年

7 兰磊;通腹汤治疗术后早期炎性肠梗阻33例临床观察[D];辽宁中医药大学;2010年

8 王梦雨;益气通腑汤促进妇科腹部术后胃肠功能恢复的临床研究[D];北京中医药大学;2012年

9 许超;结直肠癌根治术后肠梗阻的相关因素分析[D];福建医科大学;2012年

10 刘火城;经鼻型肠梗阻导管在急性肠梗阻治疗中的应用[D];福建医科大学;2013年

，

本文编号：1592612