血清微小RNA-221-3p在评价患者围术期抑郁情绪中的临床价值

发布时间：2020-12-24 11:14

　　背景与目的较多研究发现血清微小RNA（microRNA,miRNA）在疾病诊断或疗效判断中具有重要的潜在价值。我们的前期研究发现严重抑郁症患者脑脊液和血清中miRNA-221-3p（miR-221-3P）相对含量均明显高于正常个体,可作为临床抑郁症患者血清中的生物学标志。但到目前为止,血清中miR-221-3P含量升高多少对辅助判断围术期抑郁情绪有意义并不清楚。因此,本实验拟首先测定围术期不同抑郁情绪状态的患者血清miR-221-3P相对含量。在此基础上,通过构建miR-221-3p的标准品,检测无抑郁个体、抑郁情绪患者血清中miR-221-3p的绝对含量,最后对血清miRNA-221-3p含量与患者抑郁情绪行相关性分析。通过此研究,希望进一步明确检测血清miR-221-3p含量在辅助判断围术期抑郁情绪中的潜在价值和意义。方法1.收集符合条件的患者围术期血清,行PHQ-9抑郁量表评分,根据评分值分为无抑郁组、轻度抑郁情绪组、中度及以上抑郁情绪组。2.利用实时荧光定量PCR技术测定患者血清miR-221-3p相对含量。3.提取样品血清总RNA,用特异性miRNA-221-3p引物反转录获... 

【文章来源】：西南医科大学四川省

【文章页数】：70 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

含有T7启动子和miRNA-221-3p序列的DNA片段序列

dH2O 8 μl，总反应体积 20 μl。反应条件为：95℃预变性 10 分钟，然后 95℃ 10 秒，60℃ 60 秒共 40 个循环。反应结束后对 Ct 值等结果进分析构建标准曲线。结 果1. miRNA-221-3p 扩增提取人血清样品中的总 RNA，以反转录所得的含有 miR-221-3p 的 DNA片段为模板，通过实时荧光定量 PCR 反应进行扩增（片段序列如图 2，93bp），获得产物用 1.2%琼脂凝胶电泳，结果如图 3 所示，于 100bp 左右获得目的条带。

图 3 miR-221-3p 电泳结果Fig 3.Electrophorogram of miR-221-3p注：Marker：DL2000；1：PCR 扩增产物2. 重组质粒 pcDNA3.1-miRNA-221将含有两个相同酶切位点的纯接重组，并对连接产物进行纯化、中的重组质粒电泳反应后可见明显是否带有目的基因 miRNA-221-3p，分析目的基因片段序列。测序结果

【参考文献】：
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本文编号：2935557