黄芪甲苷通过SIRT1/PGC-1α通路促进退变的髓核细胞增殖

发布时间：2020-12-06 17:13

　　目的探究黄芪甲苷对退变髓核细胞功能的影响及其作用机制。方法原代培养正常与退变髓核细胞并观察,免疫组化检测细胞中胶原蛋白Ⅱ（collagenⅡ）的表达;分别采用20、40、60、80μg/mL的黄芪甲苷处理细胞,通过CCK-8和MTT试剂盒检测细胞活力和增殖,流式细胞术检测细胞凋亡情况;Western blotting检测凋亡相关基因Bcl-2、Bax和沉默信息调节因子2同源蛋白1（SIRT1）、过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅助激活因子-1（PGC-1α）的表达及其乙酰化和磷酸化水平;比色法检测丙二醛（MDA）、超氧化物岐化酶（SOD）、β-galactosidase和三磷酸腺苷（ATP）的含量。结果与正常髓核细胞相比,退变髓核组织中坏死细胞更多,且collagenⅡ表达降低;细胞经不同浓度黄芪甲苷处理后,40μg/mL黄芪甲苷不仅能显著提高退变髓核细胞活力,促进细胞增殖并抑制其凋亡,而且能上调细胞中SIRT1、PGC-1α的蛋白表达和PGC-1α磷酸化水平,下调PGC-1α乙酰化水平,增加SOD和ATP含量,降低MDA和β-galactosidase含量。结论黄芪甲苷可能通过激活SIR... 

【文章来源】：西安交通大学学报(医学版). 2016年05期 第743-747页 北大核心

【文章页数】：5 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 研究对象
    1.2 方法
        1.2.1 髓核细胞的原代细胞筛选及培养
        1.2.2 免疫细胞化学法检测髓核细胞内collagenⅡ的表达
        1.2.3 CCK-8试剂盒检测髓核细胞活力
        1.2.4 MMT法测定髓核细胞的增殖能力
        1.2.5 流式细胞术检测细胞凋亡
        1.2.6 丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、三磷酸腺苷（ATP）、β-糖苷酶（β-galactosidase）活性的测定
        1.2.7 Real-time PCR检测基因mRNA表达
        1.2.8 Western blotting检测蛋白及其乙酰化、磷酸化水平
    1.3 统计学分析
2 结果
    2.1 人椎间盘正常髓核细胞和退变髓核细胞的形态及collagenⅡ的表达
    2.2 低浓度黄芪甲苷能提高退变髓核细胞的活力
    2.3 黄芪甲苷促进退变髓核细胞增殖和抑制细胞凋亡
    2.4 黄芪甲苷对退变髓核细胞中氧化反应相关基因表达的影响
    2.5 黄芪甲苷对退变髓核细胞中SIRT1/PGC-1α信号通路的影响
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]SIRT1在炎症反应和细胞衰老的研究进展[J]. 周正颐.  大家健康(学术版). 2015(10)
[2]PGC-1α的转录调节和翻译后修饰[J]. 闫春雷,黄欣,苏乐群.  中国生物化学与分子生物学报. 2015(01)
[3]黄芪多糖诱导成熟的树突状细胞肿瘤疫苗体外抗肿瘤作用的实验研究[J]. 荆雪宁,邱波,王金凤,武永刚,武继彪,陈丹丹.  中国中西医结合杂志. 2014(09)
[4]沉默信息调节因子2同源蛋白1与软骨细胞[J]. 胡斌,徐宏光,宋俊兴.  国际骨科学杂志. 2012(04)
[5]中药血清对大鼠bMSCs体外成软骨分化中Col2a1和Acan表达的影响[J]. 钱晓伟,潘丹岷,谭湘陵,张爱国,蔡建平.  时珍国医国药. 2012(02)
[6]黄芪甲苷对关节软骨细胞功能影响的实验研究[J]. 刘维统,王跃,郝鹏,吕波,董巍.  实用医院临床杂志. 2009(04)



本文编号：2901741