miR-885-5p在骨肉瘤中表达及作用
发布时间：2020-12-24 15:48
背景骨肉瘤（osteosarcoma,OS）是儿童和青少年中最常见的原发性恶性骨肿瘤,常发生于长骨干骺端,其特点是复发率高,预后差。尽管辅助化疗和晚期手术相结合,患者的5年累积生存率仍然不太乐观。微小RNA（micro RNAs,mi RNAs）是一小类内源性非编码RNA,其长度范围从18到25个核苷酸。研究表明mi RNA影响肿瘤微环境并与恶性肿瘤发生发展有着密不可分的关系。目的1.检测mi R-885-5p在骨肉瘤细胞和组织中的表达水平。2.探讨mi R-885-5p在骨肉瘤组织中表达与临床病理参数之间的关系。3.观察mi R-885-5p对骨肉瘤细胞的生物学行为的影响。4.探寻mi R-885-5p的靶基因,阐明其对靶基因的调节机制。方法1.利用实时荧光定量PCR（real-time quantitative PCR,RT-q PCR）技术检测MG63,U2OS人骨肉瘤细胞系和h FOB1.19人正常成骨细胞株中mi R-885-5p表达水平。2.收集福建医科大学附属第一医院2015年9月至2017年8月通过手术切除的骨肉瘤组织以及相应的癌旁组织临床样本共31例。利用RT-q P...
【文章来源】：福建医科大学福建省
【文章页数】：62 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
miR-885-5p在骨肉瘤细胞和正常成骨细胞相对表达水平
组中 miR-885-5p 表达水平显著高于空白组和 NC 组（P <0.001），且miR-885-5p-down 中 miR-885-5p 水平明显下调（P <0.01）， Blank 组和 NC组之间没有差异，U6 作为内参。上述数据表明我们成功将含有 miR-885-5p-up/ down 的慢病毒成功转染 MG-63 细胞，并建立了高表达 miR-885-5p 和低表达miR-885-5p 骨肉瘤细胞，这将为我们进一步深入观察细胞功能学实验提供了基础。
72h 三个时间段的 OD450 吸光度值明显上升（P <0.05），而 miR-885-5p-down组 OD450 吸光度值明显下降（P <0.05）。Blank 组和 NC 组细胞在 OD450 吸光度 值 无 明 显 差 异 。 另 外 ， miR-885-5p-up 组 增 长 速 率 显 著 增 高 ， 而miR-885-5p-down 增长速度呈下降趋势。我们在 2 周后观察各组细胞克隆形成率。结果如图 4B,C 所示，相比较于Blank 组和 NC 组，miR-885-5p-up 组克隆形成率明显增高（P <0.05），而miR-885-5p-down 组克隆形成率明显下降（P <0.05）。上述两个实验结果表明 miR-885-5p 可以促进骨肉瘤细胞的增殖。
【参考文献】：
期刊论文
[1]MicroRNA-26a inhibits osteosarcoma cell proliferation by targeting IGF-1[J]. Xinyu Tan,Shicai Fan,Wen Wu,Yin Zhang. Bone Research. 2015(04)
[2]Effect of MicroR NA-101 on Proliferation and Apoptosis of Human Osteosarcoma Cells by Targeting mTOR[J]. 林松,邵楠楠,范磊,马秀才,浦飞飞,邵增务. Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences). 2014(06)
[3]骨肉瘤miRNA基因的差异性表达[J]. 魏任雄,蔡林,谭金海,牛光峰,胡戈亮,王兵兵. 中华实验外科杂志. 2009 (05)
[4]MicroRNA与癌症的研究进展[J]. 黄伟,孙岩,韩瑞发. 天津医药. 2009(03)
[5]微小RNA在非小细胞肺癌中的应用研究进展[J]. 高雯,束永前. 中华实验外科杂志. 2009 (02)
[6]成骨肉瘤细胞SOSP-9607中miRNA的克隆与验证[J]. 高杰,杨彤涛,裘秀春,鱼兵,韩建伟,范清宇,马保安. 癌症. 2007(06)
本文编号：2935917
【文章来源】：福建医科大学福建省
【文章页数】：62 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
miR-885-5p在骨肉瘤细胞和正常成骨细胞相对表达水平
组中 miR-885-5p 表达水平显著高于空白组和 NC 组（P <0.001），且miR-885-5p-down 中 miR-885-5p 水平明显下调（P <0.01）， Blank 组和 NC组之间没有差异，U6 作为内参。上述数据表明我们成功将含有 miR-885-5p-up/ down 的慢病毒成功转染 MG-63 细胞，并建立了高表达 miR-885-5p 和低表达miR-885-5p 骨肉瘤细胞，这将为我们进一步深入观察细胞功能学实验提供了基础。
72h 三个时间段的 OD450 吸光度值明显上升（P <0.05），而 miR-885-5p-down组 OD450 吸光度值明显下降（P <0.05）。Blank 组和 NC 组细胞在 OD450 吸光度 值 无 明 显 差 异 。 另 外 ， miR-885-5p-up 组 增 长 速 率 显 著 增 高 ， 而miR-885-5p-down 增长速度呈下降趋势。我们在 2 周后观察各组细胞克隆形成率。结果如图 4B,C 所示，相比较于Blank 组和 NC 组，miR-885-5p-up 组克隆形成率明显增高（P <0.05），而miR-885-5p-down 组克隆形成率明显下降（P <0.05）。上述两个实验结果表明 miR-885-5p 可以促进骨肉瘤细胞的增殖。
【参考文献】：
期刊论文
[1]MicroRNA-26a inhibits osteosarcoma cell proliferation by targeting IGF-1[J]. Xinyu Tan,Shicai Fan,Wen Wu,Yin Zhang. Bone Research. 2015(04)
[2]Effect of MicroR NA-101 on Proliferation and Apoptosis of Human Osteosarcoma Cells by Targeting mTOR[J]. 林松,邵楠楠,范磊,马秀才,浦飞飞,邵增务. Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences). 2014(06)
[3]骨肉瘤miRNA基因的差异性表达[J]. 魏任雄,蔡林,谭金海,牛光峰,胡戈亮,王兵兵. 中华实验外科杂志. 2009 (05)
[4]MicroRNA与癌症的研究进展[J]. 黄伟,孙岩,韩瑞发. 天津医药. 2009(03)
[5]微小RNA在非小细胞肺癌中的应用研究进展[J]. 高雯,束永前. 中华实验外科杂志. 2009 (02)
[6]成骨肉瘤细胞SOSP-9607中miRNA的克隆与验证[J]. 高杰,杨彤涛,裘秀春,鱼兵,韩建伟,范清宇,马保安. 癌症. 2007(06)
本文编号：2935917
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