主动脉瓣病变表型和发病机制研究

发布时间：2021-02-04 08:07

　　主动脉瓣疾病（aortic valve disease,AVD）是最常见的心脏瓣膜疾病。随着人口老龄化加剧,全球范围内以纤维增生钙化和粘液样改变为代表的退行性主动脉瓣病变比例逐年升高。与此同时,在我国风湿性瓣膜病仍在主动脉瓣疾病中占有很大比例。对于AVD患者尚无有效的药物治疗方案,主动脉瓣置换手术是唯一有效的治疗方式,成本高,风险大,社会负担重。主动脉瓣病变涉及多种细胞和生物学过程,既往研究虽然对其特定表型和机制进行了一定程度的探索,但未能系统阐明病变的关键环节和干预靶点。因此,系统描述主动脉瓣病变表型,在传统分子生物学实验研究的基础上,应用组学技术和AVD患者瓣膜样本,全面描述参与病变的分子、细胞种类与功能,结合生物信息学分析构建相互作用网络,对于明确发病机制中的关键分子、细胞类型具有十分重要的意义,也会为疾病的有效精准干预提供新的靶点。主动脉瓣解剖结构包括正常三叶主动脉瓣,二叶化主动脉瓣及其亚型等多种分型,通过影响主动脉瓣血流动力状态参与疾病发生。然而,既往研究并未对主动脉瓣解剖结构进行精确的区分,不同解剖结构对应AVD表型特征并不明确。因此,本研究第一部分根据精准主动脉瓣解剖结构... 

【文章来源】：北京协和医学院北京市 211工程院校 985工程院校

【文章页数】：122 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
    第一部分: 基于主动脉瓣外科手术精准解剖分型的主动脉瓣疾病表型分析研究
    第二部分: Meis2在主动脉瓣间质细胞钙化过程中的作用与机制研究
    第三部分: 人类退行性主动脉瓣组织长链非编码RNA表达谱分析研究
    第四部分: 基于单细胞测序技术的主动脉瓣疾病细胞微环境研究
Abstract
    Part1: Phenotypes of Aortic Valves Disease according to Detailed Anatomical Classification ofPatients underwent Aortic Valve Replacement Sugery
    Part2: Meis2 represses the osteoblastic transdifferentiation of aortic valve interstitial cells throughthe Notch1/Twist1 pathway
    Part3: Landscape of Long noncoding RNA in Human Degenerative Aortic Valves
    Part4: Single-Cell Transcriptome Analysis of the Landscape of Human Aortic Valves
第一部分 基于主动脉瓣外科手术精准解剖分型的主动脉瓣疾病表型分析研究
    1. 前言
    2. 方法
        2.1 研究对象和数据采集
        2.2 主动脉瓣解剖结构的诊断
        2.3 术前影像学检查和影像学诊断准确性评价方法
        2.4 主动脉瓣组织病理学诊断
        2.5 统计学分析
    3. 结果
        3.1 入选患者人口学特征
        3.2 不同解剖分型主动脉瓣组织病理学特征
        3.3 不同主动脉瓣解剖结构AVD患者术前心脏结构功能及血流动力学特征
        3.4 术前影像学检查诊断主动脉瓣解剖结构准确性
        3.5 影响术前TTE检查诊断BAV准确性的因素分析
    4. 讨论
    5. 结论
    参考文献
第二部分 Meis2在主动脉瓣间质细胞钙化过程中的作用与机制研究
    1. 前言
    2. 方法
        2.1 主动脉瓣组织样本采集
        2.2 组织病理检测
        2.3 免疫组织化学染色和免疫荧光染色
        2.4 流式细胞检测
        2.5 细胞培养
        2.6 小干扰RNA转染
        2.7 碱性磷酸酶活性检测和茜素红染色检测钙化结节
        2.8 定量实时PCR
        2.9 蛋白质印迹法检测
        2.10 统计学分析
    3. 结果
        3.1 人类主动脉瓣组织来源临床特征及组织病理学表型
        3.2 人类钙化和正常主动脉瓣组织中Meis2表达情况
        3.3 体外实验中Meis2对于PAVICs钙化结节形成以及ALP活性的作用
        3.4 体外实验中Meis2通过Notch1信号通路影响PAVICs成骨相关基因表达
    4. 讨论
    5. 结论
    参考文献
第三部分 人类退行性主动脉瓣组织长链非编码RNA表达谱分析研究
    1. 前言
    2. 方法
        2.1 入选患者临床特征采集
        2.2 样本准备
        2.3 RNA提取
        2.4 构建lncRNA文库
        2.5 测序
        2.6 生物信息学分析
    3. 结果
        3.1 人类主动脉瓣组织来源患者临床特征
        3.2 主动脉瓣组织lncRNA整体概况
        3.3 退行性主动脉瓣组织差异表达lncRNA
        3.4 退行性主动脉瓣差异lncRNA共表达mRNA及GO/KEGG富集分析
        3.5 基于内源竞争RNA的退行性主动脉瓣组织lncRNA-miRNA-mRNA网络分析
    4. 讨论
    5. 结论
    参考文献
第四部分 基于单细胞测序技术的主动脉瓣疾病细胞微环境研究
    1. 前言
    2. 方法
        2.1 主动脉瓣组织样本采集与细胞分离
        2.2 单细胞测序
        2.3 数据分析
    3. 结果
        3.1 人类主动脉瓣组织细胞类型概况
        3.2 内皮细胞在维持主动脉瓣正常结构过程中发挥重要作用
        3.3 间质细胞的增殖和分化在主动脉瓣疾病中发挥关键作用
        3.4 免疫细胞促进主动脉瓣疾病的发生
        3.5 虚拟时间分析鉴别主动脉瓣钙化过程中关键细胞类型及功能改变
    4. 讨论
    5. 结论
    参考文献
第五部分 综述 组学技术在主动脉瓣疾病机制研究中的应用现况与展望
    1. 前言
    2. 组学技术概况
        2.1 基因组学
        2.2 表观遗传组学
        2.3 转录组学
        2.4 蛋白组学
        2.5 代谢组学
        2.6 微生物组学
        2.7 单细胞组学
    3. 组学技术在主动脉瓣疾病研究中的应用
        3.1 基因组学在主动脉瓣疾病研究中的应用
        3.2 转录组学在主动脉瓣疾病研究中的应用
        3.3 蛋白质组学在主动脉瓣疾病研究中的应用
        3.4 多组学技术在主动脉瓣机制研究中的应用
        3.5 单细胞测序技术在主动脉瓣机制研究中的应用
    4. 展望
    参考文献
附录
    个人简历及学术成果
        教育经历
        荣誉奖励
        发表学术论文
        学术会议
致谢



本文编号：3018011