Homer 1a在创伤性脑损伤中的机制研究

发布时间：2021-01-21 00:53

　　研究背景创伤性脑损伤（TBI）是致死致残的重要病因之一。在美国每年约有200万人发生TBI,几乎三分之一脑损伤的患者是儿童和青年人群[1,2]。在世界范围内,TBI的发生率还在不断增加,交通事故、人身攻击等是TBI发生的主要原因[3-5],尤其是机动车辆的广泛使用,以及战争环境下的爆炸伤是导致TBI的重要原因[6-8]。创伤性脑损伤的伤情非常复杂,可能会导致不同程度的挫伤、弥漫性轴索损伤、出血、缺氧和神经退行性疾病[9-12],从病理生理学角度上,创伤性脑损伤大致可分为两个阶段即:原发性脑损伤和继发性脑损害[13-16],原发性损伤源于环境中机械外力直接作用于颅骨和脑,瞬间造成脑部神经细胞死亡,属于不可逆的机械损伤[17-19]。而继发性脑损害是指在原发性损伤的基础上,所产生的后续脑组织损伤,可持续少至数小时,多达数天[20-22]。继发性脑损害机制包括一系列过程,如兴奋性神经递质的释放（谷氨酸兴奋毒性）、线粒体功能障碍、神经细胞凋亡、脂质降解、炎性反应、钙超载和自由基损伤等[23-28]。上述机制被证明与细胞早期死亡、程序性细胞死亡以及细胞内部的自噬相关,此过程需要比较长的时间,其中... 

【文章来源】：中国人民解放军空军军医大学陕西省 211工程院校

【文章页数】：122 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
缩略语表
中文摘要
英文摘要
前言
文献回顾
    第一部分 创伤性脑损伤的机制
        1 创伤性脑损伤基础
        2 氧化应激与线粒体功能异常
        3 NMDA受体和TBI
        4 炎性因子和TBI
        5 AMPA受体和TBI
        6 动物行为学和TBI
    第二部分 Homer蛋白在神经系统疾病中的作用
        1 Homer蛋白家族
        2 Homer和应激反应
        3 Homer和神经病理性痛
        4 Homer与癫痫
        5 Homer与阿尔兹海默症
        6 Homer与药物成瘾性
        7 Homer与精神分裂症
    第三部分 质谱在神经系统疾病中的作用
        1 质谱的概念
        2 质谱在神经系统疾病中的应用
        3 质谱的分析
第一部分 TBI后病理变化及蛋白组学研究
    1 材料
        1.1 实验动物
        1.2 实验试剂
        1.3 实验仪器
        1.4 实验试剂
    2 方法
        2.1 在体动物TBI模型的建立
        2.2 动物行为学检测
        2.3 脑水肿程度检测
        2.4 HE染色
        2.5 TUNEL染色
        2.6 蛋白质谱分析
        2.7 统计学分析
    3 结果
        3.1 TBI后神经功能评分
        3.2 TBI后动物行为学变化
        3.3 TBI脑水肿程度检测
        3.4 小鼠TBI后脑片HE染色结果
        3.5 小鼠TBI后对凋亡的影响
        3.6 小鼠TBI后蛋白质谱分析
    4 讨论
        4.1 TBI导致神经损伤
        4.2 TBI后引起神经蛋白组变化
第二部分 Homer1a在TBI中的作用及信号通路调节机制
    1 材料
        1.1 实验动物
        1.2 慢病毒载体
        1.3 实验试剂
        1.4 实验仪器
        1.5 实验试剂
    2 方法
        2.1 在体动物TBI模型的建立（与第一部分方法相同）
        2.2 小鼠神经功能学评分（NSS评分）（与第一部分方法相同）
        2.3 脑水肿程度检测（与第一部分方法相同）
        2.4 Morris水迷宫测试（与第一部分方法相同）
        2.5 高架十字迷宫（与第一部分方法相同）
        2.6 旷场实验（与第一部分方法相同）
        2.7 蛋白提取（与第一部分方法相同）
        2.8 蛋白定量（与第一部分方法相同）
        2.9 TUNEL染色（与第一部分方法相同）
        2.10 总RNA的提取
        2.11 cDNA的合成：RNA反转录
        2.12 荧光实时定量检测表达
        2.13 Western blot检测
        2.14 免疫组织化学
        2.15 免疫荧光法
        2.16 皮层内注射慢病毒转染
        2.17 Homer1a基因敲除小鼠鉴定
        2.18 蛋白质谱分析（与第一部分方法相同）
        2.19 统计学分析（与第一部分方法相同）
    3 结果
        3.1 小鼠TBI后Homer1在脑组织中的蛋白表达水平变化
        3.2 Homer1a基因敲除小鼠鉴定
        3.3 小鼠皮层内转染
        3.4 调节Homer1a表达在动物行为学中的作用
        3.5 调节Homer1a表达对神经功能评分的影响
        3.6 调节Homer1a在小鼠脑中的表达对脑水肿程度的改变
        3.7 质谱分析Homer1a基因敲除后的蛋白组变化
        3.8 调节Homer1a表达对相关通路蛋白的影响
    4 讨论
小结
参考文献
个人简历和研究成果
致谢



本文编号：2990117