右美托咪定心脏保护作用及相关microRNA表达谱的分析

发布时间：2019-09-17 07:08

【摘要】：[目的]本研究主要以在体大鼠心肌缺血再灌注损伤模型为对象,通过对比各组样本之间的心肌梗死面积的大小,探究右美托咪定对在体大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用。同时利用基因芯片技术分析右美托咪定对在体大鼠心肌缺血再灌注损伤保护作用的miRNA差异表达谱。为以后在基因层面探究右美托咪定对心肌缺血再灌注损伤保护机制,及后续分子生物学层面的探索打下基础。[方法]用健康雄性SPF级SD大鼠280-300g建立在体大鼠心肌缺血再灌注损伤模型。实验共分为四组分别为:空白组(C组,只挂线不做任何处理)、缺血/再灌注组(IR组)、右美托咪定预处理组(DP组)、缺血预处理组(IP组)。C组持续灌注180min不做任何处理:IR组稳定期后继续灌注30min;DP组于稳定期末后15min经颈内静脉注射右美托咪定溶液,剂量为20ug/kg,再灌注15min(即右美托咪定预处理);IP组于稳定期末结扎左前降支5min开放5min重复三个循环(即缺血预处理)。随后IR组、DP组、IP组均结扎左前降支30min然后松开结扎丝线再灌注120min。用TTC染色的方法测定各组心肌梗死面积,甲醛脱水石蜡包埋切片,HE染色观察心肌组织改变,基因芯片技术分析miRNA差异表达谱。结果分析用SPSS17.0,各组心肌梗死面积的差异采用方差分析,基因芯片中miRNA的分析采用T-检验的方法。[结果]C组与IR组、DP组及IP组的心肌梗死面积的差异有统计学意义(P0.05);IR组与C组、DP组及IP组的心肌梗死面积的差异有统计学意义(P0.05);DP组与IR组、C组的心肌梗死面积的差异有统计学意义(P0.05),与IP组心肌梗死面积差异无统计学意义;IP组与IR组、C组的心肌梗死面积的差异有统计学意义(P0.05),与DP组心肌梗死面积差异无统计学意义。与IR组相比C组共8个miRNA表达上调,共4个miRNA表达下调;与C组相比IP组共12个miRNA表达上调,共6个miRNA表达下调;与C组相比DP组共6个miRNA表达上调,共3个miRNA表达下调;与IP组相比DP组共16个miRNA表达上调,共4个miRNA表达下调;与IR组相比DP组共27个miRNA表达上调,共38个miRNA表达下调;与IR组相比IP组共42个miRNA表达上调,共72个miRNA表达下调。[结论]右美托咪定预处理可以起到对抗心肌缺血再灌注损伤的作用;其作用机制与miRNA的异常表达有着十分密切的关系。
【图文】：

注组（ＩＲ组）、右美托咪定预处理组（ＤＰ组）、缺血预处理组（ＩＰ组）；６只用逡逑于心肌梗死面积大小的分析，１只用于病理检查。所有大鼠均禁食１２ｈ，不禁饮。逡逑实验进程如图１所示。逡逑ｃＭ逡逑＊逦１邋－＾Ｊｄｆ逦＾逦ｖ邋＊邋／＞邋－邋＂１＇邋ＭＣＪ邋＾邋＾４逡逑０逦２０逦４０逦６０逦８０逦１００逦１２０逦１４０逦１６０逦１８０逦２００逡逑！逦１逦１邋Ｉ逦Ｉ邋Ｉ逡逑Ｔ１邋Ｔ２逦Ｔ３邋Ｔ４逦Ｔ５逡逑ｋ￣ａ心脏灌流：：：：：：：：：：：缺血预处理＊Ｈ心肌缺血逡逑注：Ｔ１：稳定期末；Ｔ２：邋ＤＰ组注射右美托咪定；Ｔ３：心肌缺血即刻；Ｔ４：再灌注即刻逡逑（缺血３０ｍｉｎ）即刻；Ｔ５：再灌注１２０ｍｉｎ结束即刻；逡逑图１实验分组及处理示意图逡逑２．４实验步骤逡逑在建模成功后，Ｃ组持续灌注１８０ｍｉｎ不做任何处理：ＩＲ组于稳定期后继逡逑续灌注３０ｍｉｎ；邋ＤＰ组于稳定期末后１５ｍｉｎ经颈内静脉注射右美托咪定溶液，剂逡逑量为２０ｕｇ／ｋｇ，而后再灌注１５ｍｉｎ邋（即右美托咪定预处理）；ＩＰ组于稳定期末结逡逑扎左前降支５ｍｉｎ开放５ｍｉｎ重复三个循环（即缺血预处理）。随后ＩＲ组、ＤＰ组、逡逑ＩＰ组均结扎左前降支３０ｍｉｎ；结扎３０ｍｉｎ后松开结扎丝线再灌注１２０ｍｉｎ邋（通过逡逑１１逡逑

ＤＰ组心肌梗死面积差异无统计学意义，可以认为、ＩＰ组与ＩＲ组、Ｃ组之间的心逡逑肌梗死面积有差异。ＩＰ组与ＤＰ组心肌梗死面积无差异。逡逑具体结果如表１、图２所示，所有数据均采用均数±标准差来表示。逡逑表１四组大鼠心肌梗死面积的比较（％，ｎ＝６，无土；ｓ）逡逑ｍ＼逦＾逦梗死面积逡逑￣ＣＨ逦３．５７士２．３５逡逑Ｒ邋组逦３９．２３±１．３８＊逡逑ＤＰ邋组逦２２．１３±２．３７＃＊逡逑ＩＰ邋组逦２５．２５±１．２４＃＊逡逑注：与Ｃ组相比，＞＜０．０５；与ＩＲ组相比，＃Ｐ＜０．０５逡逑４５邋逦逡逑＊逡逑４０逦＊煖逦逦逦逦逦逦逡逑３５邋逦逡逑逦＇Ｉ邋—邋——邋．逦逦邋￣逡逑逦－Ｂ逡逑Ｃ组逦ＩＲ组逦ＤＰ组逦ＩＰ组逡逑注：与Ｃ组相比，＞＜０．０５；与ＩＲ组相比，＃Ｐ＜０．
【学位授予单位】：昆明医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R614

【参考文献】

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本文编号：2536717