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miR-126促进脊髓损伤后内源性神经干细胞增殖和分化

发布时间:2020-12-29 22:00
  目的:从分子、组织、整体水平观察小鼠脊髓损伤(Spinal Cord Injury,SCI)后miR-126对内源性神经干细胞(Endogenous Neural Stem Cells,ENSCs)增殖和分化以及运动功能修复的影响。方法:应用NYU脊髓撞击损伤仪(M-III)(MASCIS Impactor(M-III))制作小鼠胸10(T10)脊髓挫伤模型,分别在损伤后不同时期采用Basso Mouse Scale(BMS)评分对运动功能进行评估;然后,应用苏木精-伊红染色法(Hematoxylin-eosin staining,HE)、尼氏染色(Nissl’s staining)观察损伤部位组织病理学及尼氏体的变化;免疫荧光(Immunofluorescence technic,IF)检测ENSCs的数量变化;免疫组化(Immunohistochemistry,IHC)检测HOXA9表达阳性细胞数;逆转录-聚合酶链反应(Real-Time PCR,RT-PCR)检测miR-126,Nestin,HOXA9表达量,同时蛋白质免疫印迹(Western Blotting,WB)检测相应蛋... 

【文章来源】:山西医科大学山西省

【文章页数】:71 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

miR-126促进脊髓损伤后内源性神经干细胞增殖和分化


对照组与实验组不同时期中枢神经系统整体观对照组脊髓呈瓷白色,圆柱状,硬脊膜完整;实验组1d损伤部位呈现暗紫色斑块,局部肿胀,

比例尺,样本,暗紫色,硬脊膜


对照组 1 d 3 d 7 d 14 d 21 d 28 d图 1-1 对照组与实验组不同时期中枢神经系统整体观对照组脊髓呈瓷白色,圆柱状,硬脊膜完整;实验组 1 d 损伤部位呈现暗紫色斑块,局部肿胀,硬脊膜完整;3-14 d 暗紫色斑块及肿胀逐渐消退;21 d,28 d 损伤部位暗紫色斑块消失,脊髓损伤部位脊髓容量减小,形态呈扁平状,硬脊膜完整。(比例尺=1.0 cm)

脊髓,正中动脉,硬脊膜,椎板


图 1-3 SCI 模型的制作图 A 为去除 T10 椎板后,脊髓呈瓷白色,硬脊膜完整,可见红色脊髓后正中动脉;图 B 为 M-错误!未定义书签。脊髓撞击损伤仪按照设计程序撞击暴露脊髓;图 C 为脊髓撞击后,可见撞击处暗紫色局部隆起包块,硬脊膜完整。(A:脊髓撞击前;B:脊髓撞击中;C:脊髓撞击后。)2.2 实验组与对照组 BMS 评分术前实验组与对照组 BMS 评分均无差异,术后实验组在 1 d,3 d 时运动功能完全丧失;7 d 时运动功能出现恢复迹象;14 d,21 d 恢复较为显著;第 28 d 时趋于平稳,但与 21 d 时相比无统计学意义(表 1-3;图 1-4)。表 1-3 对照组与实验组在不同时期的 BMS 评分(n=6;*P<0.05;**P<0.01)Group 1 d 3 d 7 d 14 d 21 d 28 dControl 9.00 9.00 9.00 9.00 9.00 9.00Experimental 0.00 0.00 2.35±0.51**2.76±0.53**3.45±0.45**3.62±0.56**

【参考文献】:
期刊论文
[1]神经干细胞移植的方法选择及其在脊髓损伤中的应用[J]. 张永涛,王春芳.  中华临床实验室管理电子杂志. 2016(04)
[2]miR-126的研究进展[J]. 韩庆,廖艳丹.  广东医学. 2013(13)
[3]MicroRNAs-126(miR-126)的生物学功能[J]. 杨东,张红.  现代生物医学进展. 2012(14)
[4]miR-126信号在神经干细胞向胆碱能神经元分化过程中的作用[J]. 易松敏,蔚洪恩,邓春圣,李鹏飞,王春芳.  实用骨科杂志. 2011(12)
[5]脊髓损伤机制研究进展[J]. 李俊丽,赵铎.  中国实用神经疾病杂志. 2009(24)
[6]脊髓损伤模型的研究进展[J]. 郭志宝,王伟.  神经损伤与功能重建. 2009(02)

博士论文
[1]神经干细胞与运动神经元的microRNA和蛋白质差异表达及相互作用[D]. 蔚洪恩.第二军医大学 2011



本文编号:2946399

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