迷走神经活性调节对脓毒症大鼠肠屏障功能的影响

发布时间：2020-05-31 23:08

【摘要】：目的:研究迷走神经活性变化对脓毒症大鼠血清炎症因子及肠道屏障功能的影响,并探讨其可能机制。方法:60只雄性SD大鼠(224.6±8.5g)随机分为6组(n=10),空白对照组(Control)、脓毒症组(Sepsis)、右美托咪定(Dexmedetomidine,DEX)处理组(S+D)、甲基牛扁亭碱(Methyllycaconitine,MLA)处理组(S+M)、迷走神经电刺激组(S+E)、迷走神经离断组(S+B)。采用盲肠穿刺结扎(Cecal ligation and puncture,CLP)法构建大鼠脓毒症模型,Control组大鼠只游离盲肠,不做结扎穿孔。S+D组大鼠造模成功后沿尾静脉以5ug·kg~(-1)·h~(-1)持续泵入DEX,持续时间为6h;S+M组大鼠于造模成功后腹腔注射MLA 5mg/kg;S+E组大鼠于造模成功后手术暴露左侧颈迷走神经,使用RM-6240多通道生理记录系统给予迷走神经电刺激(电压:5V,波宽:2ms,频率:1Hz),刺激时间持续30min;S+B组大鼠造模成功后手术暴露左侧颈迷走神经,行迷走神经离断术。Control组、Sepsis组、MLA组、S+E组、S+B组均沿尾静脉泵入0.9%生理盐水5ml·kg~(-1)·h~(-1)。各组均于造模后6h时处死大鼠,留取大鼠血清和小肠组织,运用光学显微镜观察小肠组织的病理学变化;运用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组大鼠血清中D-乳酸(D-lactate)、TNF-α、IL-6的水平;运用蛋白印迹法(Western-Blot,WB)方法检测小肠组织紧密连接蛋白(Occludin)和α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7nAChR)的相对表达水平;运用免疫组化检测肠道Occludin和α7nAChR的表达。结果:(1)与Control组比较,Sepsis组大鼠血清D-Lac、TNF-α、IL-6水平显著升高(P0.05),肠道组织Occludin表达下调(P0.05);与Sepsis组相比,S+D组与S+E组大鼠血清D-Lac、TNF-α、IL-6水平降低(P0.05),肠道组织Occludin表达上调(P0.05);与Sepsis组比较,S+M组与S+B组大鼠血清清D-Lac、TNF-α、IL-6水平升高更为明显(P0.05),肠道组织Occludin表达下调(P0.05)。(2)病理学方面,与Control组比较,Sepsis组、S+D组、S+M组、S+E组、S+B组小肠组织损伤明显,其中S+D组与S+E组小肠组织损伤轻于Sepsis组;S+M组与S+B组小肠组织损伤重于Sepsis组。(3)与Control组比较,Sepsis组小肠组织α7nAChR表达下降(P0.05);与Control组比较,S+D组与S+E组小肠组织中α7nAChR表达上调(P0.05);与Sepsis组比较,S+D组与S+E小肠组织中α7nAChR表达上调(P0.05);与Sepsis组比较,S+M组与S+B小肠组织中α7nAChR表达下调(P0.05);S+D组与S+E组小肠组织中α7nAChR表达无明显差异(P0.05);S+M组与S+B组小肠组织中α7nAChR表达无明显差异(P0.05)。结论:迷走神经活性提高对脓毒症大鼠肠道屏障功能有保护作用。右美托咪定可以保护脓毒症大鼠肠道屏障功能,其机制可能与提高迷走神经活性,激活α7nAChR有关。
【图文】：

鼠模型的建立盲肠穿刺结扎（Cecal ligation and puncture，CLP）27]。60 只雄性 SD 大鼠随机分成 6 组（n=10）。大鼠。麻醉选用 20%乌拉坦，剂量为 0.6ml/100g，腹腔沿大鼠尾静脉置入 24G 留置针。腹部备皮，碘伏消 的切口，小心游离肠系膜及回盲部，用 4-0 丝线结头在盲肠结扎远端对穿 3 次，轻轻挤出少许肠内容范围和穿孔规模数量尽量保持相同，以保证大鼠脓小心还纳肠段，应注意避免肠梗阻的发生，逐层以 肤，常规消毒，盐水纱布覆盖。Control 组以同样方部，但不做结扎穿孔，逐层缝合腹膜和皮肤。各组9%生理盐水 1ml 以补充手术中的体液丢失。

般情况比较大鼠术后生命体征平稳，眼角、口鼻无脓性分泌量清亮腹水，肠管形态正常，无黏连、充血。分大鼠术后呼吸急促，个别大鼠口鼻、眼角可见味，有较多浑浊或血性腹水，回盲部充血变黑 组：少数大鼠术后呼吸急促，个别大鼠口鼻、腹后腹腔有轻微恶臭，，可见浑浊或血性腹水，较 Sepsis 组轻。B 组：几乎所有大鼠术后发生呼吸急促，呼吸幅出现脓性分泌物。开腹后腹腔有恶臭味，大量充血严重，其程度较 Sepsis 组更为严重。
【学位授予单位】：皖南医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R614

【参考文献】

相关期刊论文 前9条

1 Meghan Prin;Jan Bakker;Gebhard Wagener;;Hepatosplanchnic circulation in cirrhosis and sepsis[J];World Journal of Gastroenterology;2015年09期

2 Isabel Gómez-Hurtado;José Such;Yolanda Sanz;Rubén Francés;;Gut microbiota-related complications in cirrhosis[J];World Journal of Gastroenterology;2014年42期

3 刘朝晖;苏磊;廖银光;刘志锋;刘俊灵;;脓毒症患者营养目标摄入对临床预后影响的前瞻性随机对照研究[J];中华危重病急救医学;2014年03期

4 杨登文;龙胜勇;葛茂星;;大黄对脓毒症肠黏膜屏障保护作用的研究进展[J];实用医学杂志;2010年05期

5 景友玲;王艳蕾;王小君;张伟;段国贤;张一兵;赵春秀;;黄芪对肠缺血/再灌注时脂质过氧化损伤的防护作用及其机制[J];中国应用生理学杂志;2009年02期

6 张妮;朱保权;张庆立;唐玉英;芦金萍;;危重症患儿血浆D-乳酸水平和二胺氧化酶活性与胃肠功能障碍关系研究[J];临床儿科杂志;2006年10期

7 张嘉,刘瑞林,刘牧林;肠道屏障功能损伤机制的研究进展[J];蚌埠医学院学报;2005年03期

8 乔治,黎沾良,李基业,陆连荣,黎君友;应用血浆D-乳酸水平评价腹部外科手术后肠道屏障功能[J];解放军医学杂志;2005年03期

9 姚咏明;盛志勇;吴叶;于燕;陆连荣;;大鼠急性肠缺血后血浆D-乳酸的变化及其与肠粘膜损害的关系[J];中华整形烧伤外科杂志;1998年04期

本文编号：2690601