自噬在袖状胃切除术治疗ZDF大鼠的机制以及EGCG对α细胞氧化应激保护作用的研究

发布时间：2021-02-14 21:59

　　第一部分自噬在袖状胃切除术治疗2型糖尿病大鼠中的机制研究随着社会经济的发展和人们生活方式的改变,全球范围内2型糖尿病患病率呈逐年上升趋势,而肥胖与2型糖尿病的发生有紧密联系。肥胖合并2型糖尿病患者常伴有非酒精性脂肪性肝病和心脑血管等疾病,其特点是肝脏中血脂代谢异常以及甘油三酯（TG）以脂滴的形式过度积累。临床研究表明,袖状胃切除术用于治疗减重和2型糖尿病的治疗,具有操作简单、手术时间短、并发症少等特点,使其成为广泛采用的治疗减重与糖尿病的术式,然而其对于治疗2型糖尿病的机制尚不明确。近年来随着对自噬机制的深入研究,不断有证据表明,自噬在糖代谢和脂质代谢中起到重要作用,这提示了自噬对于2型糖尿病缓解的潜在机制。前期工作表明袖状胃切除术中对于2型糖尿病大鼠模型肝脏脂肪过度积累逆转、血糖下降、胰岛素抵抗改善。本研究旨在探究袖状胃切除术后大鼠肝脏自噬的变化对于降低肝脏脂质和缓解糖尿病的作用。第二部分EGCG对过氧化氢诱导的α-细胞氧化应激保护作用的研究低血糖是糖尿病患者实现稳定代谢控制的一个主要障碍,这是一个严重的临床问题。随着糖尿病的进展,胰腺细胞对抗低血糖的能力受损;然而,目前尚不清楚在低... 

【文章来源】：华东理工大学上海市 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：69 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
第一部分 自噬在袖状胃切除术治疗2型糖尿病大鼠中的机制研究
    摘要
    Abstract
第二部分 EGCG对过氧化氢诱导的α-细胞氧化应激保护作用的研究
    摘要
    Abstract
第一部分 自噬在袖状胃切除术治疗2型糖尿病大鼠中的机制研究
    第1章 前言
        1.1 2型糖尿病的研究背景
        1.2 2型糖尿病的发病原因和机理
            1.2.1 环境因素
            1.2.2 遗传因素
        1.3 2型糖尿病的治疗方法
            1.3.1 二甲双胍
            1.3.2 噻唑烷二酮类
            1.3.3 磺酰脲类
            1.3.4 胰高血糖素样肽-1（GLP-1）极其类似物
            1.3.5 针对减轻心血管并发症的药物
            1.3.6 血管紧张素转换酶抑制剂
            1.3.7 他汀类药物
            1.3.8 阿司匹林
        1.4 2型糖尿病的影响因素
            1.4.1 遗传因素对2型糖尿病的影响
            1.4.2 细胞机制
        1.5 减重手术的研究背景
            1.5.1 减重手术机制的研究
            1.5.2 减重手术术式
        1.6 自噬的研究背景
            1.6.1 自噬过程
            1.6.2 自噬在肝脏脂代谢中的研究
    第2章 实验材料与方法
        2.1 动物分组和二型糖尿病模型的建立
            2.1.1 实验动物的分组和喂养
            2.1.2 袖状胃切除术的实施
        2.2 肝脏总蛋白样品的提取
        2.3 总蛋白的定量和变性
            2.3.1 BCA法测定蛋白浓度
        2.4 蛋白免疫印迹分析（Western Blot）
            2.4.1 SDS-PAGE胶的配制
            2.4.2 电泳
            2.4.3 转膜
            2.4.4 封闭
            2.4.5 孵育一抗
            2.4.6 孵育二抗
            2.4.7 显影
            2.4.8 灰度值分析
        2.5 RT-PCR
            2.5.1 组织总RNA的提取
            2.5.2 RNA样本浓度的测定
            2.5.3 荧光定量PCR
            2.5.4 引物序列
        2.6 肝脏组织免疫荧光检测方法
            2.6.1 组织的固定
            2.6.2 包埋
            2.6.3 切片
            2.6.4 封闭
            2.6.5 孵育一抗
            2.6.6 孵育二抗
        2.7 血脂指标的测定
            2.7.1 大鼠血清的制备
            2.7.2 血脂指标的检测
    第3章 实验结果
        3.1 术后肝脏自噬水平的检测
            3.1.1 Western Blot验证术后肝脏自噬水平
            3.1.2 免疫荧光验证袖状胃术后肝脏自噬水平
            3.1.3 Western Blot验证Bcl-xL的表达
            3.1.4 自噬相关基因在实施袖状胃切除术后大鼠肝脏中的表达情况
        3.2 血脂指标的检测
        3.3 脂肪酶的检测
    第4章 讨论
    第5章 结论
第二部分 EGCG对过氧化氢诱导的α-细胞氧化应激保护作用的研究
    第1章 前言
        1.1 糖尿病合并低血糖
        1.2 EGCG功能的研究背景
            1.2.1 抗氧化作用
            1.2.2 对代谢的影响
            1.2.3 EGCG的抗炎作用
        1.3 自由基研究背景
        1.4 氧化应激研究背景
        1.5 机体中自由基的产生和氧化应激
    第2章 实验材料与方法
        2.1 细胞培养
        2.2 ROS检测
        2.3 细胞活力检测
        2.4 胰高血糖素分泌的检测
        2.5 细胞凋亡检测
        2.6 数据统计
    第3章 实验结果
        3.1 EGCG对过氧化氢处理的α-细胞的细胞活性的影响
            3.1.1 活性氧的检测
            3.1.2 细胞活性检测
        3.2 胰高血糖素原mRNA的检测
        3.3 EGCG和过氧化氢对细胞凋亡的影响
    第4章 讨论
    第5章 结论
参考文献
致谢
附录Ⅰ 在校期间发表的文章


【参考文献】：
期刊论文
[1]Complex role of autophagy in regulation of hepatic lipid and lipoprotein metabolism[J]. Mostafa Zamani,Jennifer Taher,Khosrow Adeli.  The Journal of Biomedical Research. 2017(05)
[2]胃旁路术与低热量饮食减重对2型糖尿病患者血糖及肠促胰岛激素水平的影响[J]. 李平,陈名道.  中华内分泌代谢杂志. 2008 (05)



本文编号：3033931