神经干细胞球移植联合脑深部电刺激治疗帕金森模型小鼠的实验研究
发布时间：2020-03-23 17:14
【摘要】：研究背景与目的帕金森病是一种比较常见的以神经退行性病变为病理基础,以大脑黑质多巴胺能神经元进行性丢失为特点的中枢神经系统疾病。由于神经干细胞具有修复神经系统损伤的可能性,干细胞移植已成为治疗神经退行性疾病的一种很有前途的策略。但是,干细胞移植面临着移植后干细胞不正常分化和存活率较低的两大难题。研究发现干细胞的存活和分化与干细胞的微环境密切相关。悬浮培养的神经干细胞能够部分自我分化,并形成包含干细胞、胶质细胞以及神经元细胞的细胞球,这些部分分化的细胞能够预先形成干细胞微环境。因此,以神经球替代单个细胞进行细胞移植可能具有更好的效果。另外,帕金森病治疗的一个关键技术就是脑深部电刺激治疗,有研究发现电刺激能够促进神经的再生。目前,脑深部电刺激对于小鼠帕金森模型神经发生的研究尚无报告。因此,通过本次实验,希望能够实现以下目的:系统的研究神经干细胞球在体外生长和分化以及其内部超微结构特点,并比较单个神经干细胞和神经球移植治疗效果的不同及其可能的影响因素;设计出简单实用的小鼠脑深部电刺激电极;探索神经干细胞移植联合脑深部电刺激治疗帕金森病的可能;最终,寻找一种能够提高干细胞移植后细胞存活和治疗效果的方法。研究方法1.神经干细胞源自孕14-15天的转基因C57/JeGFP小鼠。通过Western blot技术、细胞流式分析、透射电镜技术、免疫荧光技术、细胞划痕实验和细胞耐氧化损伤实验等方法研究神经干细胞球体外培养时生长特点,并通过动物实验比较移植后单个细胞和神经球对小鼠帕金森病模型的治疗作用。2.使用带有绝缘涂层的铜丝和导电滑环设计出针对小鼠的可持续通电的电刺激装置,并观察电刺激对小鼠活动的影响,以及持续电刺激对神经发生的影响。3.结合神经干细胞移植以及电刺激技术,进一步探索干细胞移植联合脑深部电刺激技术对小鼠帕金森病模型治疗作用。结果1.神经干细胞体外培养过程中形成的神经干细胞球其内部细胞能够部分分化成成熟的神经元,并形成缝隙连接、桥粒连接和突触联系。2.神经球相较于单个细胞移植能使移植的细胞更好的存活并对小鼠帕金森模型起到好的治疗作用。3.使用漆包超细铜丝和导电滑环设计出了小鼠专用的脑深部电刺激电极。更重要是,通过对安装电极的10只小鼠连续10天的电刺激观察,没有发现电极部位感染或者电极松动的情况。4.神经干细胞球联合脑深部电刺激技术能够起到对帕金森病小鼠更好的治疗效果。结论1.神经球内的细胞在体外培养过程中已经有部分分化并形成细胞间连接,形成的类似干细胞微环境利于移植后干细胞的存活。2.我们设计的脑深部电刺激电极简单易行,可用于小鼠的持续电刺激。3.干细胞移植联合脑深部电刺激能够对帕金森病小鼠起到更好的治疗效果。
【图文】：
功能得到有效改善，，短期随访结果令人满意，并很快在临床得到推广。但长期随逡逑访结果却显示，半月板全切除术后可引起长期膝关节功能不全，远期并发膝关节逡逑退变、骨关节炎［４］（图１－１）。逡逑ＵRG１逡逑半月板切除逦骨关节炎逦关节置换逡逑图１－１半月板切除术后继发骨关节炎模式图逡逑７逡逑
３％透明质酸逡逑＿糖蛋白口应蛋白逡逑图１－４半月板细胞外基质的组成成分逡逑从微观空间结构观察：半月板的空间结构是由特殊的胶原纤维排列维持的，逡逑主要是由沿着其半圆形结构的环形纤维和间隔排列的辐射状纤维维持（图１－５）。逡逑“取向”性的胶原纤维排列和半月板的生物力学性能密切相关。因此重建空间仿生逡逑结构的半月板的再生极其关键。逡逑酬面射棚}卞义匣沸谓涸ㄗ聪宋义稀懊ㄏ宋卞危卞危插危冲义贤迹保蛋朐掳逑宋帕懈磐煎义希保砻妫玻“宀悖常醒胫魈宀沐义习朐掳逋夤坌翁厥猓笮 ⒊叨染绿澹晃⒐圩槌沙煞指丛樱鞒煞种义霞浞⒒酉嗷シ蠢『透悍蠢∩δ芎托畔⒋迹欢捞氐奈⒐劭占浣峁贡Ｖち肆ρу义显睾珊痛荩ㄍ迹保叮Ｒ虼耍恿俅惨窖У慕嵌确治觯嘶指凑５南ス亟诠﹀义夏埽匦敕律０朐掳宓耐庑巍⑽⒐圩槌沙煞旨捌湮⒐劭占浣峁梗菇ò朐掳邋义咸娲锘蜃橹こ贪朐掳濉ｅ义希保板义
本文编号：2597023
【图文】：
功能得到有效改善，，短期随访结果令人满意，并很快在临床得到推广。但长期随逡逑访结果却显示，半月板全切除术后可引起长期膝关节功能不全，远期并发膝关节逡逑退变、骨关节炎［４］（图１－１）。逡逑ＵRG１逡逑半月板切除逦骨关节炎逦关节置换逡逑图１－１半月板切除术后继发骨关节炎模式图逡逑７逡逑
３％透明质酸逡逑＿糖蛋白口应蛋白逡逑图１－４半月板细胞外基质的组成成分逡逑从微观空间结构观察：半月板的空间结构是由特殊的胶原纤维排列维持的，逡逑主要是由沿着其半圆形结构的环形纤维和间隔排列的辐射状纤维维持（图１－５）。逡逑“取向”性的胶原纤维排列和半月板的生物力学性能密切相关。因此重建空间仿生逡逑结构的半月板的再生极其关键。逡逑酬面射棚}卞义匣沸谓涸ㄗ聪宋义稀懊ㄏ宋卞危卞危插危冲义贤迹保蛋朐掳逑宋帕懈磐煎义希保砻妫玻“宀悖常醒胫魈宀沐义习朐掳逋夤坌翁厥猓笮 ⒊叨染绿澹晃⒐圩槌沙煞指丛樱鞒煞种义霞浞⒒酉嗷シ蠢『透悍蠢∩δ芎托畔⒋迹欢捞氐奈⒐劭占浣峁贡Ｖち肆ρу义显睾珊痛荩ㄍ迹保叮Ｒ虼耍恿俅惨窖У慕嵌确治觯嘶指凑５南ス亟诠﹀义夏埽匦敕律０朐掳宓耐庑巍⑽⒐圩槌沙煞旨捌湮⒐劭占浣峁梗菇ò朐掳邋义咸娲锘蜃橹こ贪朐掳濉ｅ义希保板义
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