PPAR-γ激动对创伤性脑损伤后白质的保护作用及机制研究

发布时间：2020-12-26 14:55

　　目的研究PPAR-γ激动剂,罗格列酮（rosiglitazone,RGZ）对创伤性脑损伤后白质的保护作用,并探讨其调控小胶质细胞极化进而促进复髓鞘的机制。方法在体实验采用C57BL/6小鼠实施标准的可控性皮质撞击术,建立脑创伤（traumatic brain injury,TBI）模型。TBI后2 h、12 h、24 h和48 h给与不同剂量的RGZ腹腔注射。在脑损伤后1、3、5、7、14、28天用滚轮、平衡木和水迷宫实验（术后30-35天）验证RGZ对小鼠行为学的影响。脑损伤后35天,用尼氏染色和快蓝染色分别观察脑组织体积和胼胝体区髓鞘的变化。采用免疫组织化学荧光标记和实时定量PCR检测M1型小胶质细胞（microglia,MG）和M2型MG极化状态。在损伤后第7和35天用免疫组化荧光标记和western blotting观察髓鞘的修复情况。NG-2/Olig-2与Brdu荧光双标用来观察OPCs增殖分化。在小鼠胼胝体区用慢病毒干扰并下调PPAR-γ三天后,用免疫荧光标记观察MG极化情况,并在蛋白水平上探究组蛋白去乙酰化酶和乙酰化组蛋白H3、H4表达变化。离体实验:1)佛波酯（pho... 

【文章来源】：南通大学江苏省

【文章页数】：75 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

小鼠术后30-35天水迷宫实验

22图 4 造模后 35 天尼氏染色和快蓝染色。(A)不同组别小鼠不同层面的脑切片尼式染色；(B)不同组别小鼠大脑；(C)根据图 A 定量的脑组织缺损体积；(D)不同组别脑组织的快蓝染色；(E)根据 D 图统计的不同组别小鼠 TBI 后胼胝体区的宽度。n= 4 in pergroup, 2 mg/kg vs.TBI+vehicle，*p< 0.05, **p< 0.01。3.3 RGZ 治疗对髓鞘相关蛋白表达的影响根据造模位置和图 4A，选取前囟前 0.5 mm 运用荧光标记和蛋白免疫印迹观察髓鞘相关蛋白，结果进一步验证得出，无论在 TBI 损伤的前期（图5B, C, D, E）还是后期(图 6)，经 RGZ 治疗后，MBP 蛋白（图中绿色标记）表达显著增强，SMI-32 荧光强度明显减弱（图中红色标记 p< 0.05），都极大提高了损伤周边区（图 5A）髓鞘修复和轴突的完整性。

结果进一步验证得出，无论在 TBI 损伤的前期（图5B, C, D, E）还是后期(图 6)，经 RGZ 治疗后，MBP 蛋白（图中绿色标记）表达显著增强，SMI-32 荧光强度明显减弱（图中红色标记 p< 0.05），都极大提高了损伤周边区（图 5A）髓鞘修复和轴突的完整性。

【参考文献】：
期刊论文
[1]Rosiglitazone ameliorates diffuse axonal injury by reducing loss of tau and up-regulating caveolin-1 expression[J]. Yong-lin Zhao,Jin-ning Song,Xu-dong Ma,Bin-fei Zhang,Dan-dong Li,Hong-gang Pang.  Neural Regeneration Research. 2016(06)



本文编号：2939917