脱氧胆酸钠（SD）在脂肪细胞溶脂和微血管内皮细胞（MECs）凋亡方面的研究

发布时间：2021-03-18 10:06

  目的:验证脱氧胆酸钠(SD)对脂肪细胞的溶解作用,研究脱氧胆酸钠(SD)在微血管内皮细胞凋亡中的影响,为减少SD溶脂过程中对血管的损伤提供理论依据,增加SD溶脂的安全性。方法:1、观察SD对脂肪细胞损伤作用;检测方法:CCK-8、乳酸脱氢酶检测。2、观察SD对HDMECs的损伤作用并研究以Caspase-3激活为主的凋亡途径在这一损伤中的影响;检测方法:CCK-8、Western Blot、Real-time PCR、Annexin V/PI双染。3、研究凋亡在SD损伤脂肪细胞中的影响;检测方法:Hoechst染色、Western Blot、CCK-8。4、观察运用Z-DEVD-FMK(Caspase-3抑制剂)后SD对HDMECs损伤程度及凋亡作用方面的变化;检测方法:CCK-8、Western Blot、Annexin V/PI双染。结果:1、不同浓度的SD作用后均可引起人成熟脂肪细胞存活率降低,使脂肪细胞膜受损,细胞数量减少。2、不同浓度的SD可使HDMECs存活率下降;0.15mg/m L的SD作用于HDMECs 4、8、12h后,Western Blot检测Bax表达、Caspase-3及PARP活化增加;除4h外,药物作用8、12h时,Caspase-9活化比对照组显著增高;Bcl-2无明显变化;各时间点Caspase-8活化不显著;加入Z-DEVD-FMK后Caspase-3及PARP活化均减少;Real-time PCR检测SD作用下HDMECs后Bax mRNA表达稍增加,Bcl-2 mRNA表达无明显改变;Annexin V/PI双染流式细胞仪检测发现低浓度SD作用于HDMECs后细胞早期凋亡稍增加,高浓度时坏死或晚期凋亡的细胞比例相对较大。3、SD作用于脂肪细胞后Hoechst染色未见明显细胞凋亡;Western Blot检测Caspase-3无明显活化;加入Z-DEVD-FMK并未使脂肪细胞存活增加。4、SD联合Z-DEVD-FMK可减少SD对HDMECs的损伤,使Caspase-3和PARP活化减少,早期凋亡的比例减少。结论:SD可以通过依赖Caspase-3的细胞凋亡途径损伤HDMECs,但其对细胞的物理性破坏作用仍较大。
【学位授予单位】：第二军医大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R656

【参考文献】

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本文编号：1727861