临床肝移植术后缺血型胆道病变的相关研究

发布时间：2018-10-16 13:54

【摘要】：目的:了解肝移植术后发生缺血型胆道病变(Ischemia-type biliary lesions,ITBL)危险因素。建立ITBL的临床-影像学分级方法。通过前瞻性研究验证ITBL发生的危险因素,观察冷保存胆道损伤与ITBL的关系。了解发生ITBL,冷缺血时间延长和胆道上皮细胞调亡相关基因表达之间的关系。方法:回顾性分析886例肝脏移植患者临床资料根据胆道造影和影像学检查,确定ITBL的诊断。并将所有病例分为ITBL组与非ITBL组(NITBL组)。对两组间的供体因素、受体因素、手术因素、术后因素进行单因素和多因素分析。分析ITBL患者124例的临床-影像学资料,根据胆道影像学严重程度,胆红素水平高低对ITBL程度评分。将ITBL分为轻、中、重度。对有、无ITBL组间患者生存时间、移植物生存时间、不良预后发生率进行kaplan-meier分析;同时对轻、中、重度三组之间的患者生存时间,移植物生存时间,不良预后发生率进行kaplan-meier分析。选取50例原位肝移植进行前瞻性研究,根据胆道造影和影像学检查,确定ITBL诊断。并将所有病例分为ITBL组与NITBL组。对第一部分结论中的危险因素进行单因素和多因素分析。收集供肝完整修整后和门脉开放后胆管组织,观察ITBL组与NITBL组冷保存胆道的病理,电镜改变。将保存的胆道组织进行实时定量PCR(QRT-PCR)检测其中Bcl-2、Bcl-xL、PARP-2、MMP-2、Caspase-3基因水平。对MMP-2、Caspase-3蛋白水平进行Western-Blot定量检测。分别按ITBL组与NITBL组,按冷缺血时间长短分组,按门脉血流恢复前后取材分组。分析各组间基因与蛋白表达水平的差异。结果:回顾性单因素分析显示:冷缺血时间(P0.001),术中冰冻血浆用量(P0.001),手术无肝期(P0.001),术中红细胞用量(P=0.003)在ITBL与NITBL组间有显著统计学差异。多因素分析结果显示:供肝冷缺血时间(P0.001),术中新鲜冰冻血浆用量(P=0.012),无肝期时间(P=0.02),是肝移植术后缺血型胆道病变的独立危险因素。ITBL组与NITBL组两组间患者生存率、移植物生存率、不良预后发生率均有非常显著统计学差异(P0.001)。轻度、中度、重度ITBL组两两组间患者生存没有显著统计学差异;移植物生存在轻、中度组与重度组间有非常显著统计学差异(P=0.004,P=0.002),轻、中度组间没有显著统计学差异;不良预后发生率在轻度组与中、重度组间有显著统计学差异(P=0.014,P=0.001),中、重度组间没有显著统计学差异。前瞻性研究结果显示:单因素分析提示冷缺血时间(P=0.033),在ITBL与NITBL组间有显著统计学差异。由于ITBL组例数较少,多因素分析结果显示:供肝冷缺血时间,术中新鲜冰冻血浆用量,无肝期时间均不是肝移植术后ITBL的独立危险因素。ITBL冷保存胆管与NITBL组相比有较多的胆道上皮细胞脱落,调亡、及相应电镜表现。ITBL组与NITBL组相比Bcl-2(P=0.0082)、Bcl-xL(P=0.021),基因水平明显下降,PARP(P=0.037)、MMP-2(P=0.021)、Caspase-3(P=0.023)基因表达水平明显增高。MMP-2(P=0.048)、Caspase-3(P=0.009)蛋白表达水平明显增高。冷缺血时间9小时组Bcl-2(P=0.011)、Bcl-xL(P=0.017)水平明显下降,PARP(P=0.018)、MMP-2(P=0.014)、Caspase-3(P=0.019)基因表达水平明显增高。MMP-2(P=0.046)、Caspase-3(P=0.047)蛋白表达水平明显增高。肝脏复流前、后取材分组,各基因、蛋白表达水平均无明显差异。结论:供肝冷缺血时间、术中新鲜冰冻血浆用量和无肝期时间是ITBL的发生的危险因素。ITBL明显降低患者生存和移植物生存,提高不良预后发生率。按照胆道影像学-临床严重程度建立的ITBL分型可以很好的预测ITBL预后。ITBL患者较非患者组冷保存胆管有更严重的胆道上皮损伤。ITBL的发生与供肝胆管组织细胞凋亡相关基因水平改变有明显的相关性。冷缺血时间延长与供肝胆道组织细胞凋亡相关基因水平改变有明显的相关性。在供肝冷缺血期间发生的细胞凋亡系统的激活可能是术后ITBL的发生的机制之一。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：天津医科大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R657.3

【共引文献】