绿色荧光蛋白标记结合SEM/EDS技术观测兔BMSCs体外矿化的研究

发布时间：2020-12-15 06:22

　　目的:观察绿色荧光蛋白（GFP）标记的兔骨髓间充质干细胞（BMSCs）成骨诱导后形态学改变及体外成骨中矿化钙结节的形成,并结合扫描电镜和X射线能谱分析（SEM/EDS）技术对矿化钙结节进行微观形貌观察和定量能谱分析,并对GFP标记的兔BMSCs复合脱钙骨（DBM）支架体外构建组织工程骨表面进行微观形貌和生物矿化进行观测。方法:用携带GFP基因的腺病毒（Ad-GFP）转染兔BMSCs进行示踪标记,并诱导细胞向成骨方向分化,通过倒置荧光显微镜、钙结节茜素红染色观察成骨诱导后细胞形态改变和矿化钙结节的形成,结合SEM/EDS技术观测矿化钙结节的表面微观结构及其元素构成。用GFP标记的BMSCs与DBM复合经成骨诱导后,通过倒置荧光显微镜对细胞生长情况进行即时观察,结合SEM/EDS技术观测组织工程骨的表面微观形貌和生物矿化。结果:Ad-GFP转染兔BMSCs后在荧光显微镜下观察到绿色荧光,经成骨诱导后细胞形态向成骨方向分化,并形成不透光的矿化钙结节,钙结节茜素红染色见红色矿化结节,电镜下见矿化钙结节散布于细胞中,细胞重叠生长,分泌基质旺盛。X射线能谱分析显示矿化钙结节主要组成元素与正常骨组织... 

【文章来源】：桂林医学院广西壮族自治区

【文章页数】：59 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
ABSTRACT
英汉缩略词对照表
前言
1 材料与方法
    1.1 实验材料
    1.2 主要实验试剂
    1.3 主要实验耗材
    1.4 主要实验仪器
    1.5 实验方法
2 结果
    2.1 复苏及传代后兔BMSCs形态学观察
    2.2 兔BMSCs的GFP标记及成骨诱导后兔BMSCs形态学观察
    2.3 矿化钙结节的镜下观察和茜素红染色
    2.4 矿化钙结节的电镜扫描观察和X线能谱分析
    2.5 组织工程骨在倒置荧光显微镜下的观察
    2.6 DBM和组织工程骨的电镜扫描观察和X线能谱分析
3 讨论
    3.1 BMSCs的GFP标记
    3.2 BMSCs的成骨诱导
    3.3 BMSCs的体外矿质化
    3.4 DBM的生物特性
    3.5 SEM/EDS技术在组织工程骨生物矿化研究中的初步应用
4 结论
参考文献
综述 组织工程骨构建的研究现状及进展
    参考文献
攻读学位期间发表的学术论文目录
致谢



本文编号：2917810