【摘要】：目的研究重组人红细胞生成素与β-七叶皂甙钠治疗大鼠脊髓损伤后其功能恢复以及损伤段神经细胞凋亡的情况。方法选择雌性成年SD大鼠共50只,依据其损伤与治疗的情况分为五组:空白组、损伤组、rh EPO组与β-SE组、联合治疗组。空白组采用等体积生理盐水腹腔注射、损伤组为脊髓打击损伤组,rh EPO组单纯采取重组人红细胞生成素,β-SE组单纯采取β-七叶皂甙钠治疗,联合治疗组采取重组人红细胞生成素与β-七叶皂甙钠治疗,评价各组不同时间的BBB评分,比较各组神经功能,NF-κB免疫组化检测结果,组织Ca~(2+)、Mg2+含量,比较组织学HE染色结果,比较免疫组化结果以及神经细胞凋亡因子的检测结果。结果(1)联合治疗组BBB运动功能评分均显著高于rh-EPO组、β-SE组和损伤组,差异均存在显著性差异(P0.01)。rh-EPO组、β-SE组恢复缓慢,各时间点评分值虽明显高于损伤组,但是均落后于联合治疗组,差异有显著性(P0.05)。(2)空白组动物的神经功能正常、运动正常。联合治疗组的神经功能优于rh-EPO组、β-SE组,差异比较有统计学意义(P0.05)。rh-EPO组、β-SE组、联合治疗组的神经功能要比损伤组好。(3)联合治疗组伤后也显示有大量的NF-κB表达,与空白对照比较存在明显差异(P0.05),并且低于损伤组、Rh-EPO组、β-SE组,差异有显著性(P0.05),rh EPO组、β-SE组表达量明显低于损伤组,差异有显著性,其中以8h、14h两时间点尤为显著(P0.01)。(4)大鼠脊髓损伤后空白对照组Ca~(2+)含量显著高于损伤组、rh-EPO组、β-SE组及其联合治疗组,差异有显著性(P0.05),联合治疗组的Ca~(2+)含量显著高于rh-EPO组、β-SE组,差异有显著性(P0.05)。空白对照组Mg2+含量显著低于损伤组、rh-EPO组、β-SE组及其联合治疗组,差异有显著性(P0.05);联合治疗组的Mg2+含量显著低于rh EPO组、β-SE组,差异有显著性(P0.05)。(5)rh EPO组与β-SE组表现相似,但程度有所减轻,联合治疗组改善更明显。镜下可见脊髓组织灰白质界限较清楚,损伤区域面积较rh EPO组和β-SE组小,亦有出血坏死;出血水肿、炎症反应较轻,胶质增生少,形成的空洞小,数量明显少于rh EPO组和β-SE组,残留的神经元数目较多,形态基本正常,核仁清晰,可见尼氏体,白质内神经纤维排列致密有序。(6)在rh-EPO组、β-SE组、联合治疗组中,bcl-2的表达可见有显著升高,联合治疗组要高于rh-EPO组与β-SE组,组间比较差异有显著性(P0.05)。另外,fas阳性凋亡细胞于损伤组中的表达较高,在脊髓灰、白质中有广泛的分布,相应的在rh-EPO组、β-SE组、联合治疗组的表达则较低,差异有显著性(P0.05)。联合治疗组bcl-2显著高于rh-EPO组、β-SE组,联合治疗组bax、fas显著低于rh EPO组、β-SE组,差异有显著性(P0.05)。(7)损伤组、β-SE组、rh EPO组脊髓组织切片中均可见到深蓝色至蓝紫色凋亡细胞分布。损伤组中见大量凋亡细胞,β-SE组、rh EPO组组次多。联合组未见凋亡细胞分布。(8)损伤组、β-SE组、rh EPO组中凋亡细胞率明显高于联合组,损伤组与β-SE组、rh EPO组、联合组各组间比较,P值均0.05,差别有统计学意义;β-SE组与rh EPO组间比较,P㧐0.05,差别无统计学意义。结论重组人红细胞生成素与β-七叶皂甙钠联合治疗:(1)有助于改善BBB运动功能评分,促进大鼠运动功能恢复。(2)可以阻止局部Ca~(2+)集聚致超载引起SCI对神经细胞继发性损伤,阻止Mg2浓度下降,有效改善局部Ca~(2+)超载以及能量代谢状态,延缓神经细胞继发性损伤的发展。(3)能改善大鼠脊髓损伤组织的病理改变,减轻脊髓神经细胞凋亡,可以减轻继发性脊髓损伤。
【学位授予单位】：锦州医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R651.2
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8 郑颖t，
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