当归多糖/羟基磷灰石骨组织工程支架的制备及特性研究

发布时间：2021-02-22 11:02

　　骨组织工程支架在临床治疗骨缺损和骨疾病有着很重要的应用。羟基磷灰石是人体骨组织主要的钙磷化合物,也是骨组织工程最常用的材料之一。然而单纯的羟基磷灰石无法满足造血,促进成骨的生物学性能,也不能促进组织工程血管化,以及抑制免疫排斥反应,不能满足人体骨组织的要求。研究发现,当归多糖有促进细胞增殖、促血管生成、抗炎等活性。所以本文将两者结合起来,制备骨组织工程支架,研究其用于骨组织工程研究的可行性。本文先是通过传统的水提醇沉法制备得到当归多糖（APS）,分离纯化出其组分,进行抗氧化研究。再通过沉淀法制备羟基磷灰石以及反相乳液法制备当归多糖/壳聚糖/羟基磷灰石复合微球,借助复合微球来缓释其中的当归多糖成分;将复合微球与羟基磷灰石结合,制成磷酸钙骨水泥,优化其制备工艺,并进行表征。最后建立皮质口袋缺损和胫骨骨缺损动物模型,通过组织病理学观察骨水泥的组织相容性。实验结果显示,当归多糖提取率为12.6%,经DEAE-cellulose 52纤维素柱和Sephadex G-50色谱柱分离出APS1a,APS1b和APS2c。在0.5 mg/mL多糖浓度下,APS2c对羟基自由基和DPPH自由基的清除率分... 

【文章来源】：兰州理工大学甘肃省

【文章页数】：60 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
缩写词（Abbreviations）
第1章 绪论
    1.1 骨组织工程的研究概况
        1.1.1 影响成骨的种子细胞和生长因子
        1.1.2 现代骨组织工程应用较广的材料
        1.1.3 骨水泥
        1.1.4 骨组织工程面临的问题
    1.2 骨组织工程促血管研究进展
        1.2.1 血管形成的基本过程
        1.2.2 骨组织工程促血管化的有关细胞和生长因子
        1.2.3 促组织工程化骨血管化的技术
    1.3 当归多糖的研究概况
    1.4 课题研究内容、目的和意义
第2章 当归多糖的制备及其抗氧化研究
    2.1 前言
    2.2 实验材料
        2.2.1 仪器
        2.2.2 药品与试剂
    2.3 试验方法
        2.3.1 当归多糖的制备
        2.3.2 当归多糖的含量测定
            2.3.2.1 葡萄糖标准液的配制
            2.3.2.2 标准曲线的绘制
            2.3.2.3 多糖含量的测定
        2.3.3 DEAE-cellulose 52纤维素柱分离纯化多糖
            2.3.3.1 预处理
            2.3.3.2 装柱与平衡
            2.3.3.3 上样
            2.3.3.4 苯酚-硫酸法测分离多糖的吸光度
        2.3.4 Sephadex G-50柱分离纯化当归多糖
        2.3.5 抗氧化活性的测定
            2.3.5.1 当归多糖清除羟基自由基的测定
            2.3.5.2 当归多糖清除DPPH自由基的测定
            2.3.5.3 当归多糖总还原力的测定
    2.4 结果与分析
        2.4.1 当归多糖含量
        2.4.2 当归多糖洗脱过程
        2.4.3 当归多糖抗氧化活性测定
            2.4.3.1 当归多糖对羟基自由基清除测定
            2.4.3.2 当归多糖对DPPH自由基清除测定
            2.4.3.3 当归多糖对总还原力清除测定
    2.5 讨论
第3章 当归多糖和羟基磷灰石复合支架的制备工艺及表征
    3.1 前言
    3.2 实验材料
        3.2.1 仪器
        3.2.2 药品与试剂
    3.3 实验方法
        3.3.1 羟基磷灰石的制备
        3.3.2 羟基磷灰石/壳聚糖/当归多糖复合微球的制备
        3.3.3 交联速度搅拌
        3.3.4 载药量和包埋率测定
        3.3.5 复合微球中当归多糖体外释放测定
        3.3.6 复合材料支架的制备
        3.3.7 复合支架固化时间
        3.3.8 复合材料抗压强度
        3.3.9 复合材料降解
    3.4 结果与分析
        3.4.1 制得羟基磷灰石
        3.4.2 复合微球最佳工艺
        3.4.3 复合微球的载药量和包埋率测定
        3.4.4 复合微球APS体外释放
        3.4.5 复合材料的制备
        3.4.6 测定复合支架最佳固化时间
        3.4.7 复合支架体外降解
    3.5 讨论
第4章 当归多糖/羟基磷灰石骨组织工程支架的动物实验
    4.1 前言
    4.2 实验材料
        4.2.1 材料
        4.2.2 仪器
    4.3 实验方法
        4.3.1 材料的消毒与预处理
        4.3.2 动物实验
            4.3.2.1 复合材料植入
            4.3.2.2 扫描电镜前处理
            4.3.2.3 组织切片制作过程
            4.3.2.4 骨组织切片
    4.4 结果与分析
        4.4.1 复合材料植入前后的扫描电镜观察
        4.4.2 组织学检查
    4.5 讨论
结论
参考文献
致谢
附录A 攻读学位期间发表的论文


【参考文献】：
期刊论文
[1]羟基磷灰石复合材料制备技术的研究进展[J]. 张琦,浦益琼,王冰,张彤,吴佩颖.  中成药. 2015(12)
[2]促血管生成物质在组织工程中的研究进展[J]. 张莹雪,王蔚,袁直.  高分子通报. 2015(09)
[3]骨缺损动物模型的研究进展[J]. 岳飞翔,隋海明.  中国民族民间医药. 2015(16)
[4]骨组织工程支架的研究进展[J]. 袁景,甄平.  医学综述. 2015(12)
[5]骨组织工程中支架材料的研究进展[J]. 朱立家,杜大江.  医学临床研究. 2015 (05)
[6]骨组织工程中促进血管化策略的研究进展[J]. 陈凯,张超,王路,毛雨彦,卢建熙,陈雷.  中国骨伤. 2015(04)
[7]当归多糖对造血功能的影响及其机制的研究[J]. 毛宇,徐芳,邹云,徐晓娟,贺建华.  食品研究与开发. 2015(08)
[8]组织工程骨的快速血管化[J]. 鲍小刚,许国华.  中国组织工程研究. 2015(07)
[9]改良混合脱钙液在骨髓活检组织中的应用[J]. 黄蓉飞,江亮,龙小艺,张国宾.  成都医学院学报. 2014(06)
[10]天然活性多糖提取及分离纯化技术研究进展[J]. 杨丽华,林楚慧,黄佳銮,姚松君,高新开,李丹,胡烨敏,孟平,焦红,陈骁熠.  湖北农业科学. 2014(23)



本文编号：3045890