成纤维细胞生长因子抑制长链非编码RNA Malat1的表达及对软骨细胞增殖的影响

发布时间：2019-11-26 13:13

【摘要】：目的探讨在软骨细胞模型中成纤维细胞生长因子通路对长链非编码RNA(long noncoding RNA,LncRNA)Malat1的调控作用。方法采用Ⅰ型成纤维细胞生长因子受体(fibroblast growth factor receptor 1,Fgfr1)组织特异性敲除小鼠和Ⅲ型成纤维细胞生长因子受体(fibroblast growth factor receptor 3,Fgfr3)敲除小鼠的原代软骨,以及利用软骨细胞系培养充当软骨细胞模型,成纤维细胞生长因子2(fibroblast growth factor 2,FGF2)及下游细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK)通路阻断剂U0126处理细胞,利用荧光定量PCR检测Malat1的表达变化。在ATDC5细胞模型中通过siRNA转染干扰Malat1或Fgfr1,质粒转染过表达Fgfr1,利用荧光定量PCR检测Malat1的表达,细胞计数检测细胞增殖变化。结果 Malat1被干扰24、36、48、60 h后,ATDC5细胞增殖速度显著减慢(P0.05),FGF2处理ATDC5细胞24 h后Malat1表达显著下降(P0.05),且ERK通路抑制剂U0126处理细胞后FGF2对Malat1的抑制作用消失。Fgfr1条件性敲除或si-Fgfr1干扰后Malat1表达显著升高(P0.05),且FGF2对Malat1的抑制作用消失,Fgfr1在ATDC5细胞中过表达后Malat1表达与对照组相比显著降低(P0.05)。结论软骨细胞中FGF2可能通过Fgfr1激活下游ERK通路,抑制了Malat1的表达,从而影响软骨细胞增殖。
【图文】：

窍赴銃?C28I2以及人骨肉瘤细胞系SW1353均在传代后48h收取，小鼠原代细胞于分离接种后72h收龋以NIH3T3细胞中Malat1的表达水平作为参照，结果表明，Malat1在小鼠原代软骨细胞、小鼠软骨前体细胞系ATDC5、人正常软骨细胞系C28I2以及人骨肉瘤细胞系SW1353中均呈高丰度表达。以SW1353细胞中的表达丰度最高，其余几种细胞中Malat1的表达丰度与NIH3T3中Malat1的表达丰度基本相等(图1)。4.03.53.02.52.01.51.00.50Malat，

本文编号：2566161