腰椎退变肥厚黄韧带中细胞凋亡及凋亡因子Caspase-3、Fas、P53的表达
发布时间：2021-02-07 06:42
目的:通过检测腰椎退变肥厚黄韧带组织中的细胞凋亡率及凋亡因子Caspase-3、Fas、P53的表达,为深入了解参与腰椎黄韧带细胞凋亡的信号传导途径做基础。方法:实验组取自腰椎管狭窄症行手术减压的患者50例,所有黄韧带经过术前MRI测量及术后测量证实为属于退变肥厚黄韧带组织,其中男性22例,女性28例,年龄32-74岁,平均为54.46岁。对照组取自腰椎间盘突出症及爆裂性腰椎骨折行手术减压的患者30例,所有黄韧带经过术前MRI测量及术后测量证实为属于非肥厚黄韧带组织,其中男性19例,女性11例,年龄19-67岁,平均为47.27岁。取材部位均为L2-S1节段黄韧带。对两组黄韧带厚度进行测量,采用TUNEL染色法检测黄韧带中的凋亡细胞率,用SP免疫组织化学染色法检测凋亡因子Caspase-3、Fas、P53的表达水平。结果:（1）实验组厚度范围为4.5-8.0 mm,平均为5.63 mm,对照组厚度范围为2.3-4.0 mm,平均为3.56 mm,两组比较差异有统计学意义;（2）TUNEL染色示实验组的平均凋亡细胞率高于对照组[（37.80±3...
【文章来源】：新疆医科大学新疆维吾尔自治区
【文章页数】：56 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
影像学资料A与B表现为腰椎管狭
新疆医科大学硕士学位论文7图2对照组腰椎间盘突出症患者MRI影像Fig.2MRIimageoflumbardischerniationincontrolgroup图2：影像学资料A与B表现为L5-S1节段腰椎间盘突出，其椎管未见明显狭窄，黄韧带未见明显增厚。1.2实验材料名称厂商4%多聚甲醛溶液武汉博士德生物工程有限公司RapidCal·Immuno脱钙液美国Lymed公司PBS漂洗缓冲溶液武汉博士德生物工程有限公司二甲苯试剂天津市大茂化学试剂有限公司无水乙醇试剂天津市大茂化学试剂有限公司过氧化氢溶液（30%）天津市大茂化学试剂有限公司柠檬酸缓冲试剂武汉博士德生物工程有限公司封闭用羊血清试剂北京中杉金桥生物技术有限公司Anti-Caspase-3抗体试剂英国abcom有限公司Anti-Fas抗体试剂英国abcom有限公司Anti-P53抗体试剂英国abcom有限公司抗体稀释试剂北京中杉金桥生物技术有限公司兔Kit酶标山羊抗兔IgG聚合物试剂北京中杉金桥生物技术有限公司DAB显色试剂盒DABKit北京中杉金桥生物技术有限公司InSituApoptosisDetection试剂盒英国abcom有限公司苏木素染色试剂北京九洲柏林生物科技有限公司盐酸试剂天津市大茂化学试剂有限公司中性树胶北京中杉金桥生物技术有限公司AB
新疆医科大学硕士学位论文14表3实验组与对照组黄韧带凋亡细胞率比较Table.3Comparisonoftherateofapoptoticcellsintheligamentumflavumbetweentheexperimentalgroupandthecontrolgroup图3实验组和对照组黄韧带TUNEL染色对比Fig.3ComparisonofTUNELstainingofligamentumflavuminexperimentalgroupandcontrolgroup图3-1实验组TUNEL染色(400倍）图3-2对照组TUNEL染色（400倍）Fig.3-1ExperimentalgroupTUNELFig.3-2ControlgroupTUNELstainingstaining(400times)(400times)3免疫组织化学染色结果3.1实验组免疫组化染色退变肥厚黄韧带组织情况多表现为细胞核染色呈棕黄色或棕褐色，染色深，细胞排列紊乱，正常形态结构消失，胞核变小，胞膜皱缩。①凋亡因子Caspase-3染色阴性为0例，阳性为33例，强阳性为17例，阳性率为100%；②凋亡因子Fas染色阴性为0例，阳性为32例，强阳性为18例，阳性率为100%；③凋亡因子P53染色阴性为0例，阳性为34例，强阳性为16例，阳性率为100%，凋亡因子Caspase-3、Fas、P53均表达阳性率高。3.2对照组免疫组化染色正常黄韧带组织情况多表现为细胞核染色呈淡黄色或棕黄色，染色较浅，细胞排列规律，细胞形态表现正常。①凋亡因子Caspase-3染色阴性为26例，阳性4例，强阳性为0例，阳性率为13.3%；②凋亡因子Fas染色阴性为25例，阳性5例，强阳性为0例，阳性率为16.7%；③凋亡因子P53染色阴性为27例，阳性3例，强阳性为0例，阳性率为10%，凋亡因子Caspase-3、Fas、P53均表达阳性率较低。实验组和对照组凋亡因子Caspase-3阳性表达强度经卡方检验，(2χ=64.78，P<组别标本数(n)凋亡率（%）P实验组5037.80±3.04＜0.001对照组3013.18±1.34
【参考文献】：
期刊论文
[1]p38丝裂原活化蛋白激酶通路介导TGF-β1/结缔组织生长因子调控人腰椎黄韧带增生肥厚的机制研究[J]. 卢昌怀,刘志军,张宏波,段扬,曹延林. 中国修复重建外科杂志. 2019(06)
[2]细胞因子bFGF和NF-κB在腰椎黄韧带肥厚中的表达及意义[J]. 林伟文,凌华军,钟思龙,罗鹏刚,吴增志,夏雄超,赖茂松,熊浩. 海南医学. 2019(07)
[3]腰椎间盘突出症患者血清中Caspase-3和Caspase-9活性研究[J]. 赵英伦,马元,莫森,李东冉,王军,刘冲,詹新立. 现代检验医学杂志. 2018(02)
[4]腰椎黄韧带肥厚与细胞凋亡关系的实验研究[J]. 阿力木江·阿西木,吐尔洪江·阿布都热西提,艾尔肯·阿木冬. 临床医药文献电子杂志. 2017(92)
[5]中国新疆地区腰椎管狭窄患者腰椎黄韧带肥厚的危险因素分析:回顾性、单中心、病例分析[J]. 周纲,张玉坤,黄卫民. 中国组织工程研究. 2017(19)
[6]腰椎黄韧带增生肥厚中氧自由基H2O2介导转化生长因子β1表达的作用及意义[J]. 王智清,陈雄生,周盛源,许国峰. 中国组织工程研究. 2017(12)
[7]Fas在退变的兔椎间盘终板凋亡中的表达及作用通路研究[J]. 吕浩然,刘尚礼,黄东生,丁悦,胡宝山,叶伟. 中华实验外科杂志. 2016 (01)
[8]FAM105A通过caspase依赖性途径和Bcl-2家族诱导细胞凋亡[J]. 袁梦,赵永浩,王云姝,刘亦倩,张弦,许华曦,张云武. 厦门大学学报(自然科学版). 2011(06)
[9]CT横断面测量分析腰椎管狭窄症与黄韧带肥厚的关系[J]. 阚敏慧,程爱国,杜宁. 中国组织工程研究与临床康复. 2010(52)
[10]兔退变椎间盘中髓核细胞凋亡与BNIP3基因表达的意义[J]. 曾顺福,刘杰,王建. 中国修复重建外科杂志. 2010(11)
博士论文
[1]Fas, caspase-3, bcl-2在骨关节炎软骨中的表达及意义[D]. 张铁峰.中国医科大学 2007
硕士论文
[1]退变黄韧带组织中细胞凋亡及相关基因Bax和Bcl-2的表达[D]. 王起腾.新疆医科大学 2019
本文编号：3021842
【文章来源】：新疆医科大学新疆维吾尔自治区
【文章页数】：56 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
影像学资料A与B表现为腰椎管狭
新疆医科大学硕士学位论文7图2对照组腰椎间盘突出症患者MRI影像Fig.2MRIimageoflumbardischerniationincontrolgroup图2：影像学资料A与B表现为L5-S1节段腰椎间盘突出，其椎管未见明显狭窄，黄韧带未见明显增厚。1.2实验材料名称厂商4%多聚甲醛溶液武汉博士德生物工程有限公司RapidCal·Immuno脱钙液美国Lymed公司PBS漂洗缓冲溶液武汉博士德生物工程有限公司二甲苯试剂天津市大茂化学试剂有限公司无水乙醇试剂天津市大茂化学试剂有限公司过氧化氢溶液（30%）天津市大茂化学试剂有限公司柠檬酸缓冲试剂武汉博士德生物工程有限公司封闭用羊血清试剂北京中杉金桥生物技术有限公司Anti-Caspase-3抗体试剂英国abcom有限公司Anti-Fas抗体试剂英国abcom有限公司Anti-P53抗体试剂英国abcom有限公司抗体稀释试剂北京中杉金桥生物技术有限公司兔Kit酶标山羊抗兔IgG聚合物试剂北京中杉金桥生物技术有限公司DAB显色试剂盒DABKit北京中杉金桥生物技术有限公司InSituApoptosisDetection试剂盒英国abcom有限公司苏木素染色试剂北京九洲柏林生物科技有限公司盐酸试剂天津市大茂化学试剂有限公司中性树胶北京中杉金桥生物技术有限公司AB
新疆医科大学硕士学位论文14表3实验组与对照组黄韧带凋亡细胞率比较Table.3Comparisonoftherateofapoptoticcellsintheligamentumflavumbetweentheexperimentalgroupandthecontrolgroup图3实验组和对照组黄韧带TUNEL染色对比Fig.3ComparisonofTUNELstainingofligamentumflavuminexperimentalgroupandcontrolgroup图3-1实验组TUNEL染色(400倍）图3-2对照组TUNEL染色（400倍）Fig.3-1ExperimentalgroupTUNELFig.3-2ControlgroupTUNELstainingstaining(400times)(400times)3免疫组织化学染色结果3.1实验组免疫组化染色退变肥厚黄韧带组织情况多表现为细胞核染色呈棕黄色或棕褐色，染色深，细胞排列紊乱，正常形态结构消失，胞核变小，胞膜皱缩。①凋亡因子Caspase-3染色阴性为0例，阳性为33例，强阳性为17例，阳性率为100%；②凋亡因子Fas染色阴性为0例，阳性为32例，强阳性为18例，阳性率为100%；③凋亡因子P53染色阴性为0例，阳性为34例，强阳性为16例，阳性率为100%，凋亡因子Caspase-3、Fas、P53均表达阳性率高。3.2对照组免疫组化染色正常黄韧带组织情况多表现为细胞核染色呈淡黄色或棕黄色，染色较浅，细胞排列规律，细胞形态表现正常。①凋亡因子Caspase-3染色阴性为26例，阳性4例，强阳性为0例，阳性率为13.3%；②凋亡因子Fas染色阴性为25例，阳性5例，强阳性为0例，阳性率为16.7%；③凋亡因子P53染色阴性为27例，阳性3例，强阳性为0例，阳性率为10%，凋亡因子Caspase-3、Fas、P53均表达阳性率较低。实验组和对照组凋亡因子Caspase-3阳性表达强度经卡方检验，(2χ=64.78，P<组别标本数(n)凋亡率（%）P实验组5037.80±3.04＜0.001对照组3013.18±1.34
【参考文献】：
期刊论文
[1]p38丝裂原活化蛋白激酶通路介导TGF-β1/结缔组织生长因子调控人腰椎黄韧带增生肥厚的机制研究[J]. 卢昌怀,刘志军,张宏波,段扬,曹延林. 中国修复重建外科杂志. 2019(06)
[2]细胞因子bFGF和NF-κB在腰椎黄韧带肥厚中的表达及意义[J]. 林伟文,凌华军,钟思龙,罗鹏刚,吴增志,夏雄超,赖茂松,熊浩. 海南医学. 2019(07)
[3]腰椎间盘突出症患者血清中Caspase-3和Caspase-9活性研究[J]. 赵英伦,马元,莫森,李东冉,王军,刘冲,詹新立. 现代检验医学杂志. 2018(02)
[4]腰椎黄韧带肥厚与细胞凋亡关系的实验研究[J]. 阿力木江·阿西木,吐尔洪江·阿布都热西提,艾尔肯·阿木冬. 临床医药文献电子杂志. 2017(92)
[5]中国新疆地区腰椎管狭窄患者腰椎黄韧带肥厚的危险因素分析:回顾性、单中心、病例分析[J]. 周纲,张玉坤,黄卫民. 中国组织工程研究. 2017(19)
[6]腰椎黄韧带增生肥厚中氧自由基H2O2介导转化生长因子β1表达的作用及意义[J]. 王智清,陈雄生,周盛源,许国峰. 中国组织工程研究. 2017(12)
[7]Fas在退变的兔椎间盘终板凋亡中的表达及作用通路研究[J]. 吕浩然,刘尚礼,黄东生,丁悦,胡宝山,叶伟. 中华实验外科杂志. 2016 (01)
[8]FAM105A通过caspase依赖性途径和Bcl-2家族诱导细胞凋亡[J]. 袁梦,赵永浩,王云姝,刘亦倩,张弦,许华曦,张云武. 厦门大学学报(自然科学版). 2011(06)
[9]CT横断面测量分析腰椎管狭窄症与黄韧带肥厚的关系[J]. 阚敏慧,程爱国,杜宁. 中国组织工程研究与临床康复. 2010(52)
[10]兔退变椎间盘中髓核细胞凋亡与BNIP3基因表达的意义[J]. 曾顺福,刘杰,王建. 中国修复重建外科杂志. 2010(11)
博士论文
[1]Fas, caspase-3, bcl-2在骨关节炎软骨中的表达及意义[D]. 张铁峰.中国医科大学 2007
硕士论文
[1]退变黄韧带组织中细胞凋亡及相关基因Bax和Bcl-2的表达[D]. 王起腾.新疆医科大学 2019
本文编号：3021842
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