体外钛合金表面金黄色葡菌球菌生物膜的演变及聚维酮碘的抗菌实验研究

发布时间：2020-05-22 07:07

【摘要】：目的:(1)通过激光共聚焦显微镜(Confocal Laser Scanning Microscopy,CLSM)及扫描电镜下(Scanning Electron Microscopy,SEM)观察1个月内4个不同时间点,钛合金表面金黄色葡萄球菌(Staphylococus aureus,S.aureus)细菌生物膜(Bacterial Biofilm,BBF)形态结构并进行观察分析。(2)评估0.5%聚维酮碘(Povidone Iodine,PVP-I)对1个月内4个不同时间段钛合金表面金黄色葡萄球菌细菌生物膜的抗菌活性。(3)为临床内置物相关感染的认识及治疗方案提供参考。方法:(1)在临床钛合金材料表面建立1周、2周、3周、4周4个不同时间段的金黄色葡萄球菌细菌生物膜,使用CLSM及SEM对4个不同时间段的BBF的形态结构进行观察分析。(2)在临床钛合金材料表面建立1周、2周、3周、4周4个不同时间段的金黄色葡萄球菌细菌生物膜,每个时间段分3组,一组PBS处理,另两组分别用0.5%PVP-I进行浸泡作用5min和10min,并用活菌计数法了解培养不同时间的金黄色葡萄球菌细菌生物膜内细菌的抗菌活性。结果:(1)随着培养时间的延长金黄色葡萄球菌细菌生物膜胞外多聚物不断集聚,层数增多,细菌生物膜空间结构变成熟,到第3周时变化明显,到第4周时细菌生物膜达到成熟稳定。(2)0.5%PVP-I对BBF中的细菌有很好的杀菌作用,5min组较PBS组和10min组较PBS组差异均有统计学意义(P0.05),但随着细菌生物膜培养时间的延长,PVP-I作用减弱,但PVP-I浸泡时间延长后杀菌效果更显著,10min组较5min组效果好(P0.05),然而PVP-I无法完全杀灭BBF中的细菌。结论:(1)细菌生物膜的成熟是细菌细胞膜内部和外部的成熟,随着培养时间的延长多聚物增加,形成一定空间结构,最后细菌及其分泌的胞外多聚物共同组成成熟稳定的微环境,也就是成熟的细菌生物膜。(2)年轻的细菌生物膜及成熟的细菌生物膜以3周为界,主要区别在于胞外多聚物分泌的成熟,细菌及胞外多聚物整体微环境的成熟稳定。(3)对于早期细菌生物膜,0.5%PVP-I作用10min较作用5min效果好,而成熟的生物膜延长作用无意义。(4)建议早期临床内置物相关的感染,时间在3周之内的0.5%PVP-I浸泡10min效果更佳。(5)采用不同染色剂组合观察细菌生物膜演变是一种可靠有效的方法。
【图文】：

双染色,观察结果,绿色

11图 1 ATCC25923 培养 4 个不同时间段(SYTO9, PI)双染色后 CLSM 观察结果（200x），SYTO9 将活菌染成绿色，PI 把死菌染成红色。

双染色,观察结果,生物膜,绿色

12图 2 ATCC25923 培养 4 个不同时间段(FITC-ConA, PI)双染色 CLSM 观察结果（200x），，FITC-ConA 将生物膜染成绿色，PI 把死菌染成红色。
【学位授予单位】：福建医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R687;R318.08

【参考文献】