诱导成骨分化过程中BMP与WNT信号通路串话机制

发布时间：2018-10-08 18:33

【摘要】：目的探究小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化过程中,BMP-2/Smad信号通路与Wnt/β-catenin通路的串话机制。方法将预先准备好的重组人骨形态发生蛋白-2(rh BMP-2)质粒转染至C3H10T1/2细胞,利用G418抗药性筛查转染成功的细胞。将实验细胞分为转染组、空白组。通过ELISA检测各组细胞上清液中的BMP-2含量,采用Western blot和RT-PCR方法检测两组中Smad泛素化调节因子2(Smurf2)、β-链蛋白(β-catenin)、磷酸化β-链蛋白(pβ-catenin)、转录因子RUNX2、淋巴增强因子1(LEF1)、Axin2、糖原合成激酶-3β(GSK-3β)等关键细胞因子的表达水平。结果与空白组比较,转染组BMP-2浓度升高并维持在较高水平(P0.05),β-catenin mRNA的表达上调(P0.05)和磷酸化水平增加(P0.01),LEF1蛋白合成上调(P0.05),Smurf2蛋白表达减少(P0.05),RUNX2的mRMA表达上调(P0.01)。结论在成骨细胞分化过程中,BMP-2/Smad信号通路与Wnt/β-catenin通路存在串话机制,增加β-catenin的表达水平,促进β-catenin的磷酸化。
[Abstract]:Objective to investigate the crosstalk between BMP-2 / Smad signaling pathway and Wnt/ 尾 -catenin pathway during osteogenic differentiation of mouse bone marrow mesenchymal stem cells. Methods Recombinant human bone morphogenetic protein-2 (rh BMP-2) plasmid was transfected into C3H10T1/2 cells. G418 resistance was used to screen the transfected cells. The experimental cells were divided into transfection group and blank group. The content of BMP-2 in supernatant of each group was detected by ELISA. The expression of key cytokines such as Smad ubiquitin regulatory factor 2 (Smurf2), 尾 -chain protein (尾 -catenin), phosphorylated 尾 -catenin (p 尾 -catenin), RUNX2, lymphoid enhancer 1 (LEF1) and glycogen synthetic kinase 3 尾 (GSK-3 尾) were detected by Western blot and RT-PCR. Results compared with the control group, the concentration of BMP-2 in the transfected group was elevated and maintained at a higher level (P0.05), the expression of 尾 -catenin mRNA was up-regulated (P0.05) and the level of phosphorylation was increased (P0.01). The expression of Smurf2 protein decreased (P0.05) and the expression of mRMA of RUNX2 was up-regulated (P0.01). Conclusion there is a crosstalk mechanism between BMP-2 / Smad signaling pathway and Wnt/ 尾 -catenin pathway during osteoblast differentiation, which can increase the expression level of 尾 -catenin and promote the phosphorylation of 尾 -catenin.
【作者单位】： 广西医科大学第一附属医院骨关节外科;右江民族医学院附属医院烧伤科;
【基金】：广西自然科学基金资助项目(编号:2013XNSFAAA278006,2014GXNSFBA118117) 广西壮族自治区高等学校科学研究项目资助(编号:KY2015YB071)
【分类号】：R68

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本文编号：2257834