2-DG标记的氧化铁纳米粒靶向横纹肌肉瘤细胞的研究

发布时间：2018-03-23 09:06

本文选题：氧化铁纳米粒　切入点：表面修饰　出处：《江苏大学》2017年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：目的(1)合成Fe_3O_4@OA NPs、Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG NPs及Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG-DG NPs,并对纳米粒子进行表征。(2)比较横纹肌肉瘤细胞对Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG-DG NPs和Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG NPs以及4.5 g/L葡萄糖竞争抑制下的Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG-DG NPs的吸收差异,检测横纹肌肉瘤细胞对Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG-DG NPs靶向摄取情况。方法(1)采用热分解法合成Fe_3O_4@OA NPs,经表面修饰后合成Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG NPs及Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG-DG NPs。电镜下观察纳米粒的形态、大小及分散性,振动样品磁强计检测其磁学性质,热重分析仪检测纳米粒子表面修饰物的情况。(2)将0.3μmol/m L Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG-DG NPs、Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG NPs及4.5g/L游离葡萄糖竞争抑制下的Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG-DG NPs与横纹肌肉瘤A-673细胞孵育10 min、30 min、1h、2 h时,采用普鲁士蓝染色检测细胞株的靶向吸收情况,MRI扫描观察T2WI、SWI信号强度和多回波序列T2值,原子吸收光谱法检测细胞内铁含量。结果(1)Fe_3O_4@OA NPs的形态似立方体,平均粒径10.4±0.8 nm,在正己烷中呈单分散性,Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG NPs在水中分散稳定性良好。两者的磁饱和强度分别为81.2±5.3 emu/g、59.7±4.8 emu/g,没有剩磁及矫顽力。热重分析图显示,油酸及聚乙二醇连接在纳米粒子表面。(2)普鲁士染色结果显示,Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG-DG NPs、Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG NPs与横纹肌肉瘤A-673细胞孵育10 min、30 min时,细胞对纳米粒的吸收不明显;1h时,Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG-DG NPs组细胞内蓝染颗粒稍增加;2 h时,Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG-DG NPs组细胞内蓝染颗粒显著增加,明显多于Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG NPs组,并可被4.5 g/L游离葡萄糖竞争抑制。(3)MRI T2WI上显示,与横纹肌肉瘤A-673细胞孵育10 min、30 min,Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG-DG NPs组、Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG NPs组及竞争抑制组信号下降不明显;1h时,三组信号降低,Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG-DG NPs组信号稍低于其他两组;2 h时,Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG-DG NPs组信号显著下降,明显低于Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG NPs组及竞争抑制组。(4)MRI多回波序列显示,与横纹肌肉瘤A-673细胞孵育10 min、30 min,Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG-DG NPs组T2值和Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG NPs组T2值、Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG-DG NPs组T2值和竞争抑制组T2值比较无统计学差异;与横纹肌肉瘤A-673细胞孵育1h、2 h,Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG-DG NPs组T2值和Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG NPs组T2值、Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG-DG NPs组T2值和竞争抑制组T2值比较有显著差异。(5)MRI SWI信号显示,与横纹肌A-673细胞孵育的Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG-DG NPs组、Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG NPs组及竞争抑制组均随着孵育时间的延长信号逐渐呈下降趋势,并且任意时间点Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG-DG NPs组信号明显低于Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG NPs组及竞争抑制组。(6)铁含量测定结果显示,不同时间点,Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG-DG NPs组铁吸收量明显多于Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG NPs组及竞争抑制组,并且Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG-DG NPs组与其他两组各时间点比较均有统计学差异。结论(1)纳米粒表面成功包被油酸和聚乙二醇,具有较好的稳定性和水溶性。(2)横纹肌肉瘤细胞对Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG-DG NPs有明显靶向吸收,PEG在抗细胞非特异性黏附的基础上更好地实现了2-DG的靶向性识别作用,从而使纳米粒子更精准地定位于肿瘤细胞,Fe_3O_4@OA-OA_2-PEG-DG NPs有望成为新型的分子磁共振探针靶向恶性肿瘤。磁共振SWI序列对较低浓度的氧化铁纳米粒很敏感,为检测低浓度对比剂靶向肿瘤的活体动物实验提供了有效的检测方法。
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【学位授予单位】：江苏大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R738.7

【参考文献】