大鼠脊髓损伤后TSP1与NL1表达变化的实验研究

发布时间：2020-03-30 21:19

【摘要】：目的探究大鼠脊髓损伤后TSP1与NL1的表达变化及其对突触再生的影响。方法90只SPF级成年健康雌性SD大鼠随机等分为假手术组(n=45)和实验组(n=45),再分别将两组大鼠随机等分为3d、7d、14d、21d和28d 5个亚组,假手术组仅行第九胸椎~第十一胸椎(T_9~T_(11))椎板切除术,实验组在行T_9~T_(11)椎板切除术后,用Allen打击仪打击T_(10)脊髓。于术后相应时间点依照BBB评分方法评估实验组和假手术组大鼠后肢运动功能并进行比较,对造模失败的予以剔除并及时补缺;Golgi-Cox染色观察损伤中心上端脊髓白质中树突及树突棘的变化;免疫荧光染色及Western blot蛋白免疫印迹检测TSP1与NL1在大鼠脊髓损伤后3d、7d、14d、21d及28d时的表达,并对荧光染色结果和Western blot结果用ImageJ 1.50i图像分析软件和Graphpad Prism 6软件进行处理,分别测量和分析平均光密度值和相对灰度值。结果1.实验组大鼠各时间点BBB评分结果均低于假手术组(n=6,P0.001)。2.与假手术组相比,实验组脊髓白质中树突在损伤后随时间而逐渐减少,树突棘密度也逐渐降低(n=6,P0.001)。3.免疫荧光染色及平均光密度值分析结果显示,与假手术组相比,脊髓损伤后3天TSP1表达既开始升高,后继续升高,至14天时有所降低,21d时又升高,28d时又降低;与假手术组相比,NL1免疫荧光染色及平均光密度值分析结果显示,与假手术组相比,损伤3d后NL1表达开始升高,7d后继续升高,至损伤后14d时达到峰值,21d后NL1表达开始降低,至损伤后28天时已降低至接近假手术组。4.Western blot结果及相对灰度值分析结果与免疫荧光染色及平均光密度值分析结果基本一致,即TSP1于脊髓损伤后3d表达开始升高,7d时继续升高,14d时表达有所下降,但21d时表达又升高,28d时又降低;NL1表达于损伤后3d开始升高,至损伤14d时达到峰值,后开始下降。结论TSP1和NL1的表达在脊髓损伤后28d内自发性升高,但还不足以诱导突触再生。
【图文】：

士学位论文 大鼠脊髓损伤后 TSP1 与 NL1 表达变化的实验表 1 各组大鼠 BBB 评分结果假手术组 n=6 实验组 n=6 x±s x±s20.333±0.471 0.667±0.74520.833±0.373 2.677±0.74521.000±0.000 6.167±0.68721.000±0.000 9.000±0.70721.000±0.000 12.333±0.849

假手术组及实验各组Golgi-Cox染色（树突）
【学位授予单位】：兰州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R651.2

【参考文献】

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1 Yi-Min Yuan;Cheng He;;The glial scar in spinal cord injury and repair[J];Neuroscience Bulletin;2013年04期

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本文编号：2608079