端粒酶逆转录酶对缺血再灌注诱导的心肌细胞凋亡的影响

发布时间：2020-01-19 20:19

【摘要】：目的:探讨端粒酶逆转录酶对缺血再灌注诱导的心肌细胞凋亡的影响。方法:利用腺病毒将端粒酶催化亚基转染至鼠心肌细胞,利用慢病毒介导小干扰核糖核酸(siRNA)沉默心肌细胞TERT基因,用7-ADD/Annexin V-APC双染,流式细胞仪检测细胞凋亡,ELASA检测端粒酶的活性,REAL-TIME PCR检测原心肌细胞TERT、CytC、p21的miRNA表达,Western Blot检测转染后心肌细胞TERT、CytC、p21蛋白表达的变化。结果:TERT基因和P21基因的表达在TERT过表达组最高,TERT沉默表达组最低,而CytC基因的表达在TERT过表达组最低,TERT沉默表达组最高。同时TERT过表达组心肌细胞的凋亡率明显低于TERT沉默表达组心肌细胞,而正常大鼠心肌细胞组心肌细胞的凋亡率介于两者之间。结论:TERT能增强心肌细胞端粒酶活性,外源性TERT的转染可促进心肌细胞TERT的表达,并增强端粒酶活性,抑制缺血再灌注诱导的心肌细胞凋亡,其机制可能与对p21及CytC基因表达的调控有关。
【图文】：

图 1 REAL-TIME PCR 检测原心肌细胞 TERT、CytC、p21 基因的表达。I/R 组和 control 组比较*p<0.05。2.2 慢病毒的转染通过 Western Blot 方法检测转染后心肌细胞 TERT、CytC、p21 蛋白表达的变化，，实验结果如图 2-5，TERT 和 P21 蛋白的表达在 A 组最高，而 D

CR 检测原心肌细胞 TERT、CytC、p21 基因的表达。I/R 组和 c转染stern Blot 方法检测转染后心肌细胞 TERT、验结果如图 2-5，TERT 和 P21 蛋白的表达在21 的表达明显低于其余各组，差异有统计学达在 D 组最高，而在 A 组最低，差异均有统计E 三组之间 TERT、CytC、P21 的表达均无显毒通过转染可有效改变心肌细胞 TERT 的 表达的变化也同样会影响 P21 及 CytC 的表
【学位授予单位】：桂林医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R654.2

【参考文献】

相关期刊论文 前10条

1 马庆荣;章海波;颜艳飞;李智佳;李少萍;陈凯;荣健;;心脏体外循环手术前后HMGB_1、CK、CK-MB、LDH、LD_1、AST水平变化的研究[J];广州医药;2015年04期

2 刘琳琳;邓为民;;人端粒酶反转录酶转染大鼠许旺细胞的生物学特性[J];中国组织工程研究;2015年14期

3 殷明;乔世刚;曹建方;谢红;王琛;;线粒体通透性转换孔介导的胀亡和凋亡对七氟醚后处理保护大鼠心肌缺血再灌注的作用[J];中华老年心脑血管病杂志;2015年02期

4 崔振田;魏万林;姚建民;赵向东;;芪参益气滴丸对缺血性心肌细胞保护的研究进展[J];临床军医杂志;2015年01期

5 梁艳丽;唐敏;徐聪敏;;ERK1/2信号通路介导丙泊酚对H_2O_2诱发的心肌细胞损伤保护作用[J];药学研究;2014年05期

6 潘晓青;魏瑾;林琳;张明;单虎;闫蕊;贺乐;;低硒大鼠心肌线粒体CytC含量的动态变化及其在心肌细胞凋亡中的作用[J];西安交通大学学报(医学版);2013年02期

7 陈珊珊;金红芳;杜军保;;磷脂酰肌醇3激酶/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶信号通路对异丙肾上腺素所致大鼠心肌损伤的作用[J];实用儿科临床杂志;2012年07期

8 吴兰芳;杨爱珍;刘和;王有年;;线粒体调控细胞凋亡的研究进展[J];中国农学通报;2010年08期

9 ;Cardioprotective effects of anesthetic preconditioning in rats with ischemia-reperfusion injury: propofol versus isoflurane[J];Journal of Zhejiang University(Science B:An International Biomedicine，Biochemistry & Biotechnology Journal);2009年10期

10 ;EGCG inhibits cardiomyocyte apoptosis in pressure overload-induced cardiac hypertrophy and protects cardiomyocytes from oxidative stress in rats[J];Acta Pharmacologica Sinica;2007年02期

本文编号：2571203