大鼠脊髓损伤后激活Wnt/β-catenin信号通路对星形胶质细胞凋亡作用的研究

发布时间：2020-12-19 10:06

　　目的通过建立SD大鼠SCI模型和神经胶质细胞应激模型,研究大鼠脊髓损伤后β-catenin、SIRT1和细胞凋亡表达变化,了解大鼠脊髓损伤后β-catenin与SIRT1信号通路在调节细胞凋亡的作用。方法动物实验:成年雄性SD大鼠90只、体重210g±10g、由锦州医科大学动物中心提供。随机选择分为五组,分别为假手术组（仅做椎板切除术）和损伤后3、7、14和28d组,每组18只。10%水合氯醛腹腔麻醉,在大鼠T₉-T₁₀椎体的部位实施背侧正中切口,切口的长度为3cm。采用改良的Allen’s打击器,在T₁₀脊髓节段制作SCI模型,术后3、7、14、28d取材,制备冰冻切片行HE染色、尼氏染色和免疫荧光染色（n=6）,BBB评分（n=6）和Western blot（n=6）方法对脊髓组织中的β-catenin、SIRT1和Caspese-3蛋白表达进行半定量检测。细胞实验:原代星形胶质细胞培养两周,随机分为四组,分别是对照组、处理组、治疗对照组和治疗组,用Western blot和免疫荧光方法对细胞组织中的β-cateni... 

【文章来源】：锦州医科大学辽宁省

【文章页数】：45 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

大鼠SCI模型制作

拟行 HE 染色测脊髓空洞率，尼氏染色，免疫组织学检测灌流组织从蔗糖溶液取出，1×PBS 清洗，切取距离损伤处上下 5mm 的脊T 包埋剂室温下包埋适当大小组织，切片机温度调为-20℃，将组织放在，静置半小时，包埋剂凝固，切片机刀片调好位置，连续切片，切片厚um，弃掉残碎组织，每张载玻片放 4 个组织切片，切片室温静置 2h,放置-。

β-catenin 阳性表达位于脊髓灰质神经元细胞质和细胞核(图 9)，对照组可见 -catenin 少量表达， 急性脊髓损伤 3d 后β-catenin 阳性表达神经元数量开始增加，7d 时阳性表达神经元最多，随后表达有所下降（P<0.05）；SIRT1 阳性表达在 SCI 后 3 天后逐渐增加，28d 表达量最高（P<0.05）（图 10）。2、细胞实验LiCL 治疗组与处理组对比，蛋白β-catenin 表达水平明显增高（P<0.05）；而蛋白 SIRT1 表达则是降低（P<0.05）（图 11）。

【参考文献】：
期刊论文
[1]中国创伤性脊髓损伤流行病学和疾病经济负担的系统评价[J]. 陈星月,陈栋,陈春慧,王凯,唐笠,李宇哲,吴爱悯.  中国循证医学杂志. 2018(02)
[2]脊髓损伤的流行病学研究[J]. 唐智生,毛容秋.  广西医科大学学报. 2011(05)



本文编号：2925716