新生血管形成与椎间盘退变相关性的临床及基础研究

发布时间：2018-10-17 08:38

【摘要】：研究目的：在人类脊柱退行性中椎间盘退变是病变是重要的病因。研究证实椎间盘退变始于终板钙化,且退变钙化过程与新生血管形成相伴行,但具体作用至今不明。骨髓内皮前体细胞(Endothelial Progenitor Cells, EPCs)有分化成正常人体多种细胞的可能,其与人体其他组织器官的新生血管形成有很大关系：在人体椎间盘退变过程中,椎间盘内部的新生血管形成与退变钙化的演进过程有某种关联,其作用不仅只限于“管道”输送,而是存在EPCs诱导转化直接参与钙化进程的可能。目前该领域尚未见相关研究报道。立足前期研究,本课题拟先构建改良型的C57/BL6小鼠腰椎间盘退变模型,探讨血管形成与椎间盘退变钙化演进过程相关性；通过GFP荧光鼠骨髓移植检测在已建模型椎间盘病变进程中EPCs定位表达情况,并通过血管生成调控揭示其与椎间盘退变钙化的相关性。研究方法：1.1重新建立改良型的C57/BL6小鼠腰椎间盘退变模型,以此来探索小鼠椎间盘退变钙化的进程与椎间盘内新生血管形成的相关性：(1)构建BMP-2纳米PLGA缓释微球：改良乳化冷冻凝聚法制备载BMP-2纳米PLGA微球：(2)穿刺法制造大鼠腰椎间盘退变模型：在L3/4仅显露,不做处理(阴性对照),L4/5椎间盘注入每组相同剂量BMP-2纳米微球(阳性对照),L5/6层面进行针刺(实验组)；(3)新生血管形成与椎间盘退变钙化情况分析：椎间盘HE染色、免疫组化检测和Vonkossa染色；(4)统计分析：椎间盘退变钙化进程与新生血管形成相关性。1.2研究骨髓EPCs与椎间盘退变钙化、新生血管形成相关性：(1)改良腰椎间盘退变小鼠模型,经骨髓灭活,移植GFP荧光小鼠骨髓,构建EPCs与小鼠腰椎间盘退变钙化新生血管形成相关性模型(2)明确退变钙化椎间盘里EPCs定位、表达情况及其与新生血管形成、退变钙化三者的相关性。结果：1、小鼠椎间盘退变、钙化的检测结果：①micro-CT扫描及重建显示：小鼠L4/5、L5/6椎间盘高度逐渐下降。L5/6椎间盘有可见软骨终板的硬化,椎体骨赘形成,L3/4椎间盘椎间盘高度未见明显改变。②HE染色结果：椎间盘损伤后L4/5、L5/6椎间盘出现明显退变征象。1月后椎间高度丢失、纤维环结构紊乱并开始出现裂隙,髓核细胞数量减少,细胞外机制变性；3月后椎间盘高度继续丢失,纤维环髓核结构紊乱,炎性细胞浸润。③Von kossa染色：3个月后L4/5椎间盘出现软骨终板硬化,髓核钙化。④免疫组化染色：3个月后椎间盘退变后髓核、纤维环、软骨终板内都有新生血管形成。⑤椎间盘内新生血管形成于椎间盘退变、钙化的相关性分析：根据Mann-whitney U检验：P=0.039,L4/5、L5/6椎间盘钙化程度比较差别有统计学意义,L4/5椎间盘的钙化程度高于L5/6。根据Mann-whitney U检验：P=0.019,L4/5、L5/6椎间盘新生血管量的比较有统计学意义,L4/5椎间盘的新生血管量高于L5/6。采用Spearman秩相关检验：新生血管形成与钙化程度在L4/5、L5/6都有相关性(P0.01)。2、骨髓血管内皮祖细胞(EPCs)与椎间盘退变钙化、新生血管形成结果：①椎间盘EPC表达与椎间盘新生血管形成的比较：采用Spearman秩相关检验：EPC的表达与新生血管形成在L4/5、L5/6都有相关性(P0.01)。②采用Spearman秩相关检验：EPC的表达与钙化程度在L4/5、L5/6都有相关性(P0.01)结论：①BMP-2纳米PLGA微球的置入能够促进椎间盘的钙化。在退变的椎间盘中,新生血管形成与椎间盘钙化有相关性。②EPC在退变椎间盘中的表达及钙化与新生血管形成相关。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：第二军医大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R681.53

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 古洵请,傅守静;眼新生血管形成的发病机理[J];国外医学.眼科学分册;1984年03期

2 苟文军;吕红彬;;血管生成促进因子在糖尿病视网膜病变新生血管形成中的作用[J];眼科新进展;2010年10期

3 Cassel GH;Groden LR;赵家良;;眼部新生血管形成的新见解[J];国外医学.眼科学分册;1985年04期

4 肖扬,焦炳华,娄永华,刘梁英,朱玉平;重组人可溶性血管内皮细胞生长抑制因子的抗新生血管形成活性研究[J];药物生物技术;2001年01期

5 李宏江,敬静,赵扬冰,朱精强,张世羽,史宗道;腋淋巴结阴性乳腺癌新生血管形成活性的研究[J];癌症;2002年01期

6 余振标,孟向平,李宏,严正琪;晶体新生血管形成[J];眼科研究;1987年04期

7 Bert M Glaser ,蒋幼芹;细胞外调节因子对眼内新生血管形成的控制[J];国外医学.眼科学分册;1989年04期

8 张春;容张婷;;碱性成纤维细胞生长因子促进肺癌新生血管形成的机制[J];中国老年学杂志;2014年05期

9 刘明;李春峰;林罗强;;葡萄抑制新生血管形成的实验研究[J];实用肿瘤学杂志;2005年06期

10 张惠蓉;视网膜分支静脉阻塞和新生血管形成[J];中华眼底病杂志;1994年02期

相关会议论文 前9条

1 张巍;柯薇;汪理筠;甘露;周锐;吴思思;蒋维;辛洪波;;Intermedin介导的促肿瘤新生血管形成作用[A];第十一次中国生物物理学术大会暨第九届全国会员代表大会摘要集[C];2009年

2 贾英杰;;消岩颗粒抑制肿瘤新生血管形成作用的研究[A];科技、工程与经济社会协调发展——中国科协第五届青年学术年会论文集[C];2004年

3 王海玲;卞福民;王宇;;三脉血注射液促进新生血管形成的实验研究[A];2001年全国中西医结合急救医学学术会议论文集[C];2001年

4 严鹏科;赵慧;黄煌;梅峥嵘;段才闻;;Jagged1在生理性和病理性新生血管形成中的表达变化[A];共铸医药学术新文明——2012年广东省药师周大会论文集[C];2012年

5 廖华萍;张士胜;孙悦;王玲;;不同能量半导体激光对大鼠脉络新生血管形成的影响[A];中华医学会第十二届全国眼科学术大会论文汇编[C];2007年

6 代梅;缪泽鸿;林莉萍;丁健;;MFTZ-1通过HIF依赖和非依赖的途径抑制新生血管形成[A];2007医学前沿论坛暨第十届全国肿瘤药理与化疗学术会议论文集[C];2007年

7 赵鸿鹏;卢俊;;血管内皮生长因子与原发性肝细胞肝癌[A];山东抗癌协会普外肿瘤专业委员会第三次学术会议论文汇编[C];2006年

8 赵丽莎;邓涛;;HIF-1α及Ang-2在直肠癌新生血管形成过程中的作用[A];中华医学会第七次全国消化病学术会议论文汇编（下册）[C];2007年

9 曹春妮;肖平田;;早产儿视网膜病变与高压氧治疗[A];中华医学会第十五次全国高压氧医学学术会议论文汇编[C];2006年

相关博士学位论文 前1条

1 王彪;Slit2 在肿瘤新生血管形成中的功能研究[D];中国科学院研究生院（上海生命科学研究院）;2004年

相关硕士学位论文 前7条

1 李仁虎;新生血管形成与椎间盘退变相关性的临床及基础研究[D];第二军医大学;2015年

2 张娜;Slit2/Robo1蛋白在肿瘤新生血管形成中的表达研究[D];浙江大学;2005年

3 刘岩;携带Kringle5基因的重组腺病毒抗新生血管形成的实验研究[D];复旦大学;2008年

4 刘玲;中药防治糖尿病性视网膜病变新生血管形成的机理研究[D];山东中医药大学;2001年

5 祁蕙;黄癸素抑制肿瘤新生血管形成的研究[D];福建医科大学;2012年

6 张永强;白藜芦醇诱导新生血管形成在小鼠缺血再灌注后的保护作用[D];第四军医大学;2010年

7 李莉;血清及房水中VEGF、IL-6水平与新生血管性青光眼的相关性研究[D];大连医科大学;2011年

，

本文编号：2276111