【摘要】：目的:研究促红细胞生成素(EPO)对心脏移植后心肌损伤的影响及其与PKC通路的关系研究。方法:通过同系大鼠心脏移植来建立心肌缺血再灌注损伤模型,实验分为两批(5天、10天),每批将SD雄性成年大鼠分成5组:假手术组(A组);单纯心脏移植空白对照组(B组);心脏移植+EPO治疗组(C组);心脏移植+EPO治疗+PKC抑制剂组(D组);心脏移植+EPO+PKC激动剂组(E组)。第一批术后第5天,第二批术后第10天处死各组大鼠,各组标本进行HE染色,观察组织细胞结构损害及细胞浸润程度,采用免疫组织化学法检测各组心肌组织中EGFR蛋白表达水平,蛋白免疫印迹杂交法(Western Blot)检测磷酸化PKC及PLC-γ1,特殊试剂盒检测组织MDA、ATP酶、GSH-Px、钙离子水平。结果:1.HE染色结果:A组心肌结构完整,排列紧密,无异常改变;B组,5天时的心肌结构排列疏松、炎细胞浸润明显、组织有出血,10天时的心肌细胞结构更加紊乱疏松、炎症浸润程度显著、组织出血更明显,有明显结构破坏;C组,5天时有少量炎症细胞浸润、结构尚完整、有少量组织出血,10天时心肌组织基本趋于正常、结构紧密、无显著细胞浸润;D组,5天时心肌结构尚完整、细胞间隙稍增大、有明显组织出血,10天时心肌结构明显疏松紊乱、大量炎症细胞浸润;E组,5天时心肌组织有少量炎症细胞浸润、结构尚完整,10天时心肌组织结构完整紧密,无显著炎症细胞浸润;2.心肌组织MDA水平:(1)5天各组中,A组明显低于B、C、D、E组(P0.05);B组高于C、D、E组(P0.05);C组低于D组(P0.05),高于E组(P0.05);(2)10天各组中,A组低于B、D组(P0.05),A、C、E组三组间比较无明显统计学差异(P0.05);C、E组低于B组(P0.05),B、D组间无明显统计学差异(P0.05);5天与10天各个对应组,除A组无明显差异外,其余各组比较均差异明显,有统计学意义(P㩳0.05),并且均为10天各组结果低于5天各组;3.各组GSH-Px结果比较:5天时,A组高于B组(P㩳0.05),低于C、D、E组(P㩳0.05);B组低于C、D、E组(P㩳0.05);C组高于D但是低于E组(P㩳0.05);10天各组中,各组GSH-Px表达水平变化和5天各组相似;5天与10天相对应各组比较,除假手术组无明显差异外,其余各组差异明显,有统计学意义(P㩳0.05);4.各组ATP酶变化:两批结果类似,其中A组低于C、E组(P0.05),但是高于B组(P0.05),A、D组之间差异无统计学意义(P0.05);其中C组高于D组,但是低于E组,具有统计学差异(P0.05);5.免疫组化EGFR表达水平比较:5天与10天结果相似,A组低于B、C、D、E组,差异具有统计学意义(P0.05);B组低于C、D、E组(P0.05);C、D、E组相互比较,差异无统计学意义(P0.05);其中5天与10天相应组比较,除假手术组及单纯移植组无明显差异外,其余各组均具有统计学差异(P0.05);6.Western Blot比较PLC-γ1表达差异:5天与10天结果相似,A组低于B、C、D、E组(P0.05);B组低于C、D、E组(P0.05);C、D、E组相互比较,差异无统计学意义(P0.05);5天和10天各个对应组比较,除假手术组无差异外,其余均有统计学差异(P0.05);7.心肌组织磷酸化PKC表达水平比较:(1)5天各组中,A组低于C、E组(P0.05),高于B组(P0.05),与D组相比无明显差异(P0.05);C组高于D组(P0.05),而低于E组(P0.05);(2)10天各组中,A组低于C、E组(P0.05),高于D组(P0.05),与B组比较,无统计学差异(P0.05);B组低于C、E组(P0.05),与D组相比,无统计学差异(P0.05);C组高于D组(P0.05),但是低于E组(P0.05);8.心肌组织钙离子测定结果:各组间结果相互比较,无明显统计学差异(P0.05)。结论:EPO对于心脏移植术后心肌缺血再灌注损伤具有明显的保护效应,PKC通路可能参与了EPO对心肌保护的调控,激活PKC通路有助于保护作用的发挥。
【学位授予单位】：遵义医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R654.2
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本文编号：2568385
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