miR-143过表达对骨肉瘤143B细胞侵袭和迁移能力的影响

发布时间：2019-09-17 11:44

【摘要】：目的研究miR-143过表达对人成骨肉瘤143B细胞侵袭及迁移能力的影响。方法通过慢病毒携带miR-143过表达载体转染骨肉瘤143B细胞,实验分为3组。实验组转染miR-143过表达序列,对照组转染阴性对照NC序列,空白组为空白PBS。分别采用实时荧光定量PCR、Western blot、Transwell小室侵袭实验和细胞划痕实验检测各组基因、蛋白的表达以及细胞侵袭和迁移能力。结果实验组miR-143基因和蛋白的表达,相较于对照组和空白组显著增加(P0.05),而基质金属蛋白酶-13(MMP-13)基因和蛋白的表达相较于对照组和空白组显著减少(P0.05);实验组穿膜细胞数显著低于对照组和空白组(P0.05);实验组细胞划痕愈合率显著低于对照组和空白组(P0.05)。结论 miR-143过表达通过靶向MMP-13基因,进一步抑制成骨肉瘤143B细胞侵袭及迁移能力。
【图文】：

细胞密度为2×106·mL－1的单细胞悬液。细胞融合率达到100%时用10μL的枪头作笔直划痕，划痕完毕后，，PBS轻洗细胞3次，漂洗去除划下的细胞，继续培养。按0、24、48h时间点取样，拍照，用ImageJ软件分析培养0、24、48h时的各组划痕情况。1．3统计学方法采用SPSS20.0统计软件，采用单因素方差分析，多组间比较使用SNK法，以P＜0.05为差异有统计学意义。2结果2．1观察转染率采用激光共聚焦显微镜检测转染效率，根据最强红色荧光判断转染率，转染率可达90%以上，证实本实验的转染方法是成功的，转染率高。见图1。A:荧光图;B:透视图;C:A和B组合图图1激光共聚焦显微镜观察转染率·1810·广东医学2017年6月第38卷第12期GuangdongMedicalJournalJun．2017，Vol．38，No．12

无统计学意义(P＞0.05)。见表1。表1各组miＲ－143和MMP－13mＲNA的表达(n=6)xs

本文编号：2536841